陈元文
- 作品数：19 被引量：45H指数：4
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- 基底样型乳腺癌肿瘤干/祖细胞的长时程无血清培养
- 2017年
- 背景:乳腺癌干细胞是乳腺癌细胞中的亚群,具有类似干细胞的自我更新和多系分化潜能,具有放化疗和缺氧抵抗性、高致瘤性和高侵袭转移性等特征,在乳腺癌的发生发展以及复发转移中发挥重要作用。乳腺癌干细胞学说在一定程度上阐明了乳腺癌的发病机制,在治疗方案选择、新的治疗靶点的发现和乳腺癌预后的判断等方面有很大的应用价值。目的:从基底样型乳腺癌组织中分离培养肿瘤干/祖细胞,并通过无血清悬浮技术长时程培养,研究其自我更新能力、分化潜能和细胞表型等生物学特性。方法:20例基底样型乳腺癌患者,其中10例患者未经过任何治疗,另外10例患者术前均行新辅助化疗(≥4周期),术前于肿瘤边缘切取1 cm3新鲜肿瘤组织,立即送实验室,经机械分离后获取肿瘤细胞。应用无血清悬浮培养技术富集乳腺癌干/祖细胞微球体后,通过单克隆实验检测乳腺癌干/祖细胞微球体细胞的克隆形成和自我更新能力,在添加血清的培养液中诱导乳腺癌干/祖细胞微球体细胞分化,观察其分化能力。通过流式细胞术检测CD44^+/CD24^-和ALDH1^+表型细胞的比例。结果与结论:(1)在含生长因子的无血清培养基中,未行新辅助化疗的基底样型乳腺癌细胞均可生成乳腺癌干/祖细胞微球体,而大部分新辅助化疗后的乳腺癌组织中可直接分离获得微球体样的细胞团;(2)乳腺癌干/祖细胞微球体细胞可连续传代形成新生的乳腺癌干/祖细胞微球体,随着培养传代次数的增加,贴壁细胞逐渐增多,新产生的乳腺癌干/祖细胞微球体数量逐渐减少,球体直径变小,且乳腺癌干/祖细胞微球体也更加容易贴壁。乳腺癌干/祖细胞微球体细胞在添加血清的培养基中培养可贴壁分化;(3)乳腺癌干/祖细胞微球体中富集了CD44^+/CD24^-和ALDH1^+表型细胞,诱导分化后两种表型细胞的含量大幅下降或缺失;(4)大部分�
- 董华英王伟陈元文包俊杰陈鑫吴诚义
- 关键词：干细胞肿瘤干细胞分子分型新辅助化疗细胞培养
- 基底样乳腺癌与管腔A乳腺癌干/祖细胞的表型和功能研究
- 研究背景 近年来的研究表明,乳腺癌是一种高度异质的疾病,由五种在形态、基因表达谱、生物学和临床后果差异明显的分子亚型组成。随着乳腺癌肿瘤干细胞的证实,人们认识到乳腺癌的分子亚型和白血病的亚型类似,彼此间可能是细胞起源不同...
- 陈元文
- 文献传递
- 基底样乳腺癌与管腔A腺癌干/祖细胞的表型和功能研究
- 背景：近年来的研究表明，乳腺癌是一种高度异质的疾病，由五种在形态、基因表达谱、生物学和临床后果差异明显的分子亚型组成。随着乳腺癌肿瘤干细胞的证实，人们认识到乳腺癌的分子亚型和白血病的亚型类似，彼此间可能是细胞起源不同的独...
