徐萍
- 作品数:20 被引量:19H指数:3
- 供职机构:河南科技学院动物科学学院更多>>
- 发文基金:河南省自然科学基金河南省基础与前沿技术研究计划项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 周口地区鸡源致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验被引量:3
- 2011年
- 从周口地区鸡场无菌采集临床上疑似大肠杆菌病的116只病死鸡的心、肝、脾、肾,进行病原菌的分离、生化鉴定、动物试验和药敏试验,共分离出76株大肠杆菌,其中有44株能使小白鼠和雏鸡发病死亡,但各菌株之间毒力存在明显差异.经O因子血清型试验,确定56株大肠杆菌分属6个血清型,分别为O1,O2,O20,O45,O78,O138,其中O1,O2,O45,O78为主要血清型,占定型菌株的73.7%,另有11株未能定型.药敏试验结果表明,所分离的76株大肠杆菌对头孢曲松、庆大霉素、丁胺卡那霉素、环丙沙星较敏感,高敏菌株达78.9%-86.8%.因此在使用药物治疗大肠杆菌病时,应根据药敏试验结果,选择敏感药物,且应注意交替用药,按疗程投药.
- 刘远升徐萍刘丽艳祝孔军
- 关键词:大肠杆菌血清型药敏试验
- 牛源CCL28基因克隆、生物学特性及mRNA表达分析
- 2021年
- 为了探究牛趋化因子CCL28基因编码蛋白的生物学特性及其mRNA在奶牛不同器官中的表达水平,试验采用PCR方法扩增并克隆奶牛CCL28基因CDS全长序列;通过生物信息学软件对其编码蛋白进行分析并构建系统进化树;应用实时荧光定量PCR方法检测CCL28基因mRNA在奶牛不同器官中的表达情况。结果表明:CCL28基因编码蛋白是一种结构较不稳定、带正电的亲水性蛋白,由129个氨基酸组成;牛CCL28基因核苷酸序列与绵羊的同源性较高,达到94.3%,与绵羊的遗传距离较近;CCL28蛋白的二级结构主要由无规则卷曲和α-螺旋构成,主要存在于细胞外,可能与CCR10、CCR3、ACKR2等蛋白存在互作关系;平均信号肽分值为0.901,没有跨膜结构域;CCL28基因mRNA在奶牛多个器官中均有表达,其中乳腺中的表达量极显著高于其他器官(P<0.01),肝脏和肾脏次之。说明CCL28基因可能在乳腺组织免疫过程中发挥调控作用。
- 姚竞杰徐萍陈伶慧申祥白跃宇王三虎王三虎
- 关键词:克隆生物信息学分析
- 金银花不同器官提取液抗鸡新城疫病毒效果研究被引量:4
- 2019年
- 为了研究金银花不同器官(花、叶、茎)提取物的抗鸡新城疫病毒效果,试验制备了金银花不同器官提取液,在给SPF鸡胚接种鸡新城疫病毒前、接种后、接种同时接种金银花不同器官提取液,收取鸡胚尿囊液测定其血凝效价。结果表明:在3种不同的加药方式中,金银花不同器官提取液均能有效降低新城疫病毒感染鸡胚尿囊液的血凝效价,且作用效果与提取液浓度呈正相关。金银花不同器官提取液的抑制效果为:花>茎>叶。说明金银花不同器官的提取液均能够抑制新城疫病毒在鸡胚尿囊液中的增殖,其抑制效果与金银花的不同器官提取液加药方式和浓度有关。
- 徐萍徐萍王三虎王三虎李任峰郑玉姝赵坤
- 关键词:新城疫病毒金银花不同器官抗病毒
- FOXL2基因的研究进展被引量:2
- 2015年
- FOXL2基因(wingedhelixforkheadtranscriptionfactorgene2,FOXL2)是近年来发现的一种转录因子,属于翼状螺旋/叉头转录因子超家族成员,其在眼睑、胚胎及成体卵巢颗粒细胞中呈现特异性表达,与性别决定、卵巢早衰、不孕不育、肿瘤及小眼睑裂综合征等相关。翼状螺旋/叉头转录因子家族是一种转录调节核蛋白,内含一个特定的forkheadDNA结合域,
- 刘静韩丽李任峰鲁毅徐萍陈玲丽勾肖晶闫艺婷杨猛王三虎
- 关键词:卵巢颗粒细胞DNA结合域特异性表达性别决定转录调节超家族
- FOXL2与脊椎动物性别决定研究进展被引量:2
- 2012年
- FOXL2是最早影响脊椎动物卵巢分化的转录因子,其与芳香化酶及SOX9基因相互作用,在脊椎动物的性别决定方面有很大影响。为此,阐述了FOXL2的结构及其生物学功能,并着重介绍了FOXL2与脊椎动物性别决定关系的最新研究进展。
- 鲁毅李任峰徐萍李学斌刘卫王三虎
- 关键词:脊椎动物芳香化酶SOX9基因性别决定
- 一种鸡新城疫弱毒株及其在制备鸡新城疫油乳剂灭活疫苗的应用
- 一种鸡新城疫弱毒株及其在制备鸡新城疫油乳剂灭活疫苗的应用,本发明的目的是提供一种低致病力的鸡新城疫病毒,该病毒具有免疫原性好,安全的特性。本发明的技术方案是,一种鸡新城疫弱毒株,藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物...
