古彦铮
- 作品数：44 被引量：85H指数：6
- 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金苏州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 可诱导共刺激分子与程序性死亡-1在重症肌无力患者外周血表达的研究被引量：6
- 2018年
- 目的 检测重症肌无力（myasthenia gravis, MG）早期患者外周血中正性共刺激分子可诱导共刺激分子（inducible costimulator, ICOS）与负性共刺激分子程序性死亡－1（programmed death 1, PD－1）的表达，并探讨其临床意义。方法 分别收集2014年2月到2016年12月间在苏州大学附属第一医院就诊且确诊为MG患者82例外周血标本，作为试验组，同时收集20例非MG患者的其他免疫病患者（non－myasthenia gravis, NMG）及健康体检者56名的外周血标本作为对照组。应用免疫荧光标记、流式细胞术检测3组成员外周血单个核细胞膜上PD－1、ICOS及相应配体程序性死亡－1配体（PD－L1）、可诱导共刺激分子配体（ICOSL）的表达；同时收集2组患者及健康对照组血清，应用酶联免疫吸附法检测3组成员血清中可溶性PD－1（sPD－1）、可溶性PD－L1（sPD－L1）和细胞因子IL－4等的含量并进行统计学分析。结果 （1）流式分析结果：MG组CD4＋T细胞上ICOS＋亚群[57.29%（57.32%）]较健康对照组[15.6%（14.23%），Z＝－6.560，P〈0.05]及NMG组[23.4%（8.48%），Z＝－3.645，P〈0.05]显著增高，CD14＋单核细胞上和CD19＋B细胞上ICOSL＋亚群较健康对照组和NMG组表达增高。MG组CD4＋T细胞上PD－1＋亚群[16.82%（10.66%）]较健康对照组[9.34%（9.18%）, Z＝－4.345，P〈0.05]及NMG组[7.07%（3.40%）, Z＝－4.594，P〈0.05]表达增高，CD14＋单核细胞和CD19＋B细胞上PD－L1＋亚群较健康对照组及NMG组明显升高。MG患者外周血CD4＋T上PD－1与ICOS的共表达[9.64%（8.82%）]较健康对照组[1.81%（2.10%）, Z＝－7.389，P〈0.05]及NMG组[2.86%（1.49%）, Z＝－4.636，P〈0.05]上调。（2）EILSA检测结果：MG组血清中sPD－1[（1.87±0.64） ng/ml]明显高于健康对照组[（1.49±0.70） ng/ml, t＝2.04, P〈0.05]及NMG组[（1.05±0.5） ng/ml, t＝2.08, P〈0.05]；MG组血清中sPD－L1与健康对照组及NMG组差异无统�
- 王彩琴应鸣翘薛群古彦铮段晓宇高晗清王明元汲晓沛严晓铭方琪董万利张学光
- 关键词：重症肌无力细胞因子类流式细胞术可诱导共刺激分子
- 一种CD40联合PD-L1及细胞因子扩增PBMC的方法
- 本发明公开了一种CD40联合PD‑L1及细胞因子扩增PBMC的方法，步骤如下：1）取正常人外周血，与PBS混合稀释后进行Ficoll密度梯度离心；2）离心结束后，得到4层液体；用移液管吸取中间云雾层细胞，用10倍体积的P...
- 古彦铮张学光黄子逸刘翠平
- 文献传递
- 两种白细胞滤器获取单个核细胞作为实验研究的生物学功能的比较
- 2019年
- 目的:分析单采血小板去白细胞滤器(apheresis platelet leukoreduction system chambers, LRSCs)和全血去白细胞滤器(whole blood leukoreduction filters, LRFs)所收集的白细胞替代常规人全血白细胞进行实验的相关生物学功能和表型。方法:分别采用直接法和反冲洗获得LRSCs和LRFs白细胞,经人的淋巴细胞分离液进行密度梯度离心,分离出外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)。用CD3激发型抗体和细胞因子白细胞介素2(interleukin, IL-2)体外扩增培养10 d,观察细胞形态、细胞增殖、细胞凋亡,并用流式细胞术(flow cytometry, FCM)进行表型分析,对比两种滤器分离出的白细胞生物学差异。