孟庆海
- 作品数:161 被引量:540H指数:11
- 供职机构:青岛大学更多>>
- 发文基金:山东省自然科学基金国家自然科学基金青岛市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- 全骨髓贴壁法获纯化骨髓间充质干细胞向神经干细胞的诱导分化被引量:16
- 2008年
- 目的:来源于骨髓间充质干细胞的神经干细胞是最近研究的一个热点。实验拟进一步验证通过全骨髓贴壁法分离纯化骨髓间充质干细胞并诱导分化为神经干细胞的效率,并对其的体内外标记进行了观察。方法:实验于2006-11/2007-05在青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所完成。①实验材料:选取出生4周左右Wistar大鼠,雌雄不拘,SPF级,体质量200g左右,由青岛市实验动物和动物实验中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法:选用出生4周左右Wistar大鼠,由其股骨和胫骨分离纯化骨髓间充质干细胞,加碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子诱导其分化为神经干细胞,并进行免疫组织化学鉴定。以5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记神经干细胞,在24孔板中进行细胞免疫组织化学和免疫荧光鉴定。将标记的神经干细胞定位注入大鼠基底节区,1周后取脑作石蜡切片,进行免疫组织化学和免疫荧光染色。结果:获得了较纯化的骨髓间充质干细胞,经诱导72h后,部分细胞增殖分裂成小圆形,呈团簇状半悬浮状态。继续培养72h可见细胞呈现典型神经元样改变,细胞伸出两个或多个突起,胞体呈多角形或不规则形,折光性较强,细胞突起之间相互连接成网状,可见细胞核及核仁,经诱导后有巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白阳性细胞表达。采用BrdU掺入DNA合成期的神经干细胞,1周后体内外标记阳性率>85%。结论:采用全骨髓贴壁法可获得较纯化的骨髓间充质干细胞,其在适宜的诱导分化条件下可诱导分化神经干细胞。BrdU可作为神经干细胞体内示踪的理想标记物。
- 张建富孟庆海金澎刘广义
- 关键词:骨髓间充质干细胞神经干细胞5-溴脱氧尿嘧啶核苷诱导分化
- 经扩大鞍隔孔向鞍上生长的垂体腺瘤3例报告
- 2006年
- 姚维成孟庆海蔡恩源杨新生
- 关键词:垂体腺瘤
- 脑胶质瘤干细胞的体外培养与生物学特性观察被引量:5
- 2007年
- 目的体外培养人脑胶质瘤干细胞并观察其生物学特性。方法应用无血清培养技术,从手术中获取的人脑胶质瘤组织培养得到肿瘤干细胞,诱导其分化后与原肿瘤组织细胞进行比较。应用细胞免疫荧光技术鉴定肿瘤干细胞表面标志物。结果分别在间变性星形细胞瘤和胶质母细胞瘤中培养得到悬浮生长的肿瘤干细胞球,其能在体外自我更新、增殖,形成新的克隆性细胞球,保持连续稳定的传代,能表达神经干细胞表面标志物CD 133。在含血清培养基中能够分化为与原肿瘤组织相似的贴壁生长的细胞。结论人脑胶质瘤中存在一定量的肿瘤干细胞,能够自我更新增殖、诱导分化、表达干细胞标志物CD 133。为探讨脑胶质瘤的发病机制奠定了基础。
- 车树圣孟庆海金澎李洛刘福生
- 关键词:脑肿瘤肿瘤干细胞细胞培养
- 肿瘤干细胞致敏的树突状细胞对脑胶质瘤细胞免疫的影响被引量:10
- 2011年
- 目的 研究肿瘤干细胞(BTSCs)致敏的树突状细胞(DCs)疫苗对颅内荷瘤小鼠的治疗作用.方法 无血清培养基中加入表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子,将C6胶质瘤细胞诱导成胶质瘤干细胞,以此致敏大鼠骨髓来源的树突状细胞制备疫苗;立体定向建立大鼠颅内C6胶质瘤模型,分为A、B、C、D四组.每组分别经尾静脉注射1×107BTSCs致敏的DCs(DCs-BTSCs)、1×107 C6胶质瘤细胞致敏的DCs(DCs-C6)、1×107DCs及PBS,Kaplan-Meier法对大鼠生存情况进行分析,大鼠脑组织标本行HE染色及免疫组化分析.结果 胶质瘤干细胞CD133+及nestin染色阳性;DCs具有典型的树突状结构,特异性标志OX62+表达阳性;生存时间A组较其他组明显延长,Log-rank检验差异有统计学意义(P<0.05);A组HE染色炎性细胞浸润最多,免疫组化可见较多的CD8+T淋巴细胞.结论 肿瘤干细胞致敏的树突状细胞疫苗能明显提高机体对胶质瘤的免疫力,其作用优于胶质瘤细胞致敏的树突状细胞疫苗,为树突状细胞疫苗的临床应用提供了新的依据.
