崔贞福
- 作品数：79 被引量：405H指数：11
- 供职机构：第二军医大学东方肝胆外科医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市现代生物与新药产业发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肿瘤端粒酶靶向腺病毒载体的表达活性被引量：4
- 2004年
- 目的 构建针对端粒酶阳性肿瘤的特异性腺病毒载体 ,研究其介导目的基因在肿瘤细胞内的定向表达能力。方法 将端粒酶逆转录酶 (hTERT )启动子克隆入质粒 pDC3 12的多克隆位点构成外源基因表达盒 ,在基因表达盒上下游分别插入 1个绝缘子序列 ,构建针对端粒酶阳性肿瘤的特异性腺病毒载体pSG TPE ;采用Luciferase报告基因进行hTERT启动子的活性分析 ;以pSG TPE携带绿色荧光蛋白 (EGFP)报告基因 ,重组腺病毒AdTPE EGFP ,观察其介导EGFP在肿瘤细胞内的定向表达能力 ,并与CMV启动子控制的腺病毒AdCMV EGFP作对照。结果 hTERT启动子在正常细胞内几乎没有活性 ,而在肿瘤细胞内的活性与SV 40启动子相近。腺病毒AdTPE EGFP能介导EGFP在肿瘤细胞内定向而稳定表达 ,在正常细胞内不表达 ,而对照腺病毒AdCMV EGFP在肿瘤和正常细胞内均表达EGFP。结论 靶向端粒酶阳性肿瘤的腺病毒载体 pSG TPE ,不但提高了对基因表达调控的特异性 ,而且降低了对正常细胞毒性作用。绝缘子的应用隔断了外源基因表达盒和病毒基因表达调控序列之间的互相干扰 ,进一步提高目的基因的表达效率。该载体对肿瘤的靶向基因治疗具有重要的应用价值。
- 苏长青王星华崔贞福吴红平李林芳姜梨华钱炎珍吴孟超钱其军
- 关键词：基因治疗腺病毒端粒酶启动子
- 特异性增殖型腺病毒CNHK200-mIFN-γ表达mIFN-γ及体外肿瘤杀伤实验被引量：3
- 2004年
- 目的:构建增殖型腺病毒CNHK200-mIFN-γ和增殖缺陷型腺病毒AdEasy—mIFN-γ,比较两者在肿瘤细胞中表达mIFN-γ蛋白的能力以及CNHK200-mIFN-γ,ONYX-015及野生型腺病毒Ad5在正常及肿瘤细胞中的增殖力,进一步观察其抗瘤效果。方法:以病毒增殖试验检测病毒在细胞中的增殖能力;透射电镜观察CNHK200-mIFN-γ在Hep3B细胞中的增殖复制;检测病毒感染肿瘤细胞后mIFN-γ的表达;CPE实验观察增殖病毒对细胞的杀伤效应。结果:CNHK200-mIFN-γ和ONYX-015仅在肿瘤细胞中增殖,且前者增殖力较强。CNHK200-mIFN-γ在肿瘤细胞中表达mIFN-γ,且表达量与病毒增殖密切相关,而AdEasy—mIFN-γ在肿瘤细胞中的mIFN-γ表达几乎不能测到。ONYX-015与CNHK200-mIEN-γ对正常的细胞无杀伤性,但能有效地杀伤癌细胞。结论:外源基因mIFN-γ的插入没有改变增殖病毒在肿瘤细胞中选择性增殖的特性。增殖型腺病毒CNHK200-mIFN-γ具有良好的肿瘤选择性及增殖性,且可以有效表达mIFN-γ,并且有效杀伤癌细胞,显示其良好的临床应用前景。
- 陈洁钱其军达万明欧英贤薛惠斌崔贞福苏长青李林芳姜梨华吴红平
- 关键词：腺病毒干扰素
- 肝癌血清岩藻糖基化AFP含量与α-L-岩藻糖苷酶活性的相关分析被引量：1
- 1993年
