何存利 作品数:35 被引量:92 H指数:5 供职机构: 宁夏农林科学院 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
奶牛流产衣原体单克隆抗体研究——抗原的培养与提纯 被引量:2 1999年 将奶牛衣原体卵黄囊膜适应株cyp1接种于7日龄鸡胚卵黄囊进行衣原体抗原培养,将培养的衣原体经差速离心、超速离心纯化,所得的纯化衣原体抗原经间接ELISA试验与标准阳性血清反应呈阳性结果。证明所用培养和提纯衣原体的方法是成功的。 谢琴 何存利 史建斌关键词:提纯 奶牛 猪繁殖和呼吸道综合症 1997年 猪繁殖和呼吸道综合症陈祝三谢琴何存利史建斌(宁夏农林科学院畜牧兽医研究所银川750002)猪繁殖和呼吸道综合症(PRRS)是猪的一种危害极大、传染迅速的病毒性传染病,严重危害各国养猪业的发展。其特征是:流产、死产、产弱仔(弱仔死亡率很高)、胎儿木乃伊... 陈祝三 谢琴 何存利 史建斌关键词:猪病 PRRS 抗奶牛衣原体单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量:5 1999年 将奶牛衣原体抗原免疫的 B A L B/c 小鼠脾细胞与 S P2/ O 细胞在聚乙二醇作用下融合, 用间接 E L I S A 试验筛选, 以有限稀释法克隆3 次, 得到6 株分泌抗奶牛衣原体单克隆抗体( Mc Ab) , 选择抗体分泌较高的 G2 、 F23 、 A 株进行详细的研究, 结果表明, 其核内染色体数为9035 、9214 、9442 ; 抗体属性为 Ig G2a 、 Ig G1 、 Ig M, 用交叉 E L I S A 法对3 株 Mc Ab 作特异性分析, 该 Mc Ab 只与奶牛衣原体抗原, 猪衣原体抗原、羊衣原体抗原发生反应,而不与沙眼衣原体抗原、伪狂犬病抗原、布鲁氏杆菌抗原发生反应。 谢琴 何存利 史建斌关键词:单克隆抗体 ELISA 细胞快速、简易冻存法 1996年 将PK-15和ST细胞通过普通冰箱冷藏室(4℃)15分钟;普通冰箱冷冻室(-4℃)5分钟;低温冰箱(-20℃)20分钟;气态液氮30分钟后沉入液氮中,经一段时间后复苏,冻存细胞状态良好,全部冻存过程在70分钟内完成,比常规冻存方法节省时间,简便易行。 王东 谢琴 何存利 陈祝三 余桂芳关键词:动物 细胞培养 仔猪猪瘟免疫程序的研究 被引量:22 1998年 应用Dot-ELISA对不同日龄仔猪的猪瘟母源抗体进行检测,结果表明,仔猪在15、25、35和45日龄母源抗体阳性率分别为98.15%、78.50%、70.41%和22.22%。根据母源抗体检测结果,对各日龄仔猪免疫不同头剂猪瘟疫苗,免疫持续至150和210日龄时,对其免疫抗体进行检测,结果显示,仔猪在45日龄接种猪瘟疫苗4头剂;35和25日龄接种疫苗4或6头剂;新生仔猪乳前注苗2头剂,70日龄注苗4头剂,其阳性率均达90%以上。 陈祝三 何存利 谢琴 史建斌 赵学铭 裴富魁 马学校 雍建华 李宁新 汪娟 赵学强 张波关键词:猪瘟 免疫程序 仔猪 抗绵羊肺炎支原体单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量:2 1995年 用绵羊肺炎支原体(MO)抗原免疫的BALB/C小鼠,取血清抗体阳性免疫鼠的脾细胞与SP2/O细胞在聚乙二醇作用下进行融合,产生杂交瘤细胞、用间接ELISA法对杂交瘤细胞生长孔上清液进行检测,筛选阳性杂交瘤细胞株.以有限稀释法克隆1~2次,得到6株分泌抗绵羊肺炎支原体抗原的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株.选择抗体分泌较高的14A6、7A27、B38进行了较详细的研究,结果表明,其核内染色体数为94~96.抗体属性是:1株为IgG2a、2株为IgG1.用间接ELISA法对3株McAb作符异性分析、该McAb只特异地与绵羊肺炎支原体抗原发生反应,而不与猪肺炎支原体、山羊无乳症支原体抗原发生反应.将杂交瘤细胞注射BALB/C小鼠诱生腹水.其抗体效价提高100倍.杂交瘤细胞在液氮中保存1~2年后复苏仍能稳定地分泌抗绵羊肺炎支原体McAb。 谢琴 王东 何存利 陈祝三 金桂芳关键词:绵羊 羊病 肺炎支原体病 单克隆抗体 杂交瘤细胞 猪伪狂犬病和猪细小病毒病混合感染的诊断与防治 1997年 猪伪狂犬病和猪细小病毒病混合感染的诊断与防治谢琴何存利(宁夏农林科学院畜牧兽医所银川750002)宁夏某新建猪场于1996年发生猪伪狂犬病和猪细小病毒病混合感染,给养殖业造成重大损失,现将该病的流行、症状、诊断与防制情况报告如下。1流行该猪场饲养各... 谢琴 何存利关键词:猪病 伪狂犬病 细小病毒病 4种细胞冻存法的比较 被引量:3 1997年 4种细胞冻存法的比较王东谢琴何存利陈祝三余桂芳(宁夏农林科学院畜牧兽医研究所银川750002)在组织培养中,经常需要冻存细胞。一般采用液氮低温保存细胞,遵循的原则是缓慢冷冻和快速融解。我们在进行猪细小病毒单克隆抗体技术研究中,曾应用小鼠骨髓瘤细胞的冻... 王东 谢琴 何存利 陈祝三 余桂芳关键词:病原细菌 抗猪细小病毒单克隆抗体在猪细小病毒病诊断上的应用 被引量:4 1996年 用淋巴细胞杂交瘤技术,研制出的抗猪细小病毒单克隆抗体,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对本地区所采得的308份猪血清进行检测,阳性检出率达66.6%。其中20~35日龄仔猪阳性检出率在80%以上;45日龄仔猪阳性检出率为75.5%;屠宰猪阳性检出率55.2%。选择70份被检血清用已建立的检测猪细小病毒抗体的 ELISA 试验与传统的 HI 试验进行比较,其敏感性较高,ELISA 检出阳性率为85.7%,HI 检出阳性率为80%,前者较 HI 试验高出5.7个百分点。 谢琴 王东 何存利 陈祝三 余桂芳关键词:单克隆抗体 细小病毒病 猪病 宁夏某猪场日本乙型脑炎的血清学调查 1996年 日本乙型脑炎是由日本乙型脑炎病毒引起的一种人畜共患传染病,能引起母猪流产、早产、死胎、木乃伊胎和公猪睾丸炎,给养猪业造成较大的经济损失。本病传播媒介为蚊虫,有明显的季节性,多发生于夏。 王东 谢琴 何存利 陈祝三 余桂芳关键词:猪病 日本乙型脑炎 血清学