- 宫安静李新钢孟庆海王东海赵鹏
- 关键词:神经胶质瘤肿瘤干细胞树突状细胞免疫治疗
- 树突状细胞的培养及其诱导的神经胶质瘤体外杀伤作用研究被引量:3
- 2004年
- 目的 研究负载肿瘤抗原的树突状细胞 (DCs)活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTLs)对神经胶质瘤细胞的体外杀伤效应 ,探讨其用于临床治疗的可行性。方法 体外原代培养 12例胶质瘤细胞 ,冻融法获取胶质瘤细胞抗原 ,联合应用粒细胞 /巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素 4和肿瘤坏死因子 α等 ,对人外周血单核细胞进行体外诱导来获取DCs并负载肿瘤抗原 ,激活自体T淋巴细胞 ,制备特异性CTLs,MTT法检测对胶质瘤细胞的体外杀伤效应。结果 负载胶质瘤抗原的DCs激活的CTLs对胶质瘤细胞有明显的杀伤作用 ,显著高于K5 6 2细胞对照组 ,并且杀伤率随着效靶比的增加而增加。结论 从人外周血中诱导的DCs负载胶质瘤抗原后 ,激活的CTLs在体外对胶质瘤能产生高效的杀伤作用 。
- 孟庆海宫安静李洛
- 关键词:树突状细胞胶质瘤肿瘤免疫
- 海绵窦海绵状血管瘤的诊断及显微手术治疗被引量:4
- 2008年
- 目的探讨海绵窦海绵状血管瘤的临床诊断及显微手术方法。方法回顾分析12例海绵窦海绵状血管瘤病人的临床资料,对相关文献进行复习。结果12例患者均行显微外科手术治疗,8例经颧弓翼点入路,2例经颅眶颧入路,2例经翼点入路,从中颅底硬膜下暴露并切除病变。肿瘤全切除5例,次全切除4例,部分切除3例,无手术死亡病例。术后视力进步者2例,4例有动眼神经麻痹,6例有面部麻木。结论自中颅底硬膜下暴露并切除肿瘤是一种有效的全切肿瘤的方法。经硬膜下入路,切开海绵窦外侧壁可以近距离达到供血动脉,更有效地减少出血。
- 窦以河朱树干孟庆海杨扬闫志勇薄勇力
- 关键词:海绵窦海绵状血管瘤显微外科手术
- 显微手术治疗椎管内肿瘤30例分析被引量:2
- 2007年
- 目的探讨椎管内肿瘤的临床诊断与显微外科治疗方法。方法回顾性分析30例椎管内肿瘤患者的临床资料。结果术后病理检查证实:神经鞘瘤14例,神经纤维瘤8例,脊膜瘤4例,室管膜瘤、畸胎瘤、蛛网膜囊肿、胶质瘤各1例。肿瘤位于颈段15例,胸段9例,腰段5例,骶尾段1例。硬脊膜外肿瘤5例,髓外硬脊膜下22例,髓内3例。肿瘤全切23例(其中髓外肿瘤全切22例,髓内肿瘤全切1例),部分切除7例。出院时29例患者肌力得到明显恢复,20例肢体感觉障碍明显好转,1例症状加重。结论椎管内肿瘤大多为良性肿瘤,手术效果较好,宜早诊断、早手术。MRI检查和显微外科手术可极大地提高手术的疗效。
- 宫安静孟庆海李环廷
- 关键词:椎管内肿瘤显微手术
- 穿刺抽吸治疗新生儿颅骨骨折引起的硬膜外血肿和骨膜下血肿
- 病例资料2010年1月至2010年6月收治2例患儿,均为外院转入,产后3~5天。临床表现为反复抽风、反应差、吃奶差,意识障碍。CT显示均为颞顶部急性硬膜外血肿、局部颅骨线形骨折、相同部位的骨膜下血肿,中线向对侧移位明显。
- 姚维成薄勇力孟庆海
- 经翼点入路行显微手术治疗颅内动脉瘤580例疗效分析
- 本科自1996年12月至2005年12月经Yasargil's翼点入路[1]开颅,行显微手术夹闭颅内动脉瘤580例共600个动脉瘤,临床疗效满意.现将颅内动脉瘤的手术时间、手术技巧及临床疗效作一报告.
- 丰育功孟庆海杨新生张文德王厚忠吴国庆王伟民赵经郊孙敬熙
- 关键词:翼点入路颅内动脉瘤显微技术手术时间
- 文献传递
- γ-分泌酶抑制剂Ⅱ对肿瘤干细胞生长状况的影响
- 2014年
- 目的:从大鼠肿瘤细胞系U87中提取并培养肿瘤干细胞,观察添加γ-分泌酶抑制剂Ⅱ后肿瘤细胞球的生长状况及分化情况。方法:在肿瘤细胞系中加入无血清培养基,对形成的肿瘤细胞球进行免疫荧光鉴定,并吸出吹打,形成单个细胞并贴壁后加入γ-分泌酶抑制剂Ⅱ,观察单个细胞的分化及生长情况。结果:1周时间出现悬浮生长的细胞球,免疫荧光鉴定显示Nestin及CD133均为阳性,加入γ-分泌酶抑制剂Ⅱ后发现肿瘤干细胞增殖速度减慢(P<0.05)。结论:γ-分泌酶抑制剂Ⅱ明显抑制从肿瘤细胞系U87中提取的肿瘤干细胞的增殖及分化,临床上可用其防控乳腺癌及卵巢癌等妇科肿瘤的发生与发展。
- 丁昌青姚维成孟庆海
- 关键词:干细胞乳腺癌卵巢癌