屈平平
- 作品数:8 被引量:14H指数:2
- 供职机构:青岛农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学交通运输工程建筑科学更多>>
- 小鼠附植前胚胎超薄切片的琼脂糖预包埋制备方法被引量:4
- 2008年
- 将小鼠附植前胚胎分别经戊二醛-锇酸固定后,采取琼脂糖预包埋法使胚胎凝聚成团,然后对含胚胎的琼脂糖块进行脱水、渗透和包埋。结果显示,Epon812包埋块中的胚胎排列紧密,半薄切片胚胎的整体形态完整,胚胎超微结构保存良好。说明琼脂糖预包埋法是制备小鼠附植前胚胎超薄切片的有效方法。
- 屈平平田文儒高善颂姜忠玲李涛侯春霞
- 关键词:附植前胚胎超薄切片
- HSP72在热应激小鼠囊胚中的表达及其作用被引量:2
- 2007年
- 将体外培养的小鼠囊胚分别施以38℃温和热应激和40℃强烈热应激处理1、2和3 h,然后在37℃正常培养条件下分别恢复3、2和1 h,用体视显微镜观察囊胚孵出率以及经38℃和40℃诱导热应激后囊胚的孵出率,用Western-blot技术检测小鼠囊胚HSP72的表达。结果,38℃热应激处理2 h时,HSP72表达量达到最高水平,与对照组差异显著;40℃热应激处理3 h时,HSP72表达量达到最高水平,与对照组差异不显著;38℃热诱导2 h囊胚孵出率最高,与40℃强烈热应激处理2 h组差异显著。结果表明,热诱导组囊胚孵出率与38℃热应激组囊胚HSP72的表达量呈正相关。
- 任登良田文儒姜同泉王明志田中杰屈平平
- 关键词:小鼠囊胚热应激HSP72
- 热应激对小鼠囊胚中HSP72表达及对孵出率影响的研究被引量:2
- 2007年
- 将体外培养的小鼠囊胚分别施以40℃和38℃热休克处理1h、2h和3h,然后在37℃条件下分别恢复3h、2h和1h后,利用Westernblot技术检测小鼠囊胚HSP72的表达,同时观察囊胚的热敏性,以明确热应激对小鼠囊胚中HSP72表达及对孵出率影响。结果显示,38℃及40℃热应激组均有HSP72的表达,38℃组2h达到最高水平,与对照组相比差异显著(P<0.05),然后表达量随热应激时间延长而降低;40℃组3h达到最高水平,与对照组相比差异不显著(P>0.05)。38℃及40℃热应激组囊胚孵出率均随着热应激时间的延长而降低。结果表明,轻度、短时间热应激既可使小鼠囊胚HSP72表达;热应激能够降低小鼠囊胚的孵出率。
- 任登良田文儒姜同泉王明志田中杰屈平平
- 关键词:囊胚热应激HSP72WESTERNBLOT
- 热应激对小鼠胚胎细胞HSP70表达和超微结构的影响被引量:4
- 2011年
- 本研究旨在确定体外培养的小鼠胚胎细胞合成HSP70的时期,研究热应激对该阶段胚胎细胞超微结构的影响。将合子和体外发育至2-细胞、4-细胞、8~16-细胞及囊胚阶段的胚胎分别进行37、39和41℃的热应激处理,用免疫荧光细胞化学法检测胚胎细胞中HSP70的诱导表达;将体外培养至早期囊胚的小鼠胚胎分别施以39℃2h和41℃2h处理,分别在热应激后0和2h时收集胚胎,制作超薄切片,用电子显微镜观察胚胎细胞的超微结构变化。在各细胞期胚胎中,37℃组胚胎HSP70表达阴性(-);39℃组胚胎,从8~16-细胞开始呈现弱表达(+),囊胚呈阳性表达(++);41℃组的胚胎从4-细胞开始呈现弱阳性表达(+),8~16-细胞胚胎和囊胚呈阳性表达(++)。39和41℃热应激处理的小鼠早期囊胚超微结构和对照组均发生明显的变化,但经37℃恢复培养2h后,39℃组胚胎的各细胞器超微结构恢复正常,而41℃组胚胎未能恢复。结果表明,小鼠胚胎从4-细胞期有HSP70的诱导合成,在囊胚期诱导合成最多;热应激使胚胎亚细胞结构出现退行性变化,轻度退行性变化是可逆的。