结果:(1)PBMCs镜下观察:LRSCs中细胞较纯,个体大小较均一;LRFs包含部分形态较小的血小板和形态较大的粒细胞。两者细胞活力无差异。(2)LRSCs所分离的PBMCs细胞亚群以淋巴细胞为主,单核细胞次之,含极少量的粒细胞;而LRFs淋巴细胞与粒细胞比例接近,单核细胞较少。初始状态淋巴细胞群体中各细胞亚群表型相似。(3)LRSCsPBMCs细胞,经CD3与IL-2体外刺激后,细胞活化集落大且较均一,而LRFs-PBMCs细胞集落多但分布较散。(4)体外培养第6天、第10天两组滤器间淋巴细胞各亚群表型差异无统计学意义。(5)两种滤器血PBMCs细胞凋亡率类似,且均为早期凋亡细胞比例高于晚期凋亡细胞。(6)经体外扩增培养10d,发现两种滤器血PBMCs细胞增殖速率相当,细胞活力等同。结论:两种滤器所得的白细胞均可用于相关的基础实验研究,且LRFs含有较多的粒细胞,这也为粒细胞的研究工作提供了便利,解决了临床用血与实验用血的需求。
- 汤龙海何红红黄子逸曹维娟邱香李维洁古彦铮王明元
- 关键词：外周血单个核细胞
- 重症肌无力患者血清AchR抗体和Titin抗体检测的临床意义被引量：4
- 2009年
- 目的探讨重症肌无力患者血清AchR抗体和Titin抗体检测的临床意义。方法应用ELISA法分别检测18例重症肌无力合并胸腺瘤患者、23例非胸腺瘤重症肌无力患者、21例其他神经系统疾病患者以及26例健康献血者血清AchR抗体和Titin抗体水平。结果MG组血清AchR抗体、Titin抗体的阳性率均明显高于OND及HC两组(P<0.01),其中MGT组与NTMG组的阳性率比较差异有显著性(P<0.01);MG患者中全身型与眼肌型的两种抗体阳性率比较均差异有显著性(P<0.01);MGT组两种抗体具有显著相关性(P<0.05);两种抗体阳性率与性别均无关(P>0.05)。结论AchR抗体及Titin抗体检测可作为MG诊断的参考指标,尤其Titin抗体对合并胸腺瘤患者可能具有重要临床意义,与胸腺CT联合运用可显著提高重症肌无力合并胸腺瘤的诊断率。
- 冉娟娟古彦铮薛群王达鹏方琪
- 关键词：重症肌无力TITIN抗体
- 人羊水干细胞对B淋巴细胞免疫调节的初步研究
- 目的：探讨人羊水干细胞(hAFSCs)对B淋巴细胞增殖、分化、成熟等的免疫调节作用。方法：采用贴壁法分离培养羊水干细胞,并用流式细胞法鉴定hAFSCs,并检测羊水干细胞与B淋巴细胞混合培养后对B淋巴细胞活化、增殖、凋亡和...
- 尹周古彦铮梁含思王明元王彩琴李小平董万利方琪张学光薛群
- 关键词：B淋巴细胞免疫调节
- 可诱导共刺激分子/可诱导共刺激分子配体在视神经脊髓炎谱系疾病患者外周血中的表达意义被引量：2
- 2017年
- 目的 检测视神经脊髓炎谱系疾病（NMOSD）患者外周血中T细胞可诱导共刺激分子（ICOS）的表达情况,并探讨其临床意义.方法 分别收集2015年4月至2016年4月就诊于苏州大学附属第一医院的13例NMOSD患者、13例长节段/横贯性脊髓炎（LETM）患者、13例视神经炎患者（发病早期）及16名健康成年人的外周血标本,采用流式细胞术检测外周血单个核细胞膜表面ICOS及可诱导共刺激分子配体（ICOSL）的表达情况,同时收集3组患者及健康对照组血清,应用酶联免疫吸附法检测4组血清可溶性ICOS （sICOS）含量并进行统计学分析.结果 NMOSD发病早期患者外周血T淋巴细胞表面ICOS表达（26.37％±3.48％）明显高于健康对照组（0.95％±0.32％,t=7.31,P＜0.01）及另外两组患者（LETM 8.04％±2.14％,视神经炎10.51％ ±2.05％,t =4.50、3.93,均P＜0.01）,而血清中sICOS表达[（10.65±2.86） pg/ml]则明显低于健康对照组[（22.69±4.14） pg/ml,=3.39,P＜0.01]及另两组患者[LETM （29.31±8.52） pg/ml,视神经炎（21.71±4.14） pg/ml,t=2.82、3.13,均P＜0.01],差异具有统计学意义.结论 ICOS/ICOSL通路在NMOSD病理过程较早阶段发挥作用,是免疫应答的一个重要途径.
