陈雪
- 作品数:4 被引量:9H指数:2
- 供职机构:南通医学院神经科学研究所江苏省神经再生重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 大鼠损伤神经组织中Tropic1808基因相关蛋白的亲和层析法纯化
- 2002年
- 目的 :纯化大鼠损伤坐骨神经组织中 Tropic180 8基因特异表达的蛋白。方法 :将 Tropic180 8基因重组蛋白的单克隆抗体与 CNBr- activated Sepharose 4 B交联 ,用亲和层析的方法 ,提取在大鼠损伤坐骨神经组织中Tropic180 8基因特异表达的蛋白 ,并将纯化的蛋白进行 SDS- PAGE分析。结果 :(1)经层析系统紫外检测 ,亲和层析后洗脱 ,在 2 80 nm波长处获得两个不同的紫外吸收峰。 (2 )亲和层析的洗脱液 ,经冷冻浓缩 ,SDS- PAGE分析 ,出现4 3.0 k Da、32 .0 k Da、31.0 k Da和 14 .4 k Da蛋白条带 ,其中在 32 .0 k Da的蛋白条带与预期的 Tropic180 8基因在组织中的编码蛋白基本相符 ,而 4 3.0 k Da、31.0 k Da、14 .4 k Da蛋白 ,预测为 Tropic 180 8基因在大鼠损伤坐骨神经组织中表达的相关蛋白。结论 :用亲和层析的方法 ,获得了大鼠损伤坐骨神经组织中 Tropic180 8基因特异表达的相关蛋白 。
- 姚登兵王云丹陈雪丁斐
- 关键词:TROPIC损伤坐骨神经相关蛋白单克隆抗体SDS-PAGE
- Tropic1808基因重组蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量:2
- 2002年
- 目的 制备Tropic180 8基因重组蛋白的单克隆抗体 ,并对其生物学特性进行鉴定。方法 用Tropic180 8基因重组蛋白作为抗原免疫BALB/C小鼠 ,取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤 (SP2 / 0 )细胞融合 ,经ELISA筛选和有限稀释法获得分泌单克隆抗体的细胞株 ,WesternBlot等方法对其生物学特性进行鉴定。结果 获得 2株识别Tropic180 8基因重组蛋白的单克隆抗体的细胞株Ⅱ 4B、Ⅲ 4C。WesternBlot法显示该抗体特异性地识别Tropic180 8基因重组蛋白 ;ELISA法测定杂交瘤细胞培养上清及体内成瘤后产生的腹水的抗体效价分别为 1∶80、 1∶6 0 0 ;杂交瘤细胞染色体数平均为 90~ 10 0 ;亚类鉴定单抗的重链为小鼠IgG1,轻链为κ型。结论 成功地制备了Tropic180 8基因重组蛋白的单克隆抗体 ,为进一步研究Tropic180 8基因重组蛋白的功能提供了良好的基础。
- 陈雪张沛云王晓冬吴坚
- 关键词:单克隆抗体
- Tropic1808基因表达蛋白的免疫组织化学研究
- 2003年
- 目的 :制备Tropic180 8基因重组蛋白的单克隆抗体 ,对其表达蛋白在损伤大鼠坐骨神经中的表达与分布进行研究。方法 :用Tropic180 8基因重组蛋白作为抗原免疫BALB/C小鼠 ,有限稀释法获得分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,取切断 12天后的SD大鼠坐骨神经的近侧端和远侧端 ,利用Tropic180 8基因重组蛋白单抗进行免疫组织化学染色。 结果 :获得 2株识别Tropic180 8基因重组蛋白的单克隆抗体的细胞株Ⅱ 4B、Ⅲ 4C。ELISA法测定杂交瘤细胞培养上清及体内成瘤后产生的腹水抗体效价分别为 1∶80、1∶10 4;杂交瘤细胞染色体数平均为 90~ 10 2 ;亚类鉴定单抗的重链为小鼠IgG1,轻链为κ型。损伤神经的近侧端和远侧端施万细胞均有Tropic180 8基因表达蛋白的表达 ,远侧端的强度和面积强于和大于近侧端。 结论 :成功制备了Tropic180 8基因重组蛋白的单克隆抗体。
- 陈雪张沛云王晓冬吴坚
- 关键词:免疫组织化学基因重组蛋白ELISA法神经再生
- 周围神经损伤后Tropic 1808基因表达蛋白的免疫组织化学研究被引量:9
- 2004年
- 目的 研究Tropic 180 8基因表达蛋白在受损大鼠坐骨神经中的表达与分布。 方法 用酶联间接法和双重免疫荧光法进行免疫组织化学染色。并通过计算机图像处理技术 ,测量阳性区域的强度与面积。 结果 损伤神经的近侧端和远侧端中施万细胞均有Tropic 180 8基因表达蛋白的阳性免疫反应 ,阳性免疫反应物主要分布于施万细胞膜上 ,远侧端的阳性反应物强度和面积强于和大于近侧端。 结论 周围神经损伤后 ,Tropic180 8基因表达蛋白分布于损伤近侧端和远侧端的施万细胞膜上 ,并且远侧端中该蛋白的表达强于近侧端。
- 陈雪张沛云王晓冬吴坚
- 关键词:TROPIC坐骨神经免疫组织化学