李青
- 作品数：17 被引量：18H指数：3
- 供职机构：东南大学附属中大医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省医学重点人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胞间黏附分子1和透明质酸在肿瘤坏死因子α介导单核细胞-肾小管上皮细胞黏附中的作用被引量：1
- 2009年
- 目的观察肿瘤坏死因子α（TNF-α）对单核细胞（Mφ）与肾小管上皮细胞（HK2）黏附的影响及探讨其分子机制。方法应用人近端肾小管上皮细胞株HK2细胞与人单核细胞系U937细胞共培养。采用BCECF-AM荧光染料法测定单核细胞黏附。分离提取HK2上清液透明质酸（HA）、胰酶消化部分HA及细胞相关HA，用ELISA法检测HA表达。用流式细胞仪检测HK2细胞表面胞间黏附分子1（ICAM-1）表达。结果（1）TNF-α（10μg／L）诱导24h后，Mφ与HK2细胞黏附增加（2．25±0．05）倍（P〈0．01）。（2）TNF-α干预HK2细胞24h后，细胞表面ICAM-1表达增加（1．85±0．22）倍（P〈0．01）；细胞周同HA总量无明显改变，而分布发生变化，胰酶消化部分HA减少，为对照组的83％±11％（P〈0．05），七清液中HA增加（1．17±0．16）倍（P〈0．05），细胞相关HA表达无显著变化。（3）用HA酶（Hyal）去除HK2细胞表面胰酶消化部分HA可使细胞黏附增加（1．35±0．06）倍（P〈0．05）。用重组可溶性ICAM-1或抗CD18抗体预先干预U937细胞，可阻断ICAM-1依赖的单核细胞黏附，分别为未干预组的78％±7％及75％±8％（均P〈0．05）。结论TNF-α诱导的Mφ与HK2黏附增加可能与HK2细胞表面ICAM-1表达上调及细胞周同HA分布改变有关。
- 李青张晓良陈珑刘必成
- 关键词：肿瘤坏死因子Α细胞黏附透明质酸
- 糖尿病肾病患者尿液足细胞相关mRNA水平研究
- 郑敏吕林莉倪杰倪海峰李青马坤岭刘必成
- 白蛋白对肾小管上皮细胞血管紧张素转换酶2表达的抑制作用
- 2009年
- 目的观察白蛋白对人近端肾小管上皮细胞株(HK-2)血管紧张素转换酶2(ACE2)mRNA和蛋白表达的影响,探讨蛋白尿激活肾脏局部RAS的机制。方法采用不同浓度的牛血清白蛋白(BSA)作用HK-2细胞不同时间。以实时RT-PCR和Western印迹检测ACE2 mRNA和蛋白的表达。采用放射免疫法检测细胞上清液中血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)含量。采用激光共聚焦显微镜观察ACE2蛋白的表达。结果与对照组(相对表达量为0)相比,BSA使ACE2 mRNA表达显著减少(2.5mg/ml:—1.05±0.12;5mg/ml:—1.30±0.11;10mg/ml:—2.54±0.44;P均<0.05)。同时,BSA使ACE2蛋白表达显著降低(对照组:0.90±0.10;2.5mg/ml:0.66±0.09;5mg/ml:0.50±0.07;10mg/ml:0.35±0.05;P均<0.05)。其中BSA(10mg/m1)使ACE2 mRNA及蛋白表达减少呈时间依赖性(P均<0.05)。与对照组相比,不同浓度BSA组的细胞上清液中的ATⅡ均显著升高(P均<0.05)。激光共聚焦显微镜可见ACE2主要分布于细胞膜。结论BSA可显著抑制HK-2细胞ACE2 mRNA和蛋白的表达,此作用所导致的近曲小管间质液ATⅡ浓度升高可能与间质纤维化相关。
- 高珺宫状李青张晓良刘必成
- 关键词：血管紧张素转换酶白蛋白
- 应用自发性高血压大鼠建立2型糖尿病早期肾损害模型被引量：3
- 2010年
- 目的应用自发性高血压大鼠（SHR）建立具有胰岛素抵抗和早期肾脏损害特征的2型糖尿病模型。方法采用高糖高脂饲料喂养SHR大鼠2周诱导胰岛素抵抗，同时用WKY大鼠作为对照组。测定大鼠收缩压、血糖、三酰甘油、胆固醇及胰岛素水平，计算稳态模型评价的胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。禁食12h后，模型组予以腹腔注射链脲菌素（STZ）35mg／kg，对照组予以相同剂量的柠檬酸缓冲液。注射STZ72h后测随机血糖，以血糖≥16．7mmol／L为造模成功。观察8周后模型组与对照组的肾质量指数、收缩压、血脂、尿蛋白排泄以及肾脏病理变化情况。结果SHR大鼠高糖高脂饲料喂养2周后，与对照组相比，体质量、血脂、血糖均显著增加（均P〈0．05），HOMA—IR也显著升高（5．03±0．38比2．61±0．34，P〈0．05）。8周后，模型组大鼠多尿、多饮、体质量减轻，收缩压、血糖和糖化血红蛋白水平显著升高（P〈0．01）。尿蛋白量（24h）明显增加[（57．58＋16．54）mg／2dh比（5．35±1．90）mg／24h，P〈0．01]。肾质量指数（mg／g）也增加（P〈0．05），造模成功率为81．8％。病理改变为肾脏肥大，肾小球系膜基质增多，毛细血管基底膜增厚，足细胞空泡变性，足突消失，部分融合。结论联合高糖高脂饲料及小剂量STZ注射SHR大鼠成功制备2型糖尿病特征的动物模型，并诱导出糖尿病早期肾脏损害，为进一步研究2型糖尿病肾病发生机制和药物干预提供了简单实用的动物模型。
- 戴厚永汤日宁马坤岭郑敏倪杰李青张晓良刘必成
- 关键词：近交SHR胰岛素抵抗糖尿
