王明志
- 作品数：9 被引量：26H指数：2
- 供职机构：青岛农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学交通运输工程建筑科学更多>>
- 热应激对小鼠囊胚HSP72表达的影响被引量：1
- 2008年
- 将体外培养的小鼠囊胚分别施以40℃和38℃热休克处理1 h,2 h和3 h,然后在37℃条件下分别恢复3 h,2 h和1 h后,利用Western blot技术检测小鼠囊胚HSP72的表达,以明确热应激对小鼠囊胚HSP72表达的影响。结果显示,38℃和40℃热应激组均有HSP72的表达,38℃组2 h达到最高水平,与对照组相比差异显著(P<0.05),然后表达量随热应激时间延长而降低;40℃组3 h达到最高水平,与对照组相比差异不显著(P>0.05)。结果表明,轻度、短时间热应激既可使小鼠囊胚HSP72表达。
- 任登良田文儒姜同泉王明志田中杰屈平平
- 关键词：小鼠囊胚热应激HSP72WESTERNBLOT
- 热应激对小鼠囊胚中HSP72表达及对孵出率影响的研究被引量：2
- 2007年
- 将体外培养的小鼠囊胚分别施以40℃和38℃热休克处理1h、2h和3h,然后在37℃条件下分别恢复3h、2h和1h后,利用Westernblot技术检测小鼠囊胚HSP72的表达,同时观察囊胚的热敏性,以明确热应激对小鼠囊胚中HSP72表达及对孵出率影响。结果显示,38℃及40℃热应激组均有HSP72的表达,38℃组2h达到最高水平,与对照组相比差异显著(P<0.05),然后表达量随热应激时间延长而降低;40℃组3h达到最高水平,与对照组相比差异不显著(P>0.05)。38℃及40℃热应激组囊胚孵出率均随着热应激时间的延长而降低。结果表明,轻度、短时间热应激既可使小鼠囊胚HSP72表达;热应激能够降低小鼠囊胚的孵出率。
- 任登良田文儒姜同泉王明志田中杰屈平平
- 关键词：囊胚热应激HSP72WESTERNBLOT
- 重组水貂生长激素pVAX1-mGH及其在小鼠肌肉组织中表达的研究被引量：1
- 2008年
- 将化学合成的水貂生长激素基因mGH插入载体pVAX1,将经过PCR、酶切鉴定、测序正确的pVAX1-mGH重组质粒,注射到小鼠后肢的股四头肌,空白对照组注射PBS,于注射后5、10、20、40、60d,眼球采血,取注射部位的肌肉组织进行免疫组化研究,结果证明在胞浆中有特异性蛋白表达。
- 马凤龙龙英娜乔彦良刘焕奇王明志刘焕珍
- 关键词：小鼠股四头肌免疫组化
- 两种激素组合对小鼠超排的影响及其效果的比较被引量：1
- 2007年
- 为比较PMSG+hCG和FSH+LH两种激素组合对小鼠超排效果的差异,将8组96只小鼠分别采用两种组合进行超排处理。冲胚结果:2.5IU PMSG+2.5IU hCG、5IU PMSG+5 IU hCG、7.5IU PMSG+7.5IU hCG和10IUPMSG+10IU hCG组平均每只小鼠获可用胚分别为9.17枚、32.67枚、16.00枚和11.67枚,且5IU PMSG+5IUhCG组超排效果极显著高于同组合中其他3组(P<0.01);3IU FSH+3IU LH、6IU FSH+6IU LH、9IU FSH+9IULH、12IU FSH+12IU LH组平均每只小鼠获可用胚分别为5.67枚、13.00枚、29.17枚、11.50枚,且9IU FSH+9IULH组超排效果极显著高于同组合中其他3组(P<0.01)。T检验表明,在平均每只小鼠获可用胚胎数量上,两种激素组合的最佳效果组间无显著差异(P>0.05)。
- 高善颂李树明田中杰王明志侯春霞
- 关键词：小鼠超排激素组合
- HSP72在热应激小鼠囊胚中的表达及其作用被引量：2
- 2007年
