李小曼 作品数:32 被引量:56 H指数:4 供职机构: 湖南师范大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省自然科学基金 湖南省科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
流感病毒基质蛋白DNA疫苗的免疫保护作用研究 被引量:2 2009年 流感病毒基质蛋白(matrix protein,M)在病毒复制和毒力方面有重要作用.编码基质蛋白的M1基因和M2基因胞外域序列是A型流感病毒的保守序列,是研究具有交叉保护能力流感疫苗的候选基因.我们构建了真核表达质粒pCAGGSP7/M1和pCAGGSP7/M2,用质粒DNA免疫小鼠以观察其免疫原性.分别在M1 DNA免疫2、3、4、5、6次或M2 DNA免疫4、5、6次7d后,用致死量同源流感病毒A/PR/8攻击小鼠,通过检测小鼠血清抗体滴度、肺部病毒量和小鼠存活率来观察质粒DNA的保护效果.结果表明,随着免疫次数增加,M1 DNA免疫组在病毒攻击后小鼠存活率增高,而M2 DNA免疫组小鼠攻毒后全部死亡.说明M1 DNA多次免疫后能提供抗流感病毒的部分保护,M2 DNA没有免疫保护作用. 匡海门 王芙艳 杨忠东 常海艳 李小曼 陈则 方芳关键词:流感病毒 基质蛋白 DNA疫苗 玉竹多糖对流感病毒裂解疫苗的黏膜佐剂效应 被引量:4 2017年 探讨玉竹多糖(Polygonatum odoratun polysaccharides,POP)对流感病毒裂解疫苗黏膜免疫的佐剂效果。以BALB/c小鼠为模型,将H7N9流感病毒裂解疫苗单独或者添加不同剂量的POP(400、600、800、1 000和1200μg)做佐剂一次性滴鼻免疫小鼠,免疫三周后小鼠以致死剂量同源病毒攻击。实验结果表明,当在疫苗中加入1 000μg POP时,与疫苗单独免疫相比,单次滴鼻免疫就明显增强了小鼠抵抗致死量病毒感染的能力,体重丢失减少,肺部残余病毒滴度下降,存活率提高;血清中疫苗特异性IgG抗体和HI抗体以及鼻洗液中SIgA抗体都提高了;IgG亚类抗体检测显示,POP的加入显著增加了IgG1的抗体滴度,但抑制了IgG2a的产生,说明诱导的免疫应答偏向于Th2型。实验表明POP在一定剂量时能增强疫苗诱导的免疫应答,显示出黏膜佐剂效应。 张亚楠 黄生波 李小曼 常海艳 方芳关键词:玉竹多糖 裂解疫苗 滴鼻免疫 人类巨细胞病毒UL133基因在临床低传代株中的多态性研究 被引量:2 2010年 人类巨细胞病毒在多次传代后,会表现出不同的毒力水平.与临床低传代株Toledo相比,实验室高传代株AD169缺失了19个开放阅读框(ORF).这19个基因被认为是与HCMV致病性最可能相关的一组基因,研究这些基因的多态性对揭示HCMV致病性的遗传基础具有指导意义.UL133基因是这19个ORF中的一个.以临床低传代株Toledo和Merlin为对照,分析了23个临床病毒株UL133基因的遗传多态性.序列分析表明,UL133基因具有一定的多态性,Toledo株、Merlin株与我们分离到的临床株一起可分为3个基因型:G1、G2和G3.G2、G3型毒株均能导致先天性感染.没有发现UL133基因型与患儿临床疾病的必然关联. 扶星星 李梨平 黄超洋 李小曼 方芳 陈则关键词:人巨细胞病毒 基因分型 遗传多态性 临床用血的部分感染性病毒漏检率调查 被引量:1 2007年 目的调查湖南省临床用血质量现状。方法连续7年,对湖南省14个市(州)中心血站、基层血站、中心血库40个采供血机构已复检的库存临床用血进行部分传染病学指标调查。结果共抽查库存血液12384袋,阳性结果73袋,总阳性率为5.89‰。其中HBsAg阳性率为1.68‰;抗HCV抗体阳性率为2.26‰;梅毒阳性率为0.95‰;ALT异常2.10‰。结论临床用血质量仍存在不容忽视的问题,管理部门需加强监测。 李小曼 李梨平 王龙武关键词:血液质量 输血安全 鼠巨细胞病毒IE-1核酸疫苗和灭活疫苗联合免疫抗病毒感染的研究 被引量:1 2014年 巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)在人群中感染普遍,对婴幼儿及免疫低下人群中造成严重疾病,目前还没有针对该病毒的商品化疫苗。本研究以BALB/c小鼠为动物模型,探讨鼠巨细胞病毒(Murine cytomegalovirus,MCMV)IE-1 DNA疫苗和MCMV灭活疫苗联合免疫抗MCMV感染的免疫保护效果。将编码IE-1基因的DNA疫苗(pIE-1)通过肌肉注射辅以电穿孔的方式对小鼠进行初免,再用全病毒灭活疫苗单独或者辅以MF59佐剂进行加强免疫,分别通过ELISA和ELISPOT方法检测到联合免疫策略在免疫组小鼠体内诱导了MCMV特异性的抗体应答和CTL应答;免疫两周后用3×LD50致死剂量MCMV感染小鼠,疫苗对小鼠的免疫保护通过检测小鼠存活率、重要器官中的病毒滴度及体重丢失率来评价。