易建中 作品数:72 被引量:129 H指数:5 供职机构: 上海市农业科学院 更多>> 发文基金: 上海市科技人才计划项目 上海市科技兴农重点攻关项目 上海市科委重大科技攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
一种用于基因治疗及疫苗研制的人工合成启动子 本发明公开了一种用于基因治疗及疫苗研制的人工合成启动子。首先人工合成一启动子SEP,通过酶切连接将其插入到含有绿色荧光蛋白的pEGFP-C1载体内,得到一新的启动子ESP,然后借助转染试剂Lipofectamine<Su... 易建中 刘成倩文献传递 西尼罗河热诊断技术与疫苗研究进展 被引量:3 2015年 西尼罗河热(West Nile Fever,WNF)是由西尼河病毒(West Nile Virus,WNV)引起的一种人畜共患病。WNV属于黄病毒科黄病毒属,为一种单链RNA病毒,经蚊子传播,可引起人类发病,也可引起马、鸟类、猫等动物发病。1937年该病毒在西尼罗河地区的乌干达被发现,因此而得名。此病毒由最初只在非洲地区流行到后来跨越到欧洲、亚洲,直到1999年美国纽约出现人感染事件,引起了世界的广泛关注。2002年此病毒肆虐美洲,约有4000多人在44州遭受感染,284人因此而丧生。 刘成倩 李红 易建中 毛慧 王静 陈磊 孙晓云关键词:西尼罗河热 黄病毒科 疫苗 VIRUS 人畜共患病 RNA病毒 在昆虫细胞中表达西尼罗河病毒prM+E蛋白 2018年 采用PCR技术扩增prM+E基因,将其插入到供体质粒pFast-Bac1中得到重组质粒Pfast-Bac1-W-PE,之后转化大肠杆菌DH10-Bac,构建包含西尼罗河病毒prM+E基因的重组杆状病毒,然后感染正常的sf9细胞,收集感染不同时间段的细胞及上层培养基。结果表明:在感染后的第1天目的基因就得到了转录,同时有少量的重组杆状病毒释放到培养基中;SDS-PAGE和Western-Blot检测结果显示,在43.0ku与66.0ku条带之间,感染细胞裂解液较正常细胞的裂解液多出一条带,该蛋白为WNV完整的E蛋白,而且这一差异蛋白能与WNV兔多抗反应。 刘成倩 李红 陈斌 易建中关键词:西尼罗河病毒 杆状病毒表达系统 猪繁殖与呼吸综合征RT-LAMP检测方法的建立和初步应用 被引量:1 2018年 根据Genbank上已报道的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因组序列设计了2对LAMP引物(P-F3/P-B3、P-FIP/P-BIP),通过反转录-环介导等温扩增技术(RT-LAMP)反应条件的优化,建立了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)RT-LAMP检测方法,并通过酶切的方法对阳性结果进行了验证。本方法最低可以检测到反应体系内1pg的PRRSV的RNA,表明本方法具有较高的检测灵敏度;通过在反应中加入SYBR-Green I荧光染料后可以方便地用肉眼对试验结果进行可视化判定。所以,本研究建立的PRRSV的RT-LAMP检测方法能够满足基层临床PRRSV病原的快速检测要求。 孙凤萍 高骏 刘成倩 李红 易建中 姚惠娟关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 PRRSV 孵化场雏鸡母源抗体及微生物学检测 2017年 优质的雏鸡和高孵化率是孵化场成功的关键,而良好的种蛋和环境卫生又是实现这两个条件的主要保障。本文通过实时检测某孵化场雏鸡母源抗体水平和孵化场水质及空气质量状况,及时了解和制定孵化场合理的免疫程序和卫生监控体制。通过检测发现:该鸡场雏鸡禽流感(H5-6-B和H9-B)和新城疫(ND-7)母源抗体水平较高;水样检测结果为该孵化场无沙门氏菌污染,上孵的孵化器中加湿盘大肠杆菌合格率达92.16%;空气质量检测霉菌污染比较严重,合格率为63.93%。 