吴银生
- 作品数：41 被引量：168H指数：8
- 供职机构：福建中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陈可冀中西医结合发展基金福建省科技计划重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 健骨颗粒含药血清对成骨样细胞增殖及PCNA、Cyclin D1 mRNA表达的影响
- 目的:观察健骨颗粒含药血清对成骨样细胞增殖及PCNA、Cyclin D1 mRNA表达的影响。方法:制备健骨颗粒含药血清和生理盐水血清,分别干预体外培养的成骨样细胞BOS17/2.8,MTT法检测细胞增殖,流氏细胞术检测...
- 吴银生林海鸣林煜黄云梅黄美雅林燕萍
- 关键词：健骨颗粒成骨样细胞细胞增殖PCNA
- 文献传递
- 自然衰老大鼠骨组织中TERT变化与骨衰老相关性的研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨在衰老过程中骨组织的端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)及其相关因子随增龄的变化情况。方法 6月龄、10月龄、13月龄、18月龄SD大鼠各20只(雌雄各半),取左侧完整股骨按组别、性别排列整齐,Discovery Wi双能X线骨密度仪测定股骨BMD,采用东芝800MA平板DR摄片机进行X线摄片。取大鼠右侧股骨近端骨组织行HE染色及图像分析。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中的骨钙素(osteocalcin,BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(tartrateresistant acid phosphatse 5b TRACP5b)、雌二醇(estradiol,E2)、睾酮(testosterone,T)含量。采用实时荧光定量SYBR GREEN法检测第1腰椎中TERT、雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)、mRNA表达。采用Western Blot检测第2腰椎TERT、ERα蛋白的表达。结果 ELISA法检测结果显示大鼠血清中BGP、E2、T水平均随着月龄增大逐渐降低,TRACP5b水平均随着月龄增大逐渐升高(P<0.05);骨组织中ERα、TERT的mRNA与蛋白表达均随月龄的增长而降低,各组间比较有显著性差异(P<0.05)。骨密度检测结果显示:雌性大鼠股骨BMD随着月龄增大呈下降态势,且除6月龄外其他月龄雌性均低于同期雄性组(P<0.05)。雄性BMD均值随着月龄增大呈下降态势,但6月龄与10月龄相比、13月龄与18月龄相比无统计学意义(P>0.05)。HE染色结果显示6月龄组股骨头骨小梁宽厚且量多稠密,分布均匀,排列规则,相互之间连成网状,未见有骨小梁中断;10月龄之后,骨小梁相对细小,小梁间距较宽,但排列整齐,且雌性较雄性更为明显,13月龄及18月龄组随着月龄增大骨小梁更加纤细,分布稀疏散乱,骨小梁中断多见,小梁间距增大,甚至出现典型骨质疏松松质骨的病理形态改变,且雌性较雄性更为明显。结论大鼠在增龄过程中,体内性激素水平下降的同时,骨组织内TERT转录水平降低,端粒酶活性下降,使骨组织中骨形成功能衰退,骨形成低于
- 林煜张怡元黄云梅吴银生肖莉莉林燕萍
- 关键词：端粒酶逆转录酶衰老
- 中药含药血清对体外成骨细胞增殖和分化影响的实验研究进展被引量：1
- 2011年
- 近年来不少学者从细胞分子生物学角度开展了中医药对成骨细胞(OB)影响的实验研究,为中医药防治骨质疏松提供了分子生物学理论依据,其中运用体外成骨细胞培养和中药血清干预实验,研究骨质疏松的中药防治是常用的方法之一,也是中药防治骨质疏松症研究热点之一,本文主要回顾了含药血清对成骨细胞的增殖与分化方面的相关文献,这些研究对中药防治骨质疏松症奠定了基础。
- 林海鸣吴银生林燕
- 关键词：中药含药血清成骨细胞增殖分化
- 人参皂甙Rg对Ti微粒成骨细胞共培养影响的实验研究
- 2014年
