刘仪
- 作品数：37 被引量：276H指数：11
- 供职机构：中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 抗小麦黄花叶病毒转基因小麦的获得及病毒诱导的基因沉默被引量：25
- 2002年
- 利用Act1启动子和除草剂选择标记bar基因,构建了含有小麦黄花叶病毒外壳蛋白基因的植物表达载体,并采用基因枪法导入小麦品系.经PCR和PCR-RFLP对转基因小麦T0代及T1代进行检测后,对阳性植株的后代株系（T2代）进行田间抗病性检测.结果表明,外源基因可以在后代中遗传,并且其中一个转基因株系的后代（P8-T2）对小麦黄花叶病毒呈现高度抗性.经Western blot和RT-PCR检测发现,抗病转基因小麦体内外壳蛋白基因在病毒感染后的表达水平出现明显下降,认为所获得转基因小麦的抗性是由病毒诱导的基因沉默引起的.
- 董槿韩成贵张凌娣刘伟华翟亚锋于嘉林肖悦岩刘仪何震天陈秀兰韩月澎王锦荣
- 关键词：病毒诱导小麦黄花叶病毒外壳蛋白基因转基因小麦基因沉默抗病机制
- 甜菜坏死黄脉病毒RNA4的菌传功能分析被引量：9
- 2002年
- 构建了甜菜坏死黄脉病毒（BNYVV）RNA4全长核苷酸序列以及5种编码区突变体的侵染性cDNA克隆.不同结构的RNA4体外转录物与只含有RNA1,2和3的BNYVV分离物总RNAs混合后分别接种寄主植物番杏（Tetragonia expansa）作为毒源,繁殖后接种甜菜,利用无毒甜菜多黏菌（Polymyxa betae）进行传毒实验.结果表明,RNA4编码区内各种缺失突变均能显著地抑制多黏菌的传播,但插入4个碱基的移码突变体对传毒没有影响,说明BNYVV RNA4中的部分核苷酸序列对于被真菌介体高效传播是必需的,并且可能是在RNA水平上具有功能.
- 韩成贵李大伟王东勇杨莉莉于嘉林蔡祝南刘仪
- 关键词：甜菜坏死黄脉病毒BNYVV功能分析核苷酸序列分析
- 寄生甜菜根部油壶菌(Olpidiumsp.)种的鉴定被引量：3
- 1999年
- 光镜观察来源于新疆甜菜根部油壶菌( Olpidium sp .) 的游动孢子囊、游动孢子及休眠孢子的形态、大小及特点,结合实验所得油壶菌生理及寄生特性,将来源于新疆寄生甜菜根部油壶菌鉴定为甘蓝油壶菌[ Olpidium brassicae (Wor.) Dang.]
- 蒋军喜羊大进张景凤于嘉林蔡祝南刘仪
- 关键词：甜菜油壶菌
- 甜菜坏死黄脉病毒内蒙分离物RNA3序列分析及编码25kD蛋白基因在大肠杆菌中的表达被引量：10
- 1998年
- 以甜菜坏死黄脉病毒（ＢＮＹＶＶ）内蒙分离物的总ＲＮＡ为模板，通过反转录－ＰＣＲ扩增获得ＢＮＹＶＶＲＮＡ３全长ｃＤＮＡ。将其克隆到ｐＧＥＭ－７Ｚｆ（＋）上，得到重组质粒ｐＧＢＹ５６。序列分析结果表明，内蒙分离物ＲＮＡ３基因组全长为１７７５ｎｔ，其中包含３个开放阅读框架，分别编码２５ｋＤ蛋白、４．６ｋＤ蛋白和一种由５９个氨基酸组成的Ｎ蛋白。与法国Ｆ２分离物、德国Ｇ１分离物和日本Ｓ分离物相比，其核苷酸序列的同源性分别为９６．４％、９６．８％和９７．３％。将２５ｋＤ蛋白编码基因克隆到ｐＪＷ２上，构建了该基因的原核表达载体。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ分析结果表明，２５ｋＤ蛋白基因在Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中经温度（４２℃）诱导后。
- 李大伟于嘉林韩成贵韩成贵刘仪邢怡明
- 关键词：甜菜坏死
- 砂培体系中甜菜多粘菌生物学特性的研究被引量：3
- 1997年
- 在改进的砂培体系中，甜菜多粘菌（Polymyxabetae）完成生活循环只需7天。利用砂培体系研究了多粘菌在不同pH值、光照、接种材料和接种量条件下，对寄主的侵染以及在其中繁殖的情况，研究了多粘菌完成侵染所需时间，侵染的游动孢子最初释放时间，游动孢子体外存活期和休眠孢子对温度的敏感性等生物学特性。
- 彭日荷韩成贵杨莉莉刘仪
- 关键词：甜菜多粘菌生物学特性