- 采用改良的分光光度法及豌豆凝集素亲和免疫电泳同步测定90例肝细胞癌(HCC)血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)活性和岩藻糖基化甲胎蛋白(AFP)含量。相关分析表明,HCC血清AFU活性与岩藻糖基化AFP相对含量无关(r=0.099),与岩藻糖基化AFP绝对含量亦无关(r=0.23)。将90例HCC按岩藻糖基化AFP相对含量不同(以25％为界)分组,两组血清AFU活性分别为535±220 nmol·ml^(-1)·h^(-1)和550±180 nmol·ml^(-1)·h^(-1),相差不显著(P>0.05)。若以血清AFU活性高低(以550 nmol·ml^(-1)·h^(-1)为界)分组,两组血清岩藻糖基化AFP相对含量分别为40％±23％和45％±22％,差异亦不显著(P>0.05)。提示,肝脏病变时AFP糖链结构的变化不是血清AFU参与的结果,可能来自于糖链生物合成途径的改变。
- 殷正丰崔贞福虞紫茜屠振兴吴孟超
- 关键词：肝肿瘤甲胎蛋白岩藻糖苷酶
- 腺病毒B7-1治疗小鼠肝癌及其免疫机理的初步研究
- 1998年
- 为了探讨肿瘤原位转染共刺激分子Ｂ７－１对小鼠肝癌的治疗作用及其机理，本文在建立了小鼠肝癌模型的基础上，采用表达小鼠Ｂ７－１的重组腺病毒直接瘤体内注射，结果可显著抑制小鼠肝癌的生长，明显延长荷瘤小鼠的存活期。肝癌组织ＨＥ染色及免疫组织化学分析发现，经重组腺病毒ｍＢ７－１治疗的肿瘤内大片组织坏死出血，坏死组织与未坏死组织交界处有大量淋巴细胞浸润，浸润淋巴细胞表现为ＣＤ３＋，ＣＤ８＋，ＦａｓＬ＋和ｐｅｒｆｏｒｉｎ＋。ＲＴ－ＰＣＲ显示，ＦａｓＬ和穿孔素ｍＲＮＡ表达呈阳性。
- 黄洪莲王小宁车小燕钱其军崔贞福郭亚军吴孟超
- 关键词：肝肿瘤免疫机理腺病毒B7-1
- 分泌抗人原发性肝癌单克隆抗体杂交瘤的制备及专一性分析被引量：3
- 1996年
- 目的：研制抗人原发性肝癌（ＰＨＣ）特异性单抗（ＭｃＡｂ），为肝癌的导向诊断与治疗奠定基础。方法：用人ＰＨＣ细胞系ＨｅｐＧ２免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与同源骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合，经间接免疫荧光染色加流式细胞仪筛选及专一性鉴定，单抗经ＰｒｏｔｅｉｎＡ法纯化，用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度测定。结果：筛选出３株能分泌抗人ＰＨＣ细胞膜单抗的杂交瘤，这些杂交瘤经３次亚克隆后仍能稳定地分泌单克隆抗体。专一性分析显示３株杂交瘤分泌的单抗均可特异性地识别人ＰＨＣ细胞。纯化的单抗属小鼠ＩｇＧｌ亚类。结论：ＭｃＡｂ与肝癌细胞具有较高的亲和力，具有潜在的导向显像和导向治疗的应用价值。
- 施乐华谢天培沈锋车小燕崔贞福吴孟超郭亚军
- 关键词：肝肿瘤单克隆抗体杂交瘤
- 岩藻糖基化甲胎蛋白的变化对肝癌外科疗效的评价被引量：6
- 1994年
- 对３４例肝癌患者术后初期血清岩藻糖基化甲胎蛋白（Ｆ－ＡＦＰ）岩藻糖指数（ＦＩ）的变化与肝癌外科短期疗效的关系进行了研究。３４例中，２３例术后ＡＦＰ转阴，Ｆ－ＡＦＰ随之降至０％，半年内无１例复发。４例余肝存在肝炎或活动性肝硬变者，ＡＦＰ未能转阴，但ＦＩ降至１０％以下，半年内亦无１例复发。７例术后血清ＡＦＰ下降，ＦＩ相对恒定在术前水平，其中５例半年内复发。因此，观察术后血清ＦＡＦＰ的消长情况，似能更准确地估价肝癌外科的疗效。
- 殷正丰吴孟超虞紫茜胡崔贞福陈右江
- 关键词：甲胎蛋白类岩藻糖肝肿瘤
- 腺病毒介导的全抗体基因治疗卵巢癌的实验研究被引量：19