- 目的：探讨人参皂甙Rgl对体外与Ti微粒共培养的成骨细胞的影响及可能的干预作用。方法：体外培养新生大鼠成骨细胞，分别加入常规培养基、含胎牛血清的Ti微粒、Ti微粒＋不同剂量人参皂甙Rgl的混合液培养。酶联免疫吸附法检测成骨细胞PGE-2、TNF-α、IL-1、IL-lra、IL-6的浓度；实时荧光定量PCR法检测COX-2、TNF-α mRNA表达；WESTRENBLOT法检测COX-2蛋白表达。结果：与Ti微粒共培养的成骨细胞给予人参皂甙Rgl干预后，细胞培养液中的PGE-2、TNF-α、IL-1、IL-6含量均明显低于单纯Ti微粒组，但高于正常对照组，成骨细胞的COX-2、TNF-α mRNA表达以及COX-2蛋白表达量也呈现同样的变化趋势。结论：人参皂甙Rgl能降低Ti微粒诱导的成骨细胞炎性细胞因子含量，对假体松动具有一定防治作用。
- 林煜张怡元冯尔宥吴银生林燕萍
- 关键词：成骨细胞人参皂甙假体松动
- 健骨颗粒含药血清对成骨样细胞OPG、RANKL mRNA表达的影响被引量：7
- 2012年
- 目的观察健骨颗粒含药血清对OPG、RANKL mRNA表达的影响。方法制备健骨颗粒含药血清和生理盐水血清,分别干预体外培养的成骨样细胞ROS17/2.8,干预48 h后,用MTT法检测细胞增殖,荧光定量PCR检测OPG、RANKL mRNA表达。结果中药血清组对OPG mRNA表达较生理盐水血清组上升,对RANKL mRNA表达较生理盐水血清组降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论健骨颗粒含药血清能促进成骨样细胞的OPG mRNA表达并抑制其RANKL mRNA表达。
- 林海鸣林燕萍吴银生
- 关键词：健骨颗粒成骨样细胞OPGRANKL
- 伸肘外翻位固定治疗儿童肱骨髁上伸直型骨折的临床研究被引量：6
- 2008年
- 目的评价伸肘外翻位石膏固定治疗肱骨髁上伸直型骨折,预防肘内翻的临床疗效。方法收集2002～2005年漳州市中医院门诊及住院患者60例,年龄14岁以下,经临床及X线检查明确诊断为肱骨髁上伸直型骨折者,按就诊顺序及治疗方法不同,分为伸肘外翻位石膏固定组(简称治疗组)、屈肘位小夹板固定组(简称对照组),每组各30例,对各组病例肘内翻发生率、关节功能、B角及C角等方面进行比较,以评价伸肘外翻位石膏固定方法治疗肱骨髁上伸直型骨折,预防肘内翻的临床疗效。结果经过6～51个月随访,治疗组肘内翻发生率13.3%,对照组36.7%,经t检验,治疗组与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);治疗组、对照组在随访时B角、C角差异有统计学意义(P<0.05);而两组对骨折愈合后远期肘关节功能的影响差异无统计学意义(P>0.05)。结论伸肘外翻位石膏固定治疗肱骨髁上伸直型骨折,能有效地预防肘内翻畸形的发生,降低肘内翻发生率。
- 吴银生林乔龄庄志强
- 关键词：肱骨髁上骨折儿童
- 健骨颗粒含药血清培养成骨细胞整合素/黏着斑激酶信号通路相关因子的表达被引量：9
- 2010年
- 背景:目前有关成骨细胞整合素的功能状态及整合素信号转导调控的研究较少。健骨颗粒对成骨细胞整合素表达水平及信号转导通路调控的作用未被阐明。目的:观察健骨颗粒含药血清对成骨细胞黏附的影响,揭示健骨颗粒对成骨细胞整合素表达水平及信号转导通路的调控作用。方法:健康雄性3月龄SD大鼠用于制备健骨颗粒含药血清,选取最佳剂量的含药血清干预第3代大鼠成骨细胞,ELISA法检测培养液中纤连蛋白、Ⅰ型胶原、玻连蛋白的水平,Western blot法检测成骨细胞黏着斑激酶的磷酸化情况,实时荧光定量PCR法检测成骨细胞纤连蛋白、Ⅰ型胶原、玻连蛋白、黏着斑激酶mRNA的表达。结果与结论:浓度为20%的健骨颗粒含药血清能明显增强体外培养成骨细胞的增殖活力。随着含药血清干预时间的延长,成骨细胞表达及分泌的纤连蛋白、Ⅰ型胶原、玻连蛋白、黏着斑激酶mRNA及蛋白水平逐渐上升,黏着斑激酶的磷酸化水平也逐渐增高(P<0.05);均明显高于同期的生理盐水血清干预水平(P<0.05或P<0.01)。说明健骨颗粒能作用于成骨细胞整合素激活的粘着斑激酶转导通路各相关因子,使成骨细胞进入"分泌增加→黏附增加→功能增强、分裂增殖→分泌增加"的良性循环,对成骨细胞的成骨效应起正性调节作用。
- 林煜卢天祥吴银生黄云梅林燕萍
- 关键词：健骨颗粒成骨细胞整合素粘着斑激酶
