陈佳瑜 作品数:11 被引量:35 H指数:4 供职机构: 遵义医学院 更多>> 发文基金: 贵州省社会发展科技攻关计划项目 贵州省省长基金 贵州省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
人白介素-12转基因马铃薯表达体系中hIL-12的表达 2007年 目的研究本实验室初步建立的人白介素12(hIL-12)转基因马铃薯表达体系中hIL-12的表达。方法ELISA法检测转基因马铃薯中hIL-12的表达情况。结果2株转基因马铃薯茎叶中有hIL-12的表达,与对照组相比有显著性差异(P<0.01);转基因马铃薯5~7子代中hIL-12的表达量无显著性差异。结论本实验室建立的人白介素-12转基因马铃薯表达体系能表达hIL-12,并且遗传性状相对稳定。 陈佳瑜 葛正龙关键词:马铃薯 转基因植物 转基因马铃薯中人白介素-12的生物学活性 被引量:1 2010年 目的检测转基因马铃薯体系中表达的人白介素-12(human interleukin 12,hIL-12)的肿瘤杀伤活性。方法通过ELISA法检测转基因马铃薯中hIL-12刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生IFN-γ的量以反映生物学活性,并观察hIL-12单克隆抗体对此生物活性的阻断效应;MTT法检测经转基因马铃薯中hIL-12作用的PBMC对NK敏感肿瘤细胞K562的杀伤作用,肿瘤细胞凋亡以Annexin V/PI双染后激光共聚焦显微镜观察。结果转基因马铃薯叶和块茎中表达的hIL-12与重组人白介素-12(rhIL-12)标准品在25~400 pg/ml间均能诱生IFN-γ,其中转基因马铃薯叶和块茎中hIL-12刺激PBMC产生IFN-γ的量分别为(163.34±22.17)~(12 107.10±3 996.51)pg/ml和(224.20±25.76)~(11 196.30±4 067.48)pg/ml,与野生对照组均有统计学差异(P<0.01),而hIL-12单克隆抗体能完全阻断此诱生IFN-γ效应。同时200 pg/ml转基因马铃薯叶、块茎中提取的hIL-12对人红白血病细胞K562的杀伤率分别为(28.4±8.7)%、(32.3±6.9)%,而与野生对照组(10.3±4.9)%的杀伤率相比,有统计学差异(P<0.05)。激光共聚焦显微镜观察到经转基因马铃薯表达hIL-12作用的K562细胞出现早、中、晚各期的凋亡特征。结论转基因马铃薯表达的hIL-12具有诱导PBMC产生IFN-γ及杀伤肿瘤细胞K562的生物学活性。 陈佳瑜 刘喜平 葛正龙关键词:生物活性 马铃薯 转基因植物 转基因马铃薯中人白介素-12体外诱导人肝癌细胞凋亡的研究 被引量:3 2010年 [目的]检测从人白介素-12(human interleukin12,hIL-12)转基因马铃薯中提取的hIL-12的抗肝癌效应。[方法]用MTT法检测转基因马铃薯中hIL-12对人肝癌细胞HepG22.2.15的体外杀伤作用;用AnnexinV/PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察转基因马铃薯中hIL-12对HepG22.2.15细胞的诱导凋亡作用。[结果]转基因马铃薯中表达的hIL-12与重组人白介素-12(rhIL-12)在体外对HepG22.2.15具有杀伤作用,而野生对照组无杀伤作用;AnnexinV/PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察结果表明,转基因马铃薯中表达hIL-12可诱导HepG22.2.15细胞凋亡。[结论]转基因马铃薯表达体系表达的人白介素-12具有抗肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡的作用。 陈佳瑜 许洁 葛正龙关键词:抗肿瘤作用 转基因马铃薯 HBx-siRNA下调HepG2.2.15细胞中血管内皮生长因子的表达 2014年 目的研究HBx干扰质粒pSIHBV/X对肝癌细胞HepG2.2.15中VEGF表达的影响。方法将针对HBx基因的干扰质粒载体pSIHBV/X转染HepG2.2.15细胞,用Real-time PCR检测转染前后细胞HBx、VEGF基因mRNA表达,Western blot法检测细胞VEGF蛋白表达。结果Real-time PCR检测结果显示,转染后24h、48h、72h实验组HepG2.2.15细胞中HBx基因mRNA相对表达水平分别为(121.13±8.72)、(83.17±7.930)、(56.33±6.17);24h、48h、72h实验组HepG2.2.15细胞中VEGF基因mRNA相对表达水平分别为(76.26±7.16)、(59.17±6.420)、(42.17±4.33);Western blot检测结果显示,24h、48h实验组HepG2.2.15细胞中VEGF蛋白相对表达水平分别为(0.357±0.025)、(0.218±0.051)。Western blot及RT-PCR结果显示,与对照组相比实验组中VEGF mRNA及蛋白的表达量明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论靶向HBx的siRNA干扰质粒能抑制HepG2.2.15细胞中VEGF mRNA和蛋白的表达。 李长福 庄海 陈佳瑜 范芳关键词:RNA干扰 HBX基因 血管内皮生长因子 Artemis影响人肝癌细胞BEL-7402/5-FU化疗药物敏感性的研究(英文) 被引量:1 2018年 目的探讨Artemis对人肝癌耐药细胞株BEL-7402/5-FU化疗药物敏感性的影响及其可能机制。