- 卡托普利对白蛋白引起HK-2细胞ACE/ACE2表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)卡托普利(captopril,CAP)对白蛋白引起的肾小管上皮细胞表达ACE、ACE2及其作用产物AngⅡ的影响。方法实验分组:对照组(未干预的人近端肾小管上皮细胞株,HK-2);牛血清白蛋白(BSA)组(10 mg.ml-1);CAP组(10μmol.L-1);BSA加CAP组。分别采用实时定量RT-PCR和Western Blot检测ACE、ACE2 mRNA和蛋白的表达水平;采用放射免疫法(RIA)检测细胞上清液中AngⅡ的浓度。结果实时定量RT-PCR显示,与对照组比较(相对表达量为0),CAP组ACE mRNA表达差异无统计学意义(0.27±0.09 vs 0,P>0.05);CAP能显著抑制BSA引起的ACE mRNA表达上调[(BSA+CAP)组∶BSA组为(0.80±0.05)vs(1.58±0.20),P<0.05]。同时,由BSA引起的ACE2 mRNA表达下调作用也被显著抑制[(BSA+CAP)组∶BSA组为(-0.59±0.08)vs(0.24±0.11),P<0.05]。Western Blot显示BSA引起的ACE蛋白表达增加被显著抑制[(BSA+CAP)组∶BSA组为(0.85±0.09)vs(1.2±0.10),P<0.05],而ACE2蛋白表达的减少也明显减轻[(BSA+CAP)组∶BSA组为(0.49±0.09)vs(0.35±0.09),P<0.05]。RIA结果显示CAP可显著抑制BSA引起的细胞上清液中AngⅡ浓度增加[(BSA+CAP)组∶BSA组为(55.25±4.8)vs(97.25±10.4)pg.ml-1,P<0.05]。结论CAP可通过抑制ACE和增加ACE2表达而抑制白蛋白所引起的HK-2细胞肾素-血管紧张素系统激活。
- 高珺刘必成王艳丽李青张晓良
- 关键词：血管紧张素转换酶血管紧张素转换酶2卡托普利肾小管上皮细胞
- 透明质酸在慢性肾脏病中作用机制研究进展
- 2009年
- 透明质酸（hyoluronic acid，HA）作为细胞外基质的重要成分，不仅对肾脏固有细胞起支撑作用，也是一种重要的信号分子，参与细胞移行、黏附及信号转导等多种生物学过程，进而影响肾脏纤维化的发生发展。本文就透明质酸在肾脏病中作用机制的研究进展进行综述。
- 李青张晓良刘必成
- 关键词：肾疾病慢性病透明质酸
- 肾素抑制剂在高血压治疗中应用的研究进展被引量：1
- 2008年
- 高血压是威胁人类健康的主要杀手，据世界卫生组织估计有近2／3的中风、1／2的缺血性心脏病的发生都与高血压控制不良有关。肾素．血管紧张素系统（RAS）在调节血压及体液平衡中起至关重要的作用，并与器官组织结构重塑密切相关。该系统的过分激活将导致血压升高及靶器官损伤。近年成功开发的RAS抑制剂如血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂（ARB）和血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）已广泛应用于高血压、心血管及肾脏疾病的治疗。
- 李青刘必成
- 关键词：高血压治疗肾素抑制剂血管紧张素转换酶抑制剂血管紧张素系统血压控制不良缺血性心脏病
- NF—κB通路在单核细胞诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用
- 2011年
- 目的观察单核细胞（U937细胞）对人近端肾小管上皮细胞（HK-2细胞）转分化的影响及其分子机制。方法将HK-2细胞与人单核细胞系U937细胞共培养；倒置相差显微镜观察HK-2细胞形态；Western印迹、实时荧光定量PCR法检测仅平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、纤连蛋白（FN）、E钙黏蛋白（E—cadherin）和胞间黏附分子1（ICAM-1）表达；BCECF—AM荧光染色法测定单核细胞黏附；流式细胞仪法检测HK-2细胞表面分子ICAM-1表达；基因芯片筛选HK-2细胞基因变化；利用信号阻断剂阻断基因芯片筛选出的信号通路，进一步验证单核细胞诱导肾小管上皮细胞转分化的分子机制。结果单核细胞可直接诱导HK-2细胞发生形态变化，减少HK-2细胞E-cadherin表达（均P〈0．05），并上调α-SMA、FN表达（均P〈0．05）。应用CD18抗体阻断CD18-ICAM-1可抑制单核细胞黏附及其诱导的HK-2细胞形态变化。基因芯片结果显示，NF—κB信号通路分子CC亚族趋化因子配体20（CCL20）、白细胞介素（IL）2、IL-8、脂磷壁酸（LTA）及血小板内皮细胞黏附分子1（PECAMl）表达明显增加（均P〈0．05）。NF—KB信号阻断剂吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC）能显著抑制HK-2细胞形态变化及表面ICAM-1表达，抑制单核细胞诱导的肾小管上皮细胞转分化。结论单核细胞通过CD18分子与HK-2细胞表面ICAM-1结合，从而启动NF—κB信号通路介导的特定基因转录，最终导致肾小管上皮细胞发生转分化。
- 李青吕林莉郑敏马坤岭张晓良刘必成
- 关键词：胞间黏附分子1
- 虫草多糖诱导肾小管上皮细胞透明质酸分布变化及其对单核细胞粘附的影响
- 张晓良李宗尚程仲春李青金艳盛刘必成
- ICAM-1介导单核细胞诱导肾小管上皮细胞转分化
- 李青马坤岭吕林莉刘必成