- 赵坤徐小博徐萍刘明成王丽荣王元元李任峰
- 文献传递
- 奶牛CCL11基因启动子、外显子的扩增及多态性分析
- 2021年
- 为了探讨CCL11基因启动子和外显子的多态性,试验采集88头中国荷斯坦奶牛的血液样品,通过PCR技术扩增了中国荷斯坦奶牛CCL11基因外显子和启动子序列,同时用限制性内切酶酶切的方法检测了中国荷斯坦奶牛CCL11基因外显子的多态性,酶切产物经琼脂糖凝胶电泳判断突变位点的基因型,通过ESEfinder 3.0在线软件预测差异位点基因序列可能存在的ESE基序,利用Expasy-Translate tool在线翻译软件将基因测序结果翻译成氨基酸序列。结果表明:试验成功扩增出中国荷斯坦奶牛CCL11基因启动子序列,第1段长度为794 bp,第2段长度为1060 bp,经测序未检测出多态位点,3个外显子序列长度分别为524,539,1130 bp,其中第2,3外显子经测序未检测出多态位点。在第1外显子80 bp处存在一个T>G的突变,且突变导致氨基酸序列由缬氨酸变为甘氨酸,为有义突变,突变与ESE基序之间存在着较强的相关性。CCL11基因有TT(野生型)、TG(杂合型)、GG(突变型)3种基因型,基因型频率分别为17.05%、75.00%和7.95%。说明奶牛CCL11基因的突变可能与奶牛乳腺炎的发生相关。
- 徐萍徐萍冯玉祥FOTINATetiana王三虎王三虎
- 关键词:奶牛乳腺炎启动子外显子多态性分析
- 来航鸡FOXL2基因的克隆与原核表达被引量:3
- 2013年
- 根据GenBank已发表的红色原鸡FOXL2基因序列(登录号NM_001012612.1)设计引物,以来航鸡全血为模板,PCR扩增出其基因全长编码区,经BamHⅠ-HindⅢ双酶切后定向克隆于pET28a原核表达载体,获得pET28a-FOXL2重组原核表达载体。将携带有重组原核表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)通过0.5mmol/L IPTG进行诱导表达,经过SDS-PAGE电泳检测,显示诱导表达蛋白大小大约为37 000,与预期表达蛋白大小一致。Western blot-ting检测显示该蛋白为His融合蛋白,表明重组原核表达载体在大肠杆菌中成功表达出了目的融合蛋白。为进一步探索该基因的生物学功能奠定了基础。
- 徐萍李任峰赵坤鲁毅王三虎
- 关键词:来航鸡克隆原核表达
- 来航鸡FOXL2蛋白单克隆抗体的制备
- 2013年
- 目的:制备来航鸡FOXL2蛋白的单克隆抗体。方法:利用生物信息学的方法分别预测来航鸡FOXL2蛋白最有可能的线性表位,并人工合成多肽,高效液相色谱分析其纯度,与KLH偶联后免疫小鼠制备其单克隆抗体,用间接ELISA方法和免疫印迹进行筛选,然后对筛选出来的细胞株进行一般性质测定、亲和常数测定、IC50测定。结果:合成多肽纯度>95%,细胞融合后,其平均融合率为75%,并用间接ELISA方法和Western blot筛选出1条可与FOXL2蛋白发生明显反应的细胞株C2;经测定,C2细胞株上清效价为1/128,腹水效价为1/256,其亚型属于IgG1,杂交瘤细胞染色体为102条,腹水单抗的蛋白含量为1.576 g/L,其亲和常数为2.12×106L/mol,IC50值为0.082 47μg/L。结论:成功制备了FOXL2蛋白单克隆抗体,为下一步深入研究FOXL2蛋白奠定基础。
- 鲁毅徐萍李任峰李超英李学斌王三虎陈明艳刘卫邓佳霖
- 关键词:来航鸡FOXL2单克隆抗体表位
- 来航鸡FOXL2基因的真核表达及纯化
- 2016年
- 【目的】对来航鸡FOXL2基因进行真核表达及纯化,为其生物学功能研究奠定基础。【方法】根据GenBank已发表的来航鸡FOXL2基因序列(GenBank登录号:JF_708868.1)设计引物,以来航鸡全血DNA为模板,PCR扩增FOXL2基因,经EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切后定向克隆于pPICZαA中,获得pPICZαA-FOXL2真核表达载体。将pPICZαA-FOXL2转化毕赤酵母菌GS115,用甲醇进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting检测。【结果】克隆了918bp的FOXL2基因;成功构建了pPICZαA-FOXL2真核表达载体;实现了FOXL2基因在毕赤酵母菌GS115中的融合表达,获得了分子质量约为37ku的重组蛋白FOXL2,经Western blotting检测其具有较好的生物学活性。【结论】成功地在毕赤酵母中表达了来航鸡FOXL2基因。
- 刘静韩丽李任峰徐萍鲁毅杨猛王三虎
- 关键词:来航鸡真核表达