- 2004年
- 目的 探讨应用基因治疗方法表达完全抗体的可行性及其对肿瘤的治疗作用。方法构建携带曲妥珠单抗 [Trastuzumab ,商品名 :赫赛汀 (Herceptin) ]全抗体基因的腺病毒载体 ,利用重组技术获得增殖缺陷型腺病毒Ad SG Her ,用Ad SG Her转染人正常肝细胞株L 0 2 ,判断体外肝细胞是否可以表达Herceptin抗体 ;将卵巢癌SK OV 3细胞接种于裸鼠皮下 ,3d后把 4 0只成瘤裸鼠随机分为3个治疗组和 1个对照组 ,每组各 10只。治疗组裸鼠尾静脉分别注射不同滴度的Ad SG Her :治疗A组注射 2× 10 9空斑形成单位 ( pfu) /只 ,B组注射 1× 10 9pfu/只 ,C组注射 5× 10 8pfu/只。用酶联免疫吸附试验 (ELISA)分别在体外转染Ad SG Her后的第 3天和第 7天 ,以及裸鼠接受Ad SG Her治疗后的第 3、7、10、14、2 1、2 8、35天检测Herceptin的表达量 ;通过间接免疫荧光法 (IFA)和Western印迹法分别检测血清中的抗体与Her2过表达卵巢癌细胞株SK OV 3结合的特异性以及所表达全长抗体的完整性 ;同时观察不同滴度的Ad SG Her对荷SK OV 3实体瘤裸鼠的治疗作用。结果 构建的带有全长Herceptin基因的重组腺病毒Ad SG Her ,在体外及体内均能高效表达人源化抗体Herceptin。Western印迹显示
- 郭明高姜明红杨琴李月敏崔贞福李林芳吴孟超钱其军
- 关键词：介导作用基因治疗卵巢癌HERCEPTIN赫赛汀
- 银染的端粒重复序列扩增法检测人细胞端粒酶活性的研究被引量：4
- 1998年
- 目的：探讨应用简便、快速及无害化的非核素银染端粒重复序列扩增法（ＴＲＡＰ）检测人细胞端粒酶活性。方法：与核素ＴＲＡＰ相比较，采用非核素银染ＴＲＡＰ检测了２９３细胞，并检测了经ＲＮａｓｅ和加热处理的阴性对照标本和ＱＧＹ７７０１、ＳＭＭＣ－７７２１２株人肝癌细胞。结果：１０个以上的２９３细胞均为阳性，而ＲＮａｓｅ和加热处理的标本均阴性；２株人肝癌细胞均阳性；非核素银染ＴＲＡＰ比核素ＴＲＡＰ快１０ｈ左右。结论：非核素银染的ＴＲＡＰ是特异、敏感及快速的端粒酶活性检测方法，证实２株人肝癌细胞株均有端粒酶活性表达。
- 卫立辛吴孟超陈汉沈锋施乐华钱其军贺平崔贞福郭亚军
- 关键词：端粒酶活性肝肿瘤
- 单抗TIGTC-Ⅲ片段F(ab′)_2的制备及其放射免疫显像研究被引量：3
- 1999年
- 目的：将抗人原发性肝癌（ＰＬＣ）单抗ＴＩＧＴＣⅢ，用胃蛋白酶法消化成Ｆ（ａｂ′）２片段，标记１３１Ｉ后进行裸鼠人肝癌移植瘤的体内定位研究。方法：采用胃蛋白酶消化法，进行裸鼠体内核素显像。结果：消化产率为３１７％±２４％，经细胞结合实验证明Ｆ（ａｂ′）２具有良好的免疫活性，抗体片段进入裸鼠体内后，与完整抗体比，进入肿瘤的速度快，生物学分布特异性高，定位指数上升，血清本底下降迅速，生物半衰期明显缩短。结论：Ｆ（ａｂ′）２与全抗体比较可使成像时间提前。
- 施乐华杨家和崔贞福吴孟超潘文舟孔令山王明库
- 关键词：放射免疫显像
- 靶向端粒酶阳性肿瘤的特异性腺病毒载体的构建
- 人体各种类型的恶性肿瘤几乎都可以检测到高水平的端粒酶活性,因此端粒酶已成为肿瘤治疗的新靶点。本文通过构建hTERT启动子控制的特异性针对端粒酶阳性肿瘤的增殖缺陷型腺病毒载体,比较分析了该载体携带绿色荧光蛋白报告基因(EG...
- 苏长青王星华崔贞福吴红平李林芳姜梨华钱炎珍吴孟超钱其军
- 文献传递
