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黑色素皮质素受体激动剂的高通量筛选模型研究被引量：3: 2004年; 为了建立黑色素皮质素受体 (MC4R)激动剂的高通量筛选方法 ,将人的MC4R基因质粒 (hMC4R/pCDNA3 1 )与报告基因质粒 (3×CRE/3×MRE/SRE LUC)按 1∶5的比例共转染到HEK2 93细胞 ,通过G4 1 8筛选 ,建立了稳定的MC4R激动剂筛选细胞株 .利用MC4R内源激动剂α MSH探索和优化了每孔接种细胞数目、激动剂孵育时间、溶剂DMSO终浓度、荧光素酶底物浓度等筛选条件 ,建立了可靠的筛选方法 .实验表明 :当细胞数目为 4× 1 0 4个 /孔 ,激动剂孵育时间为 8h ,每孔DMSO终浓度小于 1 %和α MSH终浓度为 1 μmol/L时 ,系统Z 因子接近 0 7。; 郑旭煦欧阳克清高虹许治良胡应和蔡绍皙; 关键词：报告基因激动剂高通量筛选

多巴胺系统影响小鼠共情行为作用初探: 共情(Empathy)是指对他人情绪(或体验)的感知、体验和情绪反应；其主要特征包含：共情个体的情绪是通过观察或者模仿他人的情绪而产生；共情个体能够意识到自己当前情绪的产生原因在于他人而非自身。以往的研究观点认为，共情是...; 曹灏高虹梅兵李斐

G-蛋白偶联受体的功能测定和高通量药物筛选被引量：15: 2003年; G 蛋白偶联受体家族是药物开发中最大的一类药物靶点 ,高通量药物筛选是开发药物早期阶段的最重要工具之一。根据G 蛋白偶联受体与配体结合及激发的信号通路 ,人们设计了各种可行的功能测试方法 ,用于G 蛋白偶联受体为药靶的高通量药物筛选 ,如 :微体积荧光数字图像测定技术 (Fluorometicmicrovolumeassaytechnology ,FMAT)、荧光偏振 (Fluoresencepolarization ,FP)、竞争性ELISA (Com petitiveenzyme linkedimmunosorbent)、闪烁邻近测定法(Scintillation proximityassay ,SPA)、载黑色素细胞测定法(Melanophoreassay)、报告基因测定法 (Reportergeneassay)和钙离子测定法等测定方法。在这些方法中 ,报告基因测定法和钙离子测定法占了主导地位。非放射性、无需底物和辅助剂的报告基因测定方法和荧光钙离子指示剂的钙离子测定方法可能是将来G; 许治良高虹欧阳克清郑旭煦蔡昭皙胡应和; 关键词：高通量药物筛选 G-蛋白偶联受体

突变型hIL-2在Pichia pastoris中直接诱导表达条件研究: 2003年; 为了简化突变型白细胞介素 - 2 (mutantvarianthumaninterleukin - 2 ,MvIL - 2 )在毕赤酵母中的表达工艺 ,作者参照传统方法 ,设计了一种新的表达方法 -直接诱导法。在该实验中 ,在摇瓶条件下 ,对OD6 0 0 、诱导时间这两个重要的参数进行了重点研究 ,并对表达蛋白的抗原性和生物学活性进行鉴定。结果表明 :在pH6 0、温度 30℃、转速 2 80r min的条件下进行培养 ,菌体密度(OD6 0 0 )达到 4 0时直接在发酵液中加入 1%的甲醇进行诱导表达 ,间隔 2 4h补充同上浓度的甲醇 ,96h收集发酵液。以相同体积的培养基最后获得的总目的蛋白来比较 ,直接诱导法的产量是传统诱导法产量的 5倍。Westernblot的抗原性检测和MTT生物学活性实验证明表达的蛋白是特异性蛋白。MTT法测得突变型IL - 2具有 4倍于同样在毕赤酵母中表达的天然IL -; 郭芝刚欧阳克清杨红高虹李新平陈云高蔡绍皙; 关键词：毕赤酵母

