张强弩
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 供职机构：兰州大学基础医学院病理学研究所更多>>
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- N-乙酰半胱氨酸减轻香烟烟雾提取物所致的A549细胞损伤被引量：1
- 2014年
- 目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对香烟烟雾提取物(CSE)暴露后的A549细胞的影响。方法 MTT法测定不同处理后A549细胞的存活率;用PI单染和AnnexinV-FITC/PI双染检测细胞的周期变化和凋亡变化;用荧光探针H2DCFDA检测细胞内活性氧簇(ROS)变化;用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)的表达变化。结果 CSE致A549细胞存活的A值为0.55±0.04,显著低于对照组的0.78±0.03(P<0.05),NAC处理使A值显著上升至0.67±0.04(P<0.05),并消除了G1期阻滞,降低细胞凋亡率等。IGFBP-3的表达在CSE刺激后,有所升高,在接受NAC保护后,其表达水平有所降低(P<0.05)。结论 NAC可以抑制香烟烟雾提取物造成的A549细胞损伤,IGFBP-3可能在香烟烟雾提取导致细胞损伤的机制中发挥作用。
- 张强弩焦宗宪常嘉琛
- 关键词：IGFBP-3香烟烟雾提取物肺泡上皮细胞N-乙酰半胱氨酸
- 应用活体成像技术对三氧化二砷抗小鼠4T1乳腺癌作用的研究被引量：3
- 2013年
- 采用小动物活体光学成像技术研究三氧化二砷(As2O3)的抗小鼠乳腺癌作用,并比较小动物活体成像技术与常规技术的优劣性。以荧光素酶(luciferase,Luc)基因标记小鼠4T1乳腺癌(4T1-Luc)细胞,MTT比色法和生物发光法(BLM)检测细胞增殖活性,细胞形态学及AnnexinⅤ/PI双标记法观察细胞凋亡;4T1-Luc细胞接种小鼠乳腺脂肪垫制作原位乳腺癌模型,腹腔注射5、10mg/(kg.d)As2O3治疗20d,小动物活体成像系统动态观察肿瘤生长。肿瘤称重,HE和CD34免疫组化染色观测肿瘤细胞分裂、坏死和新生微血管。结果,BLM检测结果与MTT法高度相符,1、2、4、8、16μmol/L As2O3显著抑制4T1-Luc细胞增殖,并呈现典型的凋亡改变;As2O3在体内呈时间和剂量依赖性地抑制模型小鼠4T1-Luc乳腺癌的生长,活体成像法优于肿瘤重量法。肿瘤组织内核分裂细胞和微小血管减少,中心呈坏死改变。结果表明,As2O3体外诱导小鼠乳腺癌4T1细胞凋亡,通过减低肿瘤新生血管形成、促使其坏死在体内发挥抗乳腺癌作用;与传统技术相比,小动物活体成像技术具有非损伤、实时动态监察和高灵敏度的特点。
- 范临兰席晓霞魏虎来张强弩高飞云
- 关键词：三氧化二砷血管生成细胞凋亡
- 香烟烟雾引起的氧化应激在肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中的作用被引量：2
- 2011年
- 香烟烟雾中含有自由基等大量的强氧化剂,因而可以导致氧化应激。氧化应激可对肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)造成损伤,但是其对AECⅡ造成损伤的机制至今还未完全清楚,近期这个领域研究的热点集中在三个方面:氧化应激诱导的AECⅡ凋亡、氧化应激与炎性反应的相互作用对AECⅡ的损伤以及氧化应激对AECⅡ结构和功能的直接损伤。AECⅡ损伤与肺部损伤有密切关系,对其损伤机制的研究,有助于呼吸道疾病的诊断和治疗。
- 张强弩焦宗宪
- 关键词：氧化应激凋亡炎性反应
- 萝卜硫素和N-乙酰半胱氨酸对香烟烟雾提取物刺激后的肺泡上皮细胞的保护作用及其与IGFBP-3的关系
- 目的：观察萝卜硫素(Sulforaphane,SFN)和N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-cysteine,NAC)对香烟烟雾提取物(Cigarette smoke extract,CSE)所致的A549细胞损伤是否具...
- 张强弩
- 关键词：香烟烟雾提取物IGFBP-3N-乙酰半胱氨酸
- 文献传递
- 大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的原代分离被引量：4
- 2012年
- 目的建立大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar epithelial cells typeⅡ,AECⅡ)分离、纯化、原代培养及鉴定的方法。方法用4.2U/ml的弹性蛋白酶通过气管插管注入肺泡内,消化分离AECⅡ。把细胞悬液接种到包被有大鼠IgG的塑料平皿中纯化细胞。用电镜、碱性磷酸酶显色法、改良巴氏染色法、单宁酸染色法、免疫组化染色法鉴定AECⅡ。结果细胞纯度达到90%以上,倒置显微镜下可见细胞呈岛屿状生长。电镜下可见细胞内有大量板层小体,包膜上有绒毛结构。碱性磷酸酶染色法(BCIP/NBT)可见胞浆内有蓝色颗粒。改良巴氏染色法、单宁酸染色法可见胞浆内有黑色颗粒。抗大鼠肺泡表面活性蛋白A(surfactant protein A,SP-A)免疫组化染色呈阳性反应。结论弹性蛋白酶作用温和,不损伤胞膜,分离所得细胞活力好;IgG免疫粘附纯化法操作简单,纯化效率高。电镜、BCIP/NBT、巴氏染色、单宁酸染色及免疫组化染色等鉴定方法稳定可靠,特异性高。
- 焦宗宪程航远张强弩朱艳芳王晨昱王勇刘沨
- 关键词：肺泡上皮细胞纯化细胞鉴定
- 维甲酸拮抗丙烯醛损伤肺泡Ⅱ型上皮细胞的作用被引量：1
- 2012年
- 背景:肺泡Ⅱ型上皮细胞是肺泡上皮组织的干细胞,它的损伤和多种肺部疾病密切相关。有研究显示维甲酸不仅能促进发育期大鼠肺泡的形成,还能促进肺损伤后的修复,但也有研究表明维甲酸在肺气肿模型的治疗中无明显作用。目的:探索维甲酸能否拮抗丙烯醛对原代培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的损伤作用。方法:综合Dobbs等的细胞分离方法并加以改良,从普通雄性SD大鼠肺组织中成功分离出较高纯度的肺泡Ⅱ型上皮细胞,并行原代培养。应用MTT法检测丙烯醛对肺泡Ⅱ型上皮细胞活性的影响,流式细胞术检测在丙烯醛及维甲酸作用下肺泡Ⅱ型上皮细胞的细胞周期变化。结果与结论:MTT检测结果显示丙烯醛作用下大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞生长明显受抑,而且肺泡Ⅱ型上皮细胞活性与药物浓度成剂量效应关系。流式细胞仪检测结果显示丙烯醛作用下G1期细胞增加,维甲酸对丙烯醛的拮抗作用不明显。提示丙烯醛对原代培养的肺泡Ⅱ型上皮细胞具有明显的损伤作用,但维甲酸对丙烯醛的拮抗作用不明显,其作用机制还需进一步深入研究。
- 程航远张强弩朱艳芳王晨昱王勇刘沨焦宗宪
- 关键词：原代培养丙烯醛维甲酸肺损伤细胞活性