- 人参皂甙Rg1与钛微粒对大鼠颅骨成骨细胞的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨人参皂甙Rg1与钛微粒对大鼠颅骨成骨细胞的影响,为人工关节假体松动的防治提供新思路。方法:收集、纯化新生SD大鼠颅骨成骨细胞,筛选钛微粒,配制钛微粒浸提液,进行内毒素检测后,将培养的第3代成骨细胞以1×105个.mL-1的密度传代接种于5组培养液中,即正常组(含10%胎牛血清的DMEM培养基)、钛微粒组(体积比为0.1%的钛微粒混悬液+含10%胎牛血清的DMEM培养基)、钛+高Rg1组(体积比为0.1%的钛微粒混悬液+终浓度为100μg.m-1的人参皂苷Rg1+含10%胎牛血清的DMEM培养基)、钛+中Rg1组(体积比为0.1%的钛微粒混悬液+终浓度为50μg.m-1的人参皂苷Rg1+含10%胎牛血清的DMEM培养基)、钛+低Rg1组(体积比为0.1%的钛微粒混悬液+终浓度为25μg.m-1的人参皂苷Rg1+含10%胎牛血清的DMEM培养基)。连续培养24 h后,观察成骨细胞形态;采用酶联免疫吸附法检测细胞培养液中前列腺素E2、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素1及白细胞介素1受体拮抗剂的浓度;采用实时荧光定量法检测成骨细胞中环氧化酶2mRNA、肿瘤坏死因子αmRNA的表达;采用Western Blotting法检测成骨细胞中环氧化酶2蛋白的表达。结果:5组成骨细胞培养液前列腺素E2光密度值的差异有统计学意义(F=244.895,P=0.000);钛微粒组、钛+高Rg1组、钛+中Rg1组均高于正常组[(53.362±0.307),(41.048±0.431),(38.998±0.234),(31.687±0.466),P=0.000,P=0.000,P=0.000];钛+高Rg1组、钛+中Rg1组、钛+低Rg1组(32.501±0.124)均低于钛微粒组(P=0.000,P=0.000,P=0.000);钛+低Rg1组低于钛+高Rg1组、钛+中Rg1组(P=0.000,P=0.000);钛+高Rg1组高于钛+中Rg1组(P=0.000);正常组与钛+低Rg1组比较,差异无统计学意义(P=0.168)。5组成骨细胞培养液肿瘤坏死因子α光密度值的差异有统计学意义(F=72.340,P=0.000);钛微粒组、钛+高Rg1组、钛+中Rg1组、钛+低Rg1组均高于正常组[(50.121±0.532),(49.675±0.336),(46.431±0.245),(42.521±0.5
- 林煜张怡元冯尔宥吴银生林燕萍
- 关键词：成骨细胞细胞培养技术人参皂甙细胞因子类环氧化酶2
- 鹿衔草不同极性部位对成骨细胞增殖的影响被引量：10
- 2010年
- 目的:筛选鹿衔草促进成骨细胞增殖的有效部位。方法:用鹿衔草不同极性部位干预人成骨肉瘤MG63细胞,采用MTT法检测筛选鹿衔草石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位等4种不同极性部位中能促进MG63细胞增殖的有效部位,在此基础上采用流式细胞术检测有效部位干预对MG63细胞周期的影响。结果:与空白对照组相比,鹿衔草氯仿部位和正丁醇部位能明显促进MG63细胞增殖(P<0.05或P<0.01),而石油醚部位、乙酸乙酯部位无明显促进MG63细胞增殖的作用(P>0.05);鹿衔草氯仿部位和正丁醇部位明显降低MG63细胞G0/G1期细胞分数(P<0.01),提高增殖指数(P<0.01)。结论:鹿衔草氯仿部位和正丁醇部位能推进体外培养成骨细胞细胞周期,从而促进成骨细胞增殖。
- 吴银生黄美雅陈旭征何嘉承林煜林燕萍
- 关键词：MG63细胞细胞增殖细胞周期鹿衔草活性部位
- 健骨颗粒对体外破骨细胞整合素α_V及β_3 mRNA表达的影响被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨补肾健脾中药健骨颗粒对体外破骨细胞整合素(Itg)αV、β3mRNA表达的影响。方法:采用破骨前体细胞系诱导培养法,通过M-CSF和RANKL诱导剂诱导RAW264.7细胞,分化为成熟破骨细胞。分别用健骨颗粒含药血清和生理盐水血清干预,运用实时荧光定量PCR法检测ItgαV、β3mRNA表达,并取骨片行甲苯胺蓝染色,骨陷窝和骨吸收面积计算分析。结果:经M-CSF和RANKL诱导后,RAW264.7细胞的形态特征、TRAP染色均符合成熟破骨细胞特异性表现;含药血清组破骨细胞ItgαV、β3mRNA表达水平明显低于生理盐水血清组(P<0.05),同时骨磨片的骨吸收陷窝数和面积亦呈同样变化趋势。结论:RAW264.7细胞经诱导分化后可以获取成熟破骨细胞;健骨颗粒能有效抑制破骨细胞Itgαv、β3 mRNA表达,影响破骨细胞功能活性。
- 林燕萍何嘉承佘家姮巫阳生吴银生林煜黄云梅黄美雅
- 关键词：健骨颗粒破骨细胞