Xanomeline新型衍生物SBG-PK-014促进APPsw的α-剪切: 2014年; 研究了xanomeline新型衍生物SBG-PK-014对毒蕈碱型M1乙酰胆碱受体的激活能力以及对APP基因瑞典型突变体(APPsw)的α-剪切的作用.利用M1激动剂筛选细胞模型检测了SBG-PK-014的EC_(50)和最大响应倍数(FA_(max)),并在小鼠神经母细胞瘤N2a细胞中同时过表达APPsW和M1受体分析了该化合物和xanomeline对sAPPα分泌的影响.结果显示,SBG-PK-014的EC_(50)(40.2 nmol/L)与xanomeline(28.4 nmol/L)接近,但FA_(max)是xanomeline的3.5倍.SBG-PK-014通过激活M1受体促进APPsW的α-剪切,且在0.1μmol/L和1μmol/L的浓度下,其效果显著强于同剂量的xanomeline.可见,SBG-PK-014比xanomeline更能有效地激活M1受体,还能促进APPsW的α-剪切和神经保护性sAPPα的生成,在调节阿尔茨海默病的Aβ病理途径上可能有一定潜力,值得进一步研究.; 王栋周宗丽高虹雷小平董素珍胡金锋; 关键词：XANOMELINE 阿尔茨海默病衰老

思维可视化在小学英语阅读教学中的应用研究: 随着我国教育改革的持续深化,发展学生的思维品质已经成为教育改革的一个重点。在这一过程中,英语教学也承担着培养学生思维能力的重任,阅读作为小学英语教学中重要的一部分,也是展示学生思维路径,推动学生思维品质发展的有力武器。思...; 高虹; 关键词：小学英语阅读教学

毒蕈胆碱M_1受体激动剂的高通量筛选模型被引量：15: 2003年; 目的　建立毒蕈碱样胆碱M1 受体激动剂的高通量筛选模型 ,以此模型进行M1 受体激动剂筛选。方法　将M1 受体基因质粒 (M1 /pCDNA3 1 )与报告基因质粒 (3×CRE/ 3×MRE/SRE LUC)按 1∶5的比例共转染HEK2 93 ,建立了一个稳定的M1 受体激动剂报告基因筛选细胞株。配体与细胞表面M1 受体结合后 ,激活相应的信号通路 ,调节报告基因的表达 ,通过测定荧光酶素报告基因表达水平的变化 ,评估配体激活M1 受体的生物活性。结果　通过对筛选条件 ,如细胞数目、荧光素酶表达时间、底物浓度的优化 ,建立了可靠的筛选方法 ,并对多种抗衰老中药水提物进行了筛选 ,找到 3种对M1 受体有活性的中药。结论　该系统能准确、稳定、有效地应用于M1; 高虹欧阳克清郑旭煦许治良胡应和蔡绍皙; 关键词：M1受体报告基因激动剂高通量药物筛选

神经介素NMU2R受体激动剂的高通量筛选模型研究被引量：8: 2004年; 目的　建立神经介素NeuromedinU 2Receptor(NMU2R)激动剂的高通量筛选模型 ,从中药中筛选NMU2R受体激动剂。方法　将人NMU2R受体基因质粒 (hNMU2R/pCDNA3 1)与报告基因质粒 (MRE/CRE/LUC)按 1∶5的比例共转染到HEK2 93细胞 ,通过G4 18筛选 ,建立稳定的hNMU2R受体激动剂筛选细胞株。利用CRE的激活剂Forskolin和NMU2R内源激动剂NeuromedinU探索和优化荧光素酶表达时间、每孔细胞数目、荧光素酶底物浓度等筛选条件 ,建立可靠的筛选方法 ,并对部分中药水提液进行筛选。结果　已建立了一个稳定的hNMU2R受体激动剂筛选细胞株和可靠的筛选方法 ,其Z′ 因子为 0 75 ,荧光素酶表达时间为 6～ 8h ,细胞密度为每孔 4× 10 4～ 8× 10 4个。结论　该系统能够有效地应用于NMU2R受体激动剂的高通量筛选 ,能从中药中筛选出NMU2R受体的激动剂。; 郑旭煦欧阳克清高虹许治良胡应和蔡绍皙; 关键词：受体激动剂高通量筛选模型中药

用毒蕈胆碱M1受体激动剂筛选技术发现的泽泻的新用途: 本发明涉及泽泻在制备治疗老年痴呆症药中的应用，尤其是泽泻在制备毒蕈胆碱M1受体激动剂中的应用，属于分子药理学技术领域。本发明采用毒蕈胆碱M1受体激动剂的筛选技术，构建得到含有毒蕈胆碱M1受体、响应元件和报告基因的细胞株和...; 高虹胡应和; 文献传递

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高虹