- 张霞屈平平丛霞姜忠玲崔凯田文儒
- 关键词:小鼠胚胎热应激HSP70表达超微结构
- 热应激对小鼠囊胚HSP72表达的影响被引量:1
- 2008年
- 将体外培养的小鼠囊胚分别施以40℃和38℃热休克处理1 h,2 h和3 h,然后在37℃条件下分别恢复3 h,2 h和1 h后,利用Western blot技术检测小鼠囊胚HSP72的表达,以明确热应激对小鼠囊胚HSP72表达的影响。结果显示,38℃和40℃热应激组均有HSP72的表达,38℃组2 h达到最高水平,与对照组相比差异显著(P<0.05),然后表达量随热应激时间延长而降低;40℃组3 h达到最高水平,与对照组相比差异不显著(P>0.05)。结果表明,轻度、短时间热应激既可使小鼠囊胚HSP72表达。
- 任登良田文儒姜同泉王明志田中杰屈平平
- 关键词:小鼠囊胚热应激HSP72WESTERNBLOT
- 小鼠胚胎诱导型Hsp70基因的RNA干扰有效序列筛选被引量:1
- 2008年
- 【目的】应用RNA干扰技术沉默小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblast,MEF)中诱导型热休克蛋白70(Hsp72)基因的表达,从而筛选出对Hsp72基因具有确实干扰作用的siRNA。【方法】设计并合成4对特异性针对Hsp72基因的siRNA,借助LipofectamineTM2000瞬时转染MEF,41℃热应激处理后,采用RT-PCR和Western blot检测Hsp70 mRNA和Hsp70蛋白表达量。【结果】在热应激组中,siRNA1、siRNA2两组及阳性、阴性和空白3个对照组的Hsp70 mRNA和Hsp70蛋白表达量均极显著高于常温对照组(P<0.01),siRNA3和siRNA4两组的Hsp70 mRNA的表达量极显著低于常温对照组(P<0.01);siRNA3组Hsp70蛋白表达量极显著低于常温对照组(P<0.01),而siRNA4组与常温对照组差异不显著(P>0.05)。与空白对照相比,4对siRNA中siRNA3和siRNA4对MEF中Hsp72 mRNA有极显著(P<0.01)的抑制作用,其对Hsp72 mRNA的抑制率分别为86.2%和75.4%(P<0.01),对Hsp72蛋白表达的抑制率分别为77.3%和57.0%(P<0.01)。【结论】体外合成的四对特异性针对Hsp72基因的siRNA中,靶位点在Hsp72 mRNA二级结构表面位置的siRNA3和siRNA4对Hsp72基因具有显著的抑制作用,靶位点在Hsp72 mRNA二级结构复杂处的siRNA1和siRNA2对Hsp72基因的抑制作用不明显。
- 王明志田文儒姜同泉任登良田中杰屈平平曹荣峰
- 关键词:RNA干扰小鼠胚胎成纤维细胞小干扰RNA
- 重组猪γ-干扰素对免疫猪SRBC和BA抗体产生影响的研究
- 2008年
- 李涛朱连勤马凤龙乔彦良朱风华屈平平董菊红
- 关键词:Γ-干扰素抗体产生免疫猪主要组织相容性复合体抗原呈递细胞
- 奶牛诱导型热休克蛋白70基因片段的克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 2008年
- 田中杰田文儒姜同泉任登良王明志屈平平
- 关键词:诱导型大肠杆菌基因片段克隆奶牛细胞周期调控