- 中国小麦黄花叶病毒(WYMV)分布的RT-PCR鉴定被引量：38
- 1997年
- 利用小麦黄花叶病毒（Ｗｈｅａｔｙｅｌｌｏｗｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ，ＷＹＭＶ）和小麦梭条花叶病毒（ｗｈｅａｔｓｐｉｎｄｌｅｓｔｒｅａｋｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ，ＷＳＳＭＶ）的特异性序列为引物，逆转录－ＰＣＲ方法并配合免疫电镜观察，对采自我国四川陕西、河南、安徽、江苏５省９个县、市的２７份感病田小麦样品进行检测。除２份样品未检测到病毒外，其余２５份样品均为小麦黄花叶病毒所侵染，没有发现小麦梭条花叶病毒，由此表明在中国长江中、下游、淮河及渭河流域严重危害小麦的真菌传线状病毒应主要为小麦黄花叶病毒。
- 李大伟韩成贵邢恰明田兆丰于嘉林蔡祝南刘仪
- 关键词：小麦黄花叶病毒RT-PCR
- 小麦黄花叶病毒罗田分离物28kD蛋白基因的克隆及序列分析被引量：5
- 2003年
- 通过RT PCR,获得了小麦黄花叶病毒罗田分离物28kD蛋白基因的cDNA克隆pUW28 10。序列分析结果表明,小麦黄花叶病毒不同分离物的28kD蛋白基因的核苷酸序列存在一定的差异:湖北罗田和河南潢川分离物在第326,327和336位较四川雅安、江苏扬州及日本分离物缺少3个核苷酸(nt),前两者核苷酸长度为762nt,后三者为765nt;不同分离物核苷酸序列同源性从92 1%到96 9%,相应的氨基酸序列同源性从89 8%到97 3%。
- 董家红于嘉林韩成贵方守国刘仪
- 关键词：小麦黄花叶病毒CDNA克隆
- 甜菜坏死黄脉病毒RNA4 cDNA克隆、序列分析及其编码蛋白基因在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 1997年
- 以甜菜坏死黄脉病毒(Beet Necrotic Yellow Vein Virus,简称BNYVV)内蒙分离物(NM)RNA为模板,通过反转录和PCR扩增得到了BNYVV RNA4基因组的cDNA克隆pGBF6。序列分析结果表明,pGBF6含有全长RNA4 cDNA插入片段,大小为1465个核苷酸,含有一个849个核苷酸的开放阅读框架,编码产生由282个氨基酸组成的分子量为31kDa的蛋白。与法国F2分离物RNA4相比,其核苷酸序列和由此推导的氨基酸序列同源性分别为97.1％和96.4％,并在5'端非编码区比F2分离物缺失了3个核苷酸。将RNA4编码区cDNA克隆到原核表达载体pFLAG·MAC上,获得融合蛋白表达质粒pFMBF87。所构建的融合蛋白由载体序列编码的14个氨基酸和31kDa蛋白C端的233个氨基酸组成。经IPTG诱导,Westem blotting分析表明,该融合蛋白在大肠杆菌中得到高效表达。本文还对内蒙分离物的株系划分进行了讨论。
- 于嘉林韩成贵杨莉莉李大伟刘仪
- 关键词：甜菜坏死黄脉病毒CDNA克隆
- 小麦黄花叶病毒罗田分离物细胞质内含体蛋自基因的序列分析被引量：2
- 2003年
- 利用RT-PCR,获得了小麦黄花叶病毒湖北罗田分离物细胞质内含体(CI)蛋白基因的cDNA克隆。序列分析结果表明,湖北罗田分离物CI基因由1977个核苷酸组成,编码一个由659个氨基酸组成的蛋白质。与已报道的河南潢川、四川雅安、江苏扬州及日本分离物序列比较,不同分离物之间核苷酸序列同源性在95.0％～97.5％之间,相应推导的氨基酸序列同源性在93.2％～97.1％之间。并对CI蛋白的功能进行了讨论。
- 耿波韩成贵李大伟于嘉林刘仪
- 关键词：小麦黄花叶病毒细胞质
- 甜菜黑色焦枯病毒作为外源基因的表达载体
- 本发明描述了甜菜黑色焦枯病毒(Beet black scorch virus，BBSV)的全部核苷酸序列。BBSV全基因组的cDNA克隆在真核和原核启动子控制下能够得到转录，产生的病毒RNA对寄主植物具有感染能力。并以插...
- 于嘉林蔡祝南李大伟韩成贵刘仪曹云鹤原雪峰丁群
- 文献传递