结果显示,与单独免疫DNA疫苗或灭活疫苗相比,IE-1 DNA疫苗联合灭活疫苗组能同时在小鼠体内诱导体液免疫和细胞免疫应答,并提供小鼠完全保护;而且MF59辅以灭活疫苗免疫小鼠能增强疫苗的免疫效果。 吴舒婷 黄超洋 常海艳 张风华 方芳 李小曼 陈则关键词:灭活疫苗 即刻早期基因 一次接种HA DNA保护小鼠抵抗B型流感病毒攻击 2005年 为详细探讨小鼠不同次数接种B型流感病毒HA DNA疫苗后免疫应答情况,以及CpG基序的免疫佐剂效果,采用不同剂量HA DNA,1次或2次(间隔3周)电击法免疫BALB/C小鼠。初免4周后(或二免加强免疫1周后)用致死量流感病毒(B/Ibaraki/2/85)攻击。研究发现:①100μg HA DNA一次接种的小鼠全部存活;②经含有CpG基序的DNA免疫的小鼠体内诱导产生的抗HAIgG抗体更高,小鼠体重丢失更少。这些结果说明,1次接种100μg HA DNA疫苗可以使小鼠抵抗致死量B型流感病毒攻击,CpG基序能够增强HA DNA疫苗的免疫保护作用。 蔡先全 方芳 常海艳 李小曼 陈则关键词:流感 DNA疫苗 血凝素 CPG基序 枸杞多糖对甲型H1N1流感裂解疫苗黏膜接种的免疫增强作用 被引量:5 2012年 探讨枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharide,LBP)对不同剂量甲型H1N1流感裂解疫苗黏膜免疫的佐剂效力。设单独免疫LBP组和不免疫组作为对照,BALB/c小鼠以滴鼻方式免疫两次,间隔三周,二次免疫后两周收集小鼠血清、鼻洗液和脾脏淋巴细胞。结果显示血清中甲流特异性IgG和HI抗体滴度与接种疫苗剂量呈正相关,LBP的添加可提高体内抗体水平。高剂量组小鼠鼻洗液中也检测到特殊异性sIgA。单独疫苗组和添加佐剂组均能在体内诱导产生IgG1和IgG2a,所有组别IgG1抗体水平均略高于IgG2a,表明滴鼻接种裂解疫苗诱导Th1/Th2混合型免疫,LBP对Th1和Th2型免疫反应均有增强作用。高剂量疫苗添加LBP佐剂组小鼠脾脏细胞分泌IFN-γ水平显著高于其他组别,表明其在小鼠体内诱导了较强烈的细胞免疫反应。以上实验结果均证实LBP可以作为佐剂增强甲流裂解疫苗经黏膜途径免疫时的免疫效力。 许馨月 贺彪 张风华 李小曼 王芙艳 陈则 方芳关键词:黏膜免疫 枸杞多糖 佐剂 灵猫科3种兽针毛显微结构比较 被引量:9 2006年 对灵猫科大灵猫、小灵猫、花面狸头部针毛显微结构观察与分析,结果表明:1)3种动物针毛的长度大小不同;毛髓质指数存在显著性差异;2)毛鳞片在近根部和近稍部形状存在差别,主体部分等面积鳞片个数大灵猫、小灵猫与花面狸两两差别显著,而大灵猫与小灵猫无显著性差异(P>0.05).这些差异有利于分辨灵猫科的3种动物. 黎红辉 沈猷慧 李小曼 邓学建关键词:大灵猫 小灵猫 花面狸 显微结构 婴幼儿巨细胞病毒临床分离株的流行病学研究 2009年 目的:分析湖南省婴幼儿巨细胞病毒临床分离株的疾病类型构成及发病特点。方法:用人胚肺成纤维细胞(HEL)培养0-1岁患儿HCMVDNA阳性的尿液,共分离到29例病毒阳性者,对照患儿入院时的肝功能、血常规等指标及出院时的诊断,展开病原性调研。调查表明在婴幼儿神经脑损伤、肺炎、肝炎、结肠炎、肠炎、低蛋白血症、败血症等患者中都分离到了人类巨细胞病毒;扩增了29例分离到的HCMV的gB基因,并对其基因型进行了分析。结论:婴幼儿HCMV临床分离株的疾病类型分布广泛,HCMV是婴幼儿神经脑损伤等多种疾病的诱发因素,湖南省婴幼儿HCMV的感染以gBⅠ型为优势基因型。 李小曼 李梨平 扶星星 黄超洋 梁艳 张风华关键词:人巨细胞病毒 流行病学 先天性感染 H7N9灭活疫苗联合MF59佐剂在小鼠体内诱导的长效体液免疫应答 2017年 以BALB/c小鼠为模型,探讨H7N9流感病毒灭活疫苗免疫小鼠后所诱导的长效体液免疫应答的动态变化。不同剂量的流感H7N9全病毒灭活疫苗单独或辅以MF59佐剂肌肉注射免疫小鼠一次。连续采集免疫后小鼠15个月的血清,用ELISA方法检测特异性IgG抗体水平,血凝抑制(hemagglutination inhibition,HI)试验和微量中和(microneutralization,MN)试验检测第15个月时的HI抗体和中和抗体效价。实验结果发现,小鼠血清中的特异性IgG抗体水平随时间变化持续缓慢上升,第5个月时达到顶峰,随后略有下降但一直持续平稳状态;IgG抗体滴度与疫苗剂量成正相关,且添加佐剂能提高抗体滴度。HI及MN抗体检测表明,免疫后第15个月产生的抗体能有效中和病毒,且抗体跟疫苗剂量成正比。以上研究表明,H7N9流感病毒灭活疫苗免疫小鼠一次诱导产生的特异性抗体能在较长期内保持比较平稳的抗体滴度,为小鼠提供免疫保护;增加抗原剂量和添加MF59佐剂能增加疫苗特异性抗体水平。该研究为H7N9流感疫苗产生的长期保护效应提供了一定的数据积累和参考。 彭纳 周鹏 苏领 方芳 李小曼 常海艳关键词:灭活疫苗 体液免疫应答