- 将体外培养的小鼠囊胚分别施以38℃温和热应激和40℃强烈热应激处理1、2和3 h,然后在37℃正常培养条件下分别恢复3、2和1 h,用体视显微镜观察囊胚孵出率以及经38℃和40℃诱导热应激后囊胚的孵出率,用Western-blot技术检测小鼠囊胚HSP72的表达。结果,38℃热应激处理2 h时,HSP72表达量达到最高水平,与对照组差异显著;40℃热应激处理3 h时,HSP72表达量达到最高水平,与对照组差异不显著;38℃热诱导2 h囊胚孵出率最高,与40℃强烈热应激处理2 h组差异显著。结果表明,热诱导组囊胚孵出率与38℃热应激组囊胚HSP72的表达量呈正相关。
- 任登良田文儒姜同泉王明志田中杰屈平平
- 关键词：小鼠囊胚热应激HSP72
- 重组水貂生长激素真核表达载体的构建及在巴斯德毕赤酵母中的表达被引量：2
- 2008年
- 【目的】构建水貂生长激素(mGH)基因真核表达载体,并在巴斯德毕赤酵母GS115中进行表达,为大量获得水貂生长激素奠定基础。【方法】将体外合成的水貂生长激素基因插入分泌型表达载体pPIC9K。将重组的pPIC9K-mGH用SacI酶切后,LiC1法转化巴斯德毕赤酵母菌株GS115,经G418筛选后进行甲醇诱导表达,并以SDS-PAGE和Western blot检测酵母上清中水貂生长激素的表达。【结果】酵母上清中可见与目的蛋白相对分子量(31kd)相符的条带,该条带可被水貂生长激素多克隆抗体特异识别。【结论】正确构建了水貂生长激素真核表达载体,该蛋白能在巴斯德毕赤酵母中成功表达。
- 龙英娜马凤龙乔彦良刘焕奇王明志
- 关键词：SDS-PAGEWESTERNBLOT
- 小鼠胚胎诱导型Hsp70基因的RNA干扰有效序列筛选被引量：1
- 2008年
- 【目的】应用RNA干扰技术沉默小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblast,MEF)中诱导型热休克蛋白70(Hsp72)基因的表达,从而筛选出对Hsp72基因具有确实干扰作用的siRNA。【方法】设计并合成4对特异性针对Hsp72基因的siRNA,借助LipofectamineTM2000瞬时转染MEF,41℃热应激处理后,采用RT-PCR和Western blot检测Hsp70 mRNA和Hsp70蛋白表达量。【结果】在热应激组中,siRNA1、siRNA2两组及阳性、阴性和空白3个对照组的Hsp70 mRNA和Hsp70蛋白表达量均极显著高于常温对照组(P<0.01),siRNA3和siRNA4两组的Hsp70 mRNA的表达量极显著低于常温对照组(P<0.01);siRNA3组Hsp70蛋白表达量极显著低于常温对照组(P<0.01),而siRNA4组与常温对照组差异不显著(P>0.05)。与空白对照相比,4对siRNA中siRNA3和siRNA4对MEF中Hsp72 mRNA有极显著(P<0.01)的抑制作用,其对Hsp72 mRNA的抑制率分别为86.2%和75.4%(P<0.01),对Hsp72蛋白表达的抑制率分别为77.3%和57.0%(P<0.01)。【结论】体外合成的四对特异性针对Hsp72基因的siRNA中,靶位点在Hsp72 mRNA二级结构表面位置的siRNA3和siRNA4对Hsp72基因具有显著的抑制作用,靶位点在Hsp72 mRNA二级结构复杂处的siRNA1和siRNA2对Hsp72基因的抑制作用不明显。
- 王明志田文儒姜同泉任登良田中杰屈平平曹荣峰
- 关键词：RNA干扰小鼠胚胎成纤维细胞小干扰RNA
- 奶牛诱导型热休克蛋白70基因片段的克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 2008年
- 田中杰田文儒姜同泉任登良王明志屈平平
- 关键词：诱导型大肠杆菌基因片段克隆奶牛细胞周期调控
- 重组包涵体的纯化与复性被引量：17
- 2008年
- 龙英娜刘焕奇王明志
- 关键词：包涵体大肠杆菌表达系统复性纯化外源蛋白氨基酸序列