李红 刘成倩 孙凤萍 高骏 易建中关键词:母源抗体 沙门氏菌 霉菌 免疫复合物疫苗用于鸡新城疫病毒感染的研究 被引量:2 2017年 以鸡新城疫病毒上海株sh09作为抗原,与鸡新城疫卵黄抗体IgY按照一定的比例配置免疫复合物疫苗。用无特定病原鸡进行免疫分组试验,实验分为对照组、灭活苗组、免疫复合物疫苗组3组,每隔1周取鸡测定血凝抑制(Hemagglutination Inhibition,HI)抗体效价。攻毒实验在免疫实验的基础上增加1组常规弱毒苗组。结果表明,制备的复合物疫苗在鸡体内HI抗体效价上升较显著,其免疫效果比常规疫苗好,能很好地应对强毒株的攻击。 刘成倩 李红 易建中 孙凤萍 高骏 姚慧娟关键词:鸡新城疫病毒 免疫效果 猪圆环病毒2型Rep基因真核表达载体的构建和免疫原性分析 2016年 根据GenBank发表的猪圆环病毒2型(PCV2)基因序列设计并合成1对特异性引物,进行PCR扩增,从PCV2突变株中扩增出PCV2 Rep基因,对PCR扩增产物清洁后进行双酶切,连接到pEGFP-C1载体上,转化到大肠杆菌DHSα感受态细胞中,经PCR筛选和测序后鉴定出正确的重组基因,完成真核表达载体的构建。将重组质粒转染到PK15细胞中,收取病毒液抽提DNA,PCR检测到Rep基因,证明转染是成功的。进行间接免疫荧光试验,可以检测Rep基因在PK15细胞中的表达,试验结果很好的验证了Rep基因的免疫原性。这为进一步研究PCV2的生物学活性及PCV2新型疫苗奠定了坚实的基础。 王静 刘成倩 李红 易建中 于宗幸 陈磊 孙晓云关键词:猪圆环病毒2型 真核表达载体 间接免疫荧光 猪轮状病毒VP4、VP7基因PFastbac1重组载体的构建及转染 2013年 从患病小猪粪便中提取病毒RNA,用RT-PCR方法扩增出猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PRV)的核衣壳蛋白VP4、VP7基因,将目的基因片段克隆到昆虫表达载体PFastbacl;然后将重组载体转化入DH_(10)Bacl感受态细胞中转座重组后,纯化该重组杆状病毒并转染昆虫细胞sf9。结果表明:成功获得了含有目的基因的杆状病毒的阳性重组子,并将重组病毒成功转染sf9细胞。 肖长峰 卢永红 易建中关键词:猪轮状病毒 核衣壳蛋白 转染 猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗抗原N蛋白的制备与表达 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗抗原N蛋白的制备与表达。所述猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗抗原N蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No1所示;包含所述猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗抗原N蛋白的阳性克隆载体为PMD18-T... 易建中 刘成倩文献传递 禽沙门菌多重PCR检测方法的建立与应用 被引量:3 2019年 沙门菌是重要的人畜共患病原菌,血清型很多。不同种类、不同日龄的家禽均可感染,是严重危害养禽业的病原之一。本文通过血清学、分子生物学方法对上海部分鸡场的沙门菌进行了检测,与传统检测方法相比,缩短了检测时间,提高了检测的特异性和敏感性。实验结果发现禽伤寒/鸡白痢沙门菌、鸡肠炎沙门菌血清学为阳性的,经多重PCR鉴定,发现绝大部分不是禽源性沙门菌,由此可见,沙门菌多重PCR检测为临床诊断提供了一种快速、敏感和特异性高的诊断方法。 李红 刘成倩 孙凤萍 高骏 姚惠娟 易建中关键词:沙门菌 血清学 多重PCR