方芳 作品数:47 被引量:188 H指数:7 供职机构: 湖南师范大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部“优秀青年教师资助计划” 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文学 文化科学 更多>>
抗H9亚型流感病毒HA抗血清对小鼠的被动免疫预防和治疗研究 2010年 H9亚型流感病毒是引起大流感的潜在威胁.抗血清被动免疫是一种有效的应对流感的方法.采用H9N2禽流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)DNA重组质粒免疫BALB/c小鼠制备抗血清.在致死量同源病毒感染前或后通过尾静脉给小鼠注射不同剂量抗血清,观察小鼠14d内的体重丢失率和死亡率.结果显示,1280血凝抑制单位(hemagglutination Inhibition unit,HIU)抗血清可给小鼠提供至少长达11d的100%预防和1d的80%治疗保护.HA DNA疫苗免疫制备的抗血清可以有效地抵抗同源H9病毒的致死攻击,在H9病毒感染的预防和治疗中发挥作用. 徐芙妤 黄恋 杨忠东 常海艳 方芳 陈则关键词:流感 H9亚型 抗血清 免疫预防 编码流感病毒血凝素基因和CD40L的核酸疫苗抗小鼠流感研究 被引量:5 2004年 为了检测表达CD40L的质粒能否作为核酸疫苗佐剂提高A/PR8/34流感病毒血凝素(HA)DNA疫苗的免疫应答,构建了表达鼠CD40L的质粒,并将它与A型流感病毒的 HA DNA疫苗用电击的方法共同免疫BALB/C小鼠(各30礸),免疫两次,间隔三周,第二次免疫后1周,用致死量流感病毒A/PR8/34攻击。发现与单独免疫30礸 HA相比,血清中抗HA的IgG抗体量明显提高,且以IgG2a抗体提高为主,小鼠体重减轻非常少且体重恢复加快。实验结果显示,CD40L能作为流感病毒核酸疫苗佐剂,提高小鼠抗流感病毒攻击的能力。 邹丽容 方芳 陈则关键词:流感病毒 血凝素 CD40L 核酸疫苗 免疫应答 茯苓多糖对流感灭活疫苗的免疫增强作用 被引量:25 2009年 探讨茯苓多糖作为流感病毒灭活疫苗佐剂的免疫增强作用.将不同剂量(200μg或1 000μg)的茯苓多糖分别与低剂量(0.015μg)或高剂量(1.5μg)流感病毒(A/PR/8)灭活疫苗共同免疫小鼠,以相应剂量灭活疫苗的单独免疫组、灭活疫苗与氢氧化铝(100μg)共同免疫组、PBS免疫组作为对照组.一次免疫后3周收集血清,ELISA检测血清中IgG、IgG1和IgG2a的抗体水平;并用致死量(40×LD50)流感病毒(A/PR/8)攻击小鼠,通过观察小鼠的体重丢失率、肺部病毒量、存活率来反映佐剂的免疫增强效果和疫苗的保护作用.结果显示,茯苓多糖能显著增加血清抗体水平,并提高小鼠抗致死量流感病毒攻击的能力,其免疫增强效果与氢氧化铝相当.茯苓多糖可作为一种新型的流感病毒灭活疫苗的免疫佐剂. 谢国秀 王芙艳 杨忠东 王绍彬 张风华 陈则 方芳关键词:茯苓多糖 流感 灭活疫苗 佐剂 H1N1裂解疫苗辅以C48/80佐剂滴鼻免疫小鼠能够提供抗甲流的保护作用 2014年 2009年"甲型H1N1流感"全球流行导致了数以万计人的死亡。疫苗的及时研制为预防、控制甲流的传播,减少发病率和死亡率做出了重大贡献。甲流疫苗辅以佐剂滴鼻免疫能更好地抵御甲流攻击。将A/California/7/2009(H1N1)裂解疫苗辅以化合物48/80(C48/80)佐剂滴鼻免疫雌性BALB/c小鼠,免疫一次,免疫后28 d,小鼠用致死剂量的同源病毒进行攻击。结果发现,滴鼻免疫组的抗体滴度均达到很高的水平,而且随着H1N1裂解疫苗剂量的增加,其对小鼠的保护作用越强,同时添加佐剂可以更有效提高H1N1裂解疫苗的保护效果。实验结果说明H1N1裂解疫苗辅以C48/80佐剂滴鼻免疫能够保护小鼠免受流感病毒的感染。 谢震渊 方芳 沈谊清 吴金妍 陈则 郑眉关键词:疫苗 佐剂 滴鼻免疫 玉竹多糖对流感病毒裂解疫苗的黏膜佐剂效应 被引量:4 2017年 探讨玉竹多糖(Polygonatum odoratun polysaccharides,POP)对流感病毒裂解疫苗黏膜免疫的佐剂效果。以BALB/c小鼠为模型,将H7N9流感病毒裂解疫苗单独或者添加不同剂量的POP(400、600、800、1 000和1200μg)做佐剂一次性滴鼻免疫小鼠,免疫三周后小鼠以致死剂量同源病毒攻击。