郝美丽
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项黑龙江省科技攻关计划黑龙江省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 正交试验在人乳头瘤病毒16型E2蛋白原核表达优化中的应用被引量：8
- 2011年
- 鉴定人乳头瘤病毒(HPV)16型E2蛋白的重组表达菌株,通过正交试验快速优化诱导表达条件,增加目的蛋白的表达量。应用SDS-PAGE及Western blot分析鉴定表达后的蛋白。选取诱导时间、诱导剂浓度、细菌密度OD600和诱导温度共4个主要外部因素。采用四因素两水平正交试验设计,以单位体积内HPV16 E2目的蛋白含量作为检测指标,结果用SPSS 13.0软件进行统计分析。结果表明,HPV16 E2菌株鉴定正确。HPV16 E2蛋白表达主要以不溶性蛋白为主,主要影响因素是诱导剂浓度和诱导温度,最佳诱导条件为37℃、1.0 mmol/L IPTG和OD600为1.0的条件下诱导7 h,正交试验对分子生物学反应的影响因素分析和条件优化有借鉴意义。
- 商庆龙马延秀郭志伟李立群郝美丽孙宇辉魏兰兰谷鸿喜
- 关键词：正交试验原核表达
- 乙型肝炎病毒拉米夫定YVDD耐药株及YMDD野生株稳定表达细胞系建立及鉴定
- 2019年
- 目的建立乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)拉米夫定YVDD耐药株及YMDD野生株稳定表达细胞系。方法利用携带有HBV拉米夫定YVDD耐药株或YMDD野生株的全基因真核表达重组质粒分别稳定转染HepG2细胞,G418筛选后建立稳定表达细胞株;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测HBV抗原表达情况;FT-PCR检测HBV DNA载量;FH-PCR-MC验证细胞株拉米夫定耐药变异类型;测序分析细胞株内HBV的基因变异情况。结果成功建立HBV拉米夫定YVDD耐药株和YMDD野生株稳定表达细胞系;第1、10、30代细胞株HBsAg和HBeAg表达稳定;第30代细胞内及上清中HBV DNA载量高于10^4copies/mL;耐药株变异类型为YVDD;测序显示,细胞基因组携带的HBV耐药株基因存在A1762T/G1764A/rtM204V/rtL180M/rtV173L的多位点联合变异。结论成功建立HBV拉米夫定YVDD耐药株和YMDD野生株稳定表达细胞系,即HepG2-HBV/CV和HepG2-HBV/CM细胞,为筛选抗HBV拉米夫定耐药株的有效药物提供了理想的细胞模型。
- 徐维祯谷鸿喜郝美丽马延秀李皓乐汪颖楠
- 关键词：乙型肝炎病毒YMDD
- HBV相关肝癌中miR-129-2下调参与SOX4基因过表达及其对肿瘤的影响
- 目的：近期一些文献报道了microRNA miR-129-2基因在多种人类肿瘤中发生高度甲基化，并且由于甲基化等表观遗产学改变导致miR-129-2成熟体表达水平下降。SOX4作为重要的转录调控因子，已发现在多肿瘤中表达...
- 郝美丽
- 关键词：肝细胞癌DNA甲基化