- 陈元文
- 关键词：肿瘤干细胞生物学功能细胞表型
- 不同改良吻合器痔上黏膜环切术治疗环状痔伴直肠内脱垂疗效比较被引量：4
- 2015年
- 目的对比研究吻合器痔上黏膜环切术（PPH）加直肠黏膜纵行缝扎术和双荷包PPH术2种改良PPH术式治疗环状痔伴直肠内脱垂的临床疗效。方法收集重庆市第五人民医院普外科2008年9月至2014年1月收治的67例环状痔伴直肠内脱垂患者,其中A组36例患者采用PPH加直肠黏膜纵行结扎术,B组31例采用双荷包PPH术。术后随访0.5-4.0年。结果 A组治愈率[94.44%（34/36）]显著高于B组[87.10%（27/31）],差异有统计学意义（P〈0.05）。B组患者术中出血、术后疼痛、尿潴留、吻合口裂开发生率均明显高于A组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。术后随访,67例患者均有效,61例症状完全缓解,A组2例、B组4例仍有症状,但较术前明显减轻。结论对于治疗环状痔伴直肠内脱垂,PPH加直肠黏膜纵行结扎术较双荷包PPH术具有疗效可靠、操作简单、并发症少等优点。
- 陈元文涂经楷肖明盛张胜本
- 关键词：直肠脱垂黏膜
- 乳腺癌新辅助化疗后的癌干细胞分离培养被引量：11
- 2010年
- 目的从不同周期新辅助化疗后的乳腺癌组织中分离培养乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs),观察其体外增殖和分化特性,研究新辅助化疗对BCSCs分离培养的影响。方法在添加生长因子的无血清培养基(serumfree media,SFM)中悬浮培养细胞获得富含BCSCs的微球体(mammospheres,MSs),通过克隆形成实验研究微球体细胞(mammospheres-derived cells,MSDCs)的自我更新能力;在添加5%胎牛血清的培养基中培养MSDCs诱导其分化,研究其分化能力;免疫细胞化学检测ESA和Nestin在MSDCs中的表达;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测MSDCs中的AL-DH1+细胞含量。结果化疗1个周期的5例乳腺癌标本经培养均无MSs形成,化疗2个周期的6例标本经培养其中3例有MSs形成,化疗3个周期以上的9例标本中的5例可以直接分离出MSs,其余4例仅得到少量坏死的细胞和组织碎片;MSDCs在含血清的培养基中贴壁分化;MSDCs均含有ALDH1+细胞。结论从新辅助化疗后的乳腺癌组织中分离BCSCs宜选取化疗2个周期后的标本;新辅助化疗可以富集BCSCs;ALDH1+表型的BCSCs比CD44+CD24-表型的BCSCs在乳腺癌中分布更加广泛。
- 董华英吴诚义陈元文
- 关键词：乳腺肿瘤化疗肿瘤干细胞细胞分离细胞培养
- 长程无血清培养人乳腺癌细胞球的生物学特性被引量：11
- 2010年
- 目的:从人乳腺癌原代细胞中分离培养乳腺癌干/祖细胞,并通过体外连续传代培养,研究其体外增殖、分化等生物学特性。方法:应用非黏附性乳腺球(mammosphere,MS)悬浮培养法富集乳腺癌干/祖细胞后,通过连续的单克隆实验检测乳腺球细胞(mammosphere-derived cells,MSDC)的克隆形成和自我更新能力,并经血清诱导后观察其分化能力。FCM法检测CD44+/CD24-/low细胞的含量。结果:接种于含生长因子无血清培养液的原发乳腺癌标本细胞均有MS生成,内含具有干细胞特征的肿瘤细胞。随着培养中传代次数的增加,贴壁分化的细胞增多,形成的MS减少,球体变小,且更易贴壁分化。CD44+/CD24-/low细胞仅存在于基底样乳腺癌标本。来自不同标本的MS的生物学特性表现出一定差异。结论:具有自我更新、无限增殖和多向分化等干细胞样特性的肿瘤细胞在人乳腺癌组织中广泛存在,其生物学行为可能因标本来源不同有所差异,也会因环境因素的作用而改变。
- 陈元文吴诚义陈鑫汤为学董华英
- DC-CIK细胞联合^(125)I粒子组织间植入治疗中晚期肝癌的临床研究
- 2019年