实验结果表明,当在疫苗中加入1 000μg POP时,与疫苗单独免疫相比,单次滴鼻免疫就明显增强了小鼠抵抗致死量病毒感染的能力,体重丢失减少,肺部残余病毒滴度下降,存活率提高;血清中疫苗特异性IgG抗体和HI抗体以及鼻洗液中SIgA抗体都提高了;IgG亚类抗体检测显示,POP的加入显著增加了IgG1的抗体滴度,但抑制了IgG2a的产生,说明诱导的免疫应答偏向于Th2型。实验表明POP在一定剂量时能增强疫苗诱导的免疫应答,显示出黏膜佐剂效应。 张亚楠 黄生波 李小曼 常海艳 方芳关键词:玉竹多糖 裂解疫苗 滴鼻免疫 流感病毒神经氨酸酶不同区域的作用 被引量:32 2005年 神经氨酸酶(NA)是流感病毒主要表面糖蛋白之一,属于Ⅱ型膜蛋白,其单体为蘑菇形状.由胞内域、极性跨膜区、柄部、头部4部分组成,在膜上以四聚体形式存在.神经氨酸酶在流感病毒中的功能是切去感染细胞和血凝素上的N-乙酰神经氨酸,以利于子代病毒离开感染细胞,继续感染新细胞.NA的不同区域在流感病毒生活周期中具有不同的作用.NA胞内域在流感病毒生活周期中具有控制病毒颗粒形状的作用;NA跨膜区在将NA转移至内质网中起信号作用和将NA固定在膜上的作用;NA柄部连接NA的头部与跨膜区,使NA 头部远离病毒膜,以利于NA与底物结合;NA头部包含有糖基化位点、NA酶活性中心和抗原位点.对这些不同区域功能研究的深入,将有利于对神经氨酸酶在流感病毒传播中的作用的了解,并对流感病毒的预防或治疗等具有实际意义. 李向忠 方芳 陈则关键词:神经氨酸酶 流感病毒 基于血凝素关键序列的流感病毒疫苗 2005年 流感病毒的血凝素(HA)位于流感病毒包膜上,在流感病毒吸附和穿入宿主细胞的过程中起着重要作用.血凝素以三聚体的形式镶嵌在病毒包膜上,每个单体糖蛋白是由两个经二硫键连接的蛋白亚单位组成,即HA1和HA2.血凝素属Ⅰ型膜蛋白,其一级结构含有4个结构域:信号肽(前导序列)、胞浆域、跨膜域和胞外域. 血凝素是流感病毒最主要的表面抗原,它能够诱导机体产生相应的中和抗体以中和病毒.血凝素一般含有5 个抗原决定簇,流感病毒的流行与其抗原结构的变化密切相关.主要就血凝素的结构和功能、流感病毒疫苗以及以血凝素基因关键序列为基础的流感病毒疫苗进行阐述. 杨文 方芳 陈则关键词:流感病毒 血凝素 疫苗 一次接种HA DNA保护小鼠抵抗B型流感病毒攻击 2005年 为详细探讨小鼠不同次数接种B型流感病毒HA DNA疫苗后免疫应答情况,以及CpG基序的免疫佐剂效果,采用不同剂量HA DNA,1次或2次(间隔3周)电击法免疫BALB/C小鼠。初免4周后(或二免加强免疫1周后)用致死量流感病毒(B/Ibaraki/2/85)攻击。研究发现:①100μg HA DNA一次接种的小鼠全部存活;②经含有CpG基序的DNA免疫的小鼠体内诱导产生的抗HAIgG抗体更高,小鼠体重丢失更少。这些结果说明,1次接种100μg HA DNA疫苗可以使小鼠抵抗致死量B型流感病毒攻击,CpG基序能够增强HA DNA疫苗的免疫保护作用。 蔡先全 方芳 常海艳 李小曼 陈则关键词:流感 DNA疫苗 血凝素 CPG基序 枸杞多糖对甲型H1N1流感裂解疫苗黏膜接种的免疫增强作用 被引量:5 2012年 探讨枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharide,LBP)对不同剂量甲型H1N1流感裂解疫苗黏膜免疫的佐剂效力。设单独免疫LBP组和不免疫组作为对照,BALB/c小鼠以滴鼻方式免疫两次,间隔三周,二次免疫后两周收集小鼠血清、鼻洗液和脾脏淋巴细胞。结果显示血清中甲流特异性IgG和HI抗体滴度与接种疫苗剂量呈正相关,LBP的添加可提高体内抗体水平。高剂量组小鼠鼻洗液中也检测到特殊异性sIgA。单独疫苗组和添加佐剂组均能在体内诱导产生IgG1和IgG2a,所有组别IgG1抗体水平均略高于IgG2a,表明滴鼻接种裂解疫苗诱导Th1/Th2混合型免疫,LBP对Th1和Th2型免疫反应均有增强作用。高剂量疫苗添加LBP佐剂组小鼠脾脏细胞分泌IFN-γ水平显著高于其他组别,表明其在小鼠体内诱导了较强烈的细胞免疫反应。以上实验结果均证实LBP可以作为佐剂增强甲流裂解疫苗经黏膜途径免疫时的免疫效力。 许馨月 贺彪 张风华 李小曼 王芙艳 陈则 方芳关键词:黏膜免疫 枸杞多糖 佐剂 A、B、C三型流感病毒病毒学、流行病学、临床特征和流感疫苗 被引量:19 2000年 2 0世纪人类遭受了 4次流感大流行 ,数千万人失去了生命 .流感病毒分 A、B、C三型 ,对其病毒学、流行病学和临床特征 ,以及流感病毒传统疫苗灭活疫苗和新型疫苗核酸疫苗的研究进展作了论述 . 陈则 方芳关键词:流感病毒 核酸疫苗 血凝素 神经氨酸酶