齐建新
- 作品数：8 被引量：9H指数：2
- 供职机构：武汉生物制品研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 龋齿DNA疫苗(PGJAP)中污染大肠杆菌噬菌体的检测方法的建立被引量：2
- 2010年
- 龋齿DNA疫苗工程菌采用的大肠杆菌DH-5α在生产过程中极易污染大肠杆菌噬菌体,所以应对原始菌种、主菌种和工作菌种及大量生产时的发酵液作大肠杆菌噬菌体检测。用大肠杆菌噬菌体VCSM13为标准噬菌体株,对大肠杆菌C3000和DH-5α分别作噬菌斑检测和pfu值计算,验证并确定以VCSM13作为标准噬菌体株,C3000作为检测菌株,对龋齿DNA疫苗原始菌种、主菌种(第一代)、工作菌种(2007001)和其发酵液(200703)分别作噬菌体检测,并建立了检测大肠杆菌噬菌体的直接噬菌斑法。结果显示VCSM13在DH-5α的噬菌斑计数为76,pfu/ml为7.6×1013,C3000的噬菌斑计数为81,pfu/ml为8.1×1013,龋齿DNA疫苗的原始菌种、主菌种、工作菌种和发酵液,噬菌斑计数全部为0。Pfu也为0。阳性对照为74,pfu/ml是7.4×1013,阴性对照为0。通过对阳性对照样本作增殖法试验及挑斑接种验证后,证明此法操作简单,灵敏度高。
- 赵亚杰闭兰罗丹王炯齐建新马荣华张爱华
- 关键词：DNA疫苗大肠杆菌噬菌体
- 重组变形链球菌表面蛋白抗原(PAC)的表达和纯化
- 目的：进行PAC蛋白的表达和纯化，获得高纯度的抗原用于进行抗体检测。
方法：将转化了克隆有PAC蛋白基因的PET载体(PET-PAC)的大肠杆菌进行诱导表达，表达产物经Ni离子金属螫合层析纯化，并进行SDS—P...
- 闭兰罗丹王炯赵亚杰吴小丽齐建新张爱华
- 关键词：表面蛋白抗原变形链球菌龋齿DNA疫苗效力试验
- 文献传递
- 应用生物反应器大规模培养杂交瘤细胞生产体内治疗用WuT3单克隆抗体被引量：6
- 1998年
- 用3．5L和14L生物反应器培养WUT3杂交瘤细胞，结果表明用人血清可以代替牛血清培养WuT3细胞，在1％人血清培养液中添加适当营养成分，可达到10％小牛血清浓度下的细胞浓度（1．5×106／ml）和单抗产量（大于50μg／ml）。放大到75L生物反应器中采用半连续方式培养，建立了中试培养工艺流程和质控点，收获时细胞浓度为1.0×106～1．5×106／ml，单抗产量为40～70μg／ml，平均日产单抗达1g。在3．5L、14L、75L逐级放大培养过程中，细胞支原体为阴性，收获上清中单抗免疫活性合格，热原试验合格。
- 邹昌勇杜厚明冷武军朱俊铭喻远祥雷继军陈明洁齐建新杨明詹骞刘建陈晓玲董之昌
- 关键词：杂交瘤细胞单克隆抗体生物反应器
- WuT3无血清培养上清中单抗的纯化工艺建立
- 目的：对WuT3杂交瘤细胞无血清生物反应器培养上清中单克隆抗体进行分离纯化，建立中试分离纯化工艺。
方法：采用二步离子交换层析法结合硫酸铵盐析法分离纯化wul3单抗。在通过小量试验优化纯化参数后，进行中量放大和...
- 詹骞齐建新王志友董之昌邹昌勇杜厚明冷武军雷继军杨明端义坤孙可芳侯胜桐
- 关键词：无血清培养离子交换层析纯化生物制品
- 文献传递
- 预防龋齿DNA疫苗(PGJAP)大肠杆菌噬菌体检测方法的建立
- 研究背景预防龋齿DNA疫苗(PGJAP)的临床前研究是武汉生物制品研究所和武汉大学口腔医院,中国科学院病毒研究所,华中科技大学共同承担的研究课题,现已正式列入国家科技支撑计划中的《人用重大传染病疫苗的产业化关键技术研究》...
- 赵亚杰闭兰罗丹王炯齐建新马荣华张爱华杨晓明
- 文献传递
- 中试生产的结核DNA疫苗免疫效能研究被引量：1
- 2012年
- 目的以300L发酵罐中试规模生产的冻干Mtb Ag85A质粒DNA疫苗为基础免疫小鼠,对该疫苗的免疫效能进行研究。方法将4～6周龄的BALB/c小鼠20只通过数字表法随机分为2组,一组免疫MtbAg85A质粒DNA疫苗(结核DNA疫苗免疫组),另一组免疫PBS作为阴性对照(PBS对照组);于免疫前采血,肌内注射免疫3次。在第3次免疫后3周摘眼球处死小鼠,收集血清,进行血清特异性抗体检测和细胞因子(IFN-γ、IL-4)检测;同时对每只小鼠取脾细胞进行特异性γ干扰素(IFN-γ)分泌检测和脾细胞CD4+、CD8+百分率检测。结果 (1)免疫前后免疫组与对照组抗体水平吸光度A值均小于0.2。(2)结核DNA疫苗免疫组血清细胞因子IL-4水平[(146.2±34.3)pg/ml]低于PBS对照组[(177.7±28.1)pg/ml],差异有统计学意义(t=2.244,P=0.038),而IFN-γ水平[(129.6±159.0)pg/ml]虽然高于PBS对照组[(76.5±21.5)pg/ml],但差异无统计学意义(t=-1.047,P=0.309)。(3)酶联免疫斑点检测结果表明结核DNA疫苗免疫组脾细胞特异性IFN-γ分泌水平(分泌IFN-γ细胞个数)(103.60±112.14)高于PBS对照组(5.78±5.83),差异有统计学意义(t=36.538,P=0.018)。(4)结核DNA疫苗免疫组CD4+细胞百分率均值(21.57%)高于PBS对照组(12.17%),差异有统计学意义(t=3.043,P=0.038);CD8+细胞百分率均值(13.70%)与PBS对照组(10.57%)相比,差异无统计学意义(t=0.847,P=0.445)。结论Mtb Ag85A质粒DNA疫苗主要刺激机体Th1型细胞免疫,而对诱导机体产生Th2型细胞免疫应答没有显著的促进作用。
- 吴小丽闭兰赵亚杰罗丹齐建新王炯李忠明
- 关键词：疫苗DNA抗原免疫活性
- DNA疫苗质粒Ag85A/DH5α工程菌大规模发酵工艺的优化
- 目的：优化重组质粒DNA DH5α工程菌发酵工艺条件。
方法：控制相关发酵参数，观察溶解氧浓度、生长速率和培养时间对工程菌生长和质粒浓度的影响。
结果：发酵培养对数生长期溶解氧浓度控制在30％～50％...
- 齐建新王炯闭兰赵亚杰项美娟张爱华
- 关键词：工程菌发酵工艺溶解氧浓度DNA疫苗
- 文献传递
- 冻干龋齿DNA疫苗稳定性观察
- 研究背景DNA疫苗作为第三代疫苗,与传统疫苗相比能够有效诱导细胞和体液免疫反应、技术通用性强、研发周期短、生产和运输成本低等优点,在病毒性、细菌性、寄生虫疾病、肿瘤和变态免疫反应的预防和治疗等领域显示了良好的应用前景。本...
- 王炯闭兰赵亚杰罗丹齐建新张爱华杨晓明
- 文献传递