- 目的探讨树突状细胞(DC)-细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)即DC-CIK细胞联合125I放射性粒子植入治疗中晚期肝癌的疗效。方法将2013年10月至2017年6月该院收治的80例中晚期肝癌患者动态随机分为联合组(A组)、^(125)I粒子组(B组)、DC-CIK组(C组)和对照组(D组),每组20例。A组行^(125)I粒子植入后即开始给予DC-CIK细胞治疗,B组仅给予粒子植入治疗,C组仅给予DC-CIK免疫细胞治疗,D组给予常规对症治疗。治疗结束后比较各组患者免疫功能、生活质量、生存率等。结果 A组患者治疗后CD3^+、CD4^+、CD16^+CD56^+、CD3^+CD56^+、CD4^+/CD8^+比值明显上升,CD8^+效应细胞比例有所下降,与治疗前及其他3组治疗后比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。A组患者中生活质量改善者明显多于其他3组,3、6、12个月生存率均明显高于其他3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 DC-CIK细胞联合125I粒子植入治疗中晚期肝癌安全、有效,对提高患者免疫功能、改善生活质量、延长生存率、提高疗效均具有重要作用。
- 吴念冯虎翼刘桦陈元文曹阳余福财
- 关键词：碘放射性同位素
- ER阳性乳腺癌和ER阴性乳腺癌的癌干/祖细胞生物学行为比较被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨ER阳性乳腺癌和ER阴性乳腺癌的癌干/祖细胞生物学行为差异。方法:通过无血清培养方法获取富含乳腺癌癌干/祖细胞的非粘附乳腺球(mammospheres,MSs):体外无血清培养微球体细胞(mammospheres-derived cells,MSDCs)并绘制生长曲线,评价ER阳性乳腺癌和ER阴性乳腺癌MSDCs的增值能力;应用无血清连续克隆形成实验,计算MSDCs的MSs形成率(mammospheres forming efficiency,MSFE),比较两种MSDCs的自我更新能力;通过添加血清的培养方法诱导MSDCs分化,绘制生长曲线,比较两种MSDCs的分化能力:构建NOD/SCID小鼠模型,比较两种MSDCs移植瘤的生长差异。结果:ER阳性乳腺癌和ER阴性乳腺癌均能培养出MSs,ER阴性乳腺癌的MSs生长速度快,直径大,包含的细胞数量多;ER阴性乳腺癌的MSDCs具有更强的体外增殖能力、自我更新能力、分化能力和免疫缺陷动物体内致瘤能力。结论:ER阳性乳腺癌和ER阴性乳腺癌的癌干/祖细胞生物学行为存在明显的差异,两种类型的乳腺癌可能起源于不同的乳腺癌干/祖细胞。
- 董华英吴诚义陈元文
- 关键词：雌激素受体肿瘤干细胞细胞
- 基底样乳腺癌与管腔A乳腺癌干/祖细胞的表型分析被引量：4
- 2014年
- 目的比较人基底样乳腺癌和管腔A乳腺癌干/祖细胞分化前后的细胞表型变化。方法应用乳腺癌细胞球无血清悬浮培养法获取乳腺癌干/祖细胞;分别以荧光免疫技术和流式细胞术检测基底样乳腺癌和管腔A乳腺癌干/祖细胞分化前后细胞角蛋白CK14、CK18、CK19和CD44、CD24的表达情况;分析原代细胞内CD44+CD24-细胞水平与克隆形成率的关系。结果基底样乳腺癌干/祖细胞表达CK19+/CK14+,不表达CK18-,经血清诱导分化后,管腔上皮标志CK18和肌上皮标志CK14呈阳性表达;管腔A乳腺癌干/祖细胞呈CK18+/CK19+/CK14-表型,诱导分化后管腔上皮标志CK18和CK19表达,而肌上皮细胞标志CK14则不表达;CD24在基底样乳腺癌表达极低或无表达,但在管腔A乳腺癌高表达。基底样乳腺癌原代细胞中水平较高的是CD44-/CD24-/Low细胞,含CD44+/CD24-/Low细胞(2.52±0.58)%,而管腔A乳腺癌CD44-/CD24+细胞所占的比例最高,但不含CD44+/CD24-/Low细胞或水平极低。结论基底样乳腺癌和管腔A乳腺癌干/祖细胞有不同的细胞表型,二者的分化能力和分化方向也不同,可能起源于不同的乳腺上皮细胞。
- 陈元文吴诚义董华英
- 关键词：乳腺癌分子亚型祖细胞无血清培养细胞表型
- 乳腺癌干细胞分选及培养的研究进展被引量：1
- 2010年
- 乳腺癌干细胞(BCSCs)的主要分选方法包括利用肿瘤干细胞的表面分子标记物及肿瘤干细胞的功能特性进行分选,培养方法主要为无血清悬浮培养法。目前BCSCs的分选方法和培养方法尚不能满足BCSCs研究的需要。本文就BCSCs的各种分选和培养方法作一综述。
- 董华英陈元文吴诚义
- 关键词：乳腺肿瘤肿瘤干细胞分选细胞表面标记