- 李小平古彦铮王明元王彩琴段晓宇高晗清董万利方琪薛群
- 关键词：视神经脊髓炎自身免疫疾病
- IL-33增强体外培养的外周血单个核细胞细胞因子的分泌以及杀伤功能
- 2015年
- 目的探讨白细胞介素33(IL-33)是否能在体外增强外周血单个核细胞(PBMC)分泌细胞因子和杀伤功能。方法常规分离培养健康人PBMC,分别经CD3单克隆抗体(m Ab)/CD28mAb/IL-2、CD3mAb/CD28mAb/IL-2/IL-12、CD3mAb/CD28m Ab/IL-2/IL-12/IL-33三种组合刺激培养72 h,收集细胞。经实时定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞γ干扰素(IFN-γ)、颗粒酶B(granzyme B)mRNA的水平;CCK-8法检测各组细胞对A549人肺腺癌细胞的杀伤活性;采用流式细胞术分析各组细胞IFN-γ、程序性死亡蛋白1(PD-1)的水平。结果各组因子组合刺激的PBMC,形态无明显差异;qRT-PCR检测发现,IL-33刺激组的PBMC中IFN-γ、granzyme B mRNA的水平升高;IL-33刺激组的PBMC对A549的杀伤能力更强;IL-33刺激组的PBMC中CD3+CD8+细胞亚群IFN-γ的水平升高、PD-1的水平降低。结论 IL-33能够在体外增强PBMC的效应功能。
- 李晓晨吕全省夏瑞古彦铮高腾飞虞培娟张学光朱一蓓
- 关键词：外周血单个核细胞Γ干扰素肿瘤免疫
- 人骨髓间充质干细胞诱导成软骨细胞过程中免疫原性改变的实验研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨人骨髓来源间充质干细胞(BMSCs)诱导分化成软骨细胞过程中协同刺激分子的表达及其对细胞免疫原性改变的影响。方法用密度梯度离心法分离骨髓,体外培养BMSCs,经形态学观察、流式细胞仪鉴定后诱导成软骨样细胞,用流式检测细胞表面协同刺激分子的表达情况;将未分化的BMSCs及诱导后的成软骨样细胞分别与T细胞共培养,采用3H-TdR法检测T细胞的增殖情况。结果人BMSCs不表达或低表达协同刺激分子CD28、CD80、CD83、CD86,抑制T细胞增殖;而诱导后的成软骨细胞上调表达CD28、CD80、CD83、CD86,并促进T细胞增殖。结论人BMSCs对T细胞增殖有抑制作用;而诱导后的成软骨细胞免疫原性增强,促进T细胞增殖。
- 古彦铮蔡燕倪莉黄晨杨惠林张学光施勤
- 关键词：间充质干细胞协同刺激分子成软骨细胞免疫原性
- CD40信号联合细胞因子体外制备过继免疫治疗细胞的实验研究被引量：1
- 2014年
- 目的:探索一种新的过继免疫治疗细胞体外培养的方法。方法:从正常人外周血分离单个核细胞(PBMCs),经过CD40激发型单抗5C11、细胞因子IFN-α、IL-7、IL-2(CD40激发组)诱导并扩增,光镜下观察其细胞形态及计数,进行动态增殖观察,并在第9天收集细胞,对其淋巴细胞亚群、NKT细胞和调节性T细胞(Treg)的比例进行分析,同时与常规CIK细胞(CD3激发组)进行比较性分析。结果:两组培养细胞中CD4+/CD8+细胞的比例无明显差异;但CD3激发组中的Treg数量和比例远高于CD40激发组,而CD3+CD56+的NKT细胞低于CD40激发组,同时,CD40激发组出现了一群单核-NK-DC(Mo-NKDC)样细胞。结论:本实验所建立的新型过继免疫治疗细胞培养方法能提高具有肿瘤杀伤能力的NKT细胞的比例,同时显著减少Treg的数量,有望为肿瘤细胞过继免疫治疗开拓新的方案。
- 高腾飞古彦铮徐俊驰沈宇李晓晨朱一蓓张学光
- 关键词：IFN-ΑIL-7
- CXCR4小干扰RNA对小细胞肺癌细胞NCI-H446侵袭力的影响
- 2017年
- 目的 研究CXCR4-siRNA对小细胞肺癌细胞NCI-H446体外侵袭力的影响.方法 根据siRNA的设计原则化学合成CXCR4特异性siRNA,用脂质体转染NCI-H446细胞,采用RT-PCR法及Western Blot法检测CXCR4 mRNA及蛋白水平的变化.用Transwell小室模型检测转染后细胞体外侵袭能力的变化,CCK-8法检测转染后细胞增殖能力的变化.结果 转染CXCR4-siRNA后,CXCR4 mRNA和蛋白表达水平明显下降,细胞体外侵袭能力明显减弱,CXCR4-siRNA转染组趋化侵袭实验穿膜细胞数（32.3±3.8）较空脂质体转染组（62.1±8.2）明显减少（P〈0.001）,CXCR4-siRNA对NCI-H446细胞增殖无影响.结论 特异的siRNA能够有效下调CXCR4基因,降低小细胞肺癌细胞的体外侵袭能力.
- 陈涛古彦铮黄建安
- 关键词：小细胞肺癌CXCR4小干扰RNA