方法将p SGU6/GFP/Neo/sh Artemis干扰质粒转染人肝癌耐药细胞BEL-7402/5-FU(sh Artemis组),通过Real-time PCR法检测P-gp基因表达水平变化;MTT法检测sh Artemis组细胞对5-氟尿嘧啶、丝裂霉素及索拉菲尼的IC50值和RI值;利用Western-blot法检测p-Artemis和ATM蛋白水平表达变化;使用ATM抑制剂KU55933联合丝裂霉素作用细胞48 h,Westernblot法观察ATM、γ-H2AX和Artemis蛋白水平表达变化。结果与对照组比较,sh Artemis组的P-gp mRNA表达水平下降(P<0.05),且对5-氟尿嘧啶、丝裂霉素和索拉菲尼的敏感性增加,IC50值和RI值均降低(P<0.05)。sh Artemis组的pArtemis与ATM蛋白表达水平降低(P<0.05);KU55933联合丝裂霉素作用细胞后,有效减少ATM蛋白的表达(P<0.05),同时γ-H2AX蛋白表达量增加(P<0.05),但Artemis蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论靶向干扰Artemis的表达能够增强细胞BEL-7402/5-FU对化疗药物的敏感性。此效应可能与Artemis作为BEL-7402/5-FU DNA损伤修复的分子开关,进而通过影响ATM参与DNA损伤修复有关。 李宇婷 张雪 范芳 李大玉 余春波 陈佳瑜 刘云 李长福关键词:ARTEMIS 化疗敏感性 肝癌 The in vitro Anti Hptocarcinoma Effects of Human Interleukin-12 from Transgenic Potato 被引量:4 2010年 [Objective]The aim was to examine the anti heptocarcinoma effects of human interleukin-12(hIL-12) from transgenic potatoes.[Method]Human heptocarcinoma cell line HepG22.2.15 was cocultured with human peripherial blood monocyte(PBMC).Human IL-12 extracted from its transgenic patatoes was introduced to this coculture system.MTT method and laser confocal microscope were then employed to evaluate its survival rates and morphological changes of HepG22.2.15 cell line.[Result]The HepG22.2.15 survival rate of the plant produced hIL-12 treated group was significantly lower than that of the wild type control,while similar to that of commercial purified recombinant hIL-12 group.As indicated by AnnexinV/PI double staining laser confocal microscope,cocultured heptocarcinoma cells showed the typical early and final phase apoptotic morphological characteristics 48 hours after 2 × 10-4 mg/L potato secreted hIL-12 treatment.[Conclusion] These results demonstrated that Heptocarcinoma HepG22.2.15 cell growth could be actively inhibited by the transgenic potato expressed hIL-12 in vitro. 陈佳瑜 许洁 葛正龙母体暴露壬基酚对仔鼠肝脏的损伤作用 被引量:11 2008年 [目的]研究母体暴露壬基酚对仔鼠肝脏的损伤。[方法]母鼠孕14 ̄19 d灌胃壬基酚(0、40、80、200mg/kg),检测F1仔鼠90 d龄肝脏GSH-PX、SOD活性及MDA含量。[结果]NP 80、200 mg/kg组肝脏GSH-PX及SOD活性明显下降;NP 200 mg/kg组MDA含量上升,病理切片见肝脏中央静脉扩张充血,肝细胞脂肪变性或灶状坏死。[结论]壬基酚可透过胎盘屏障致仔鼠肝脏脂质过氧化损伤。 许洁 李研 陈佳瑜 范奇元关键词:壬基酚 仔鼠 肝脏 人白介素-12转基因马铃薯中hIL-12的表达 被引量:7 2010年 [目的]研究人白介素-12转基因马铃薯中hIL-12的表达。[方法]采用ELISA和WesternBlot,检测转基因马铃薯中hIL-12的表达情况。[结果]转基因马铃薯叶与块茎中均能被hIL-12p70二聚体特异性的抗体识别的蛋白表达,与野生对照组相比均有0.01水平显著差异。WesternBlot分析结果显示,在40kD处有特异性的蛋白条带出现。[结论]所建立的人白介素-12转基因马铃薯表达体系能正确、有效表达hIL-12二聚体。 陈佳瑜 罗果 葛正龙关键词:马铃薯 转基因植物 从转基因马铃薯中纯化的人白细胞介素-12的生物学活性分析 被引量:3 2008年 目的研究从转人白细胞介素-12(hIL-12)基因马铃薯中纯化的hIL-12的生物学活性。方法ELISA法测定纯化的hIL-12诱使外周血单个核细胞产生IFN-γ的量。结果纯化的hIL-12在体外能刺激PBMC产生IFN-γ,而野生对照组无作用。结论本实验室从转hIL-12基因马铃薯中纯化的hIL-12具有生物学活性。 黄进 陈佳瑜 罗果 葛正龙关键词:纯化 转基因马铃薯 壬基酚对仔代脑组织AchE和ChAT活性的影响 被引量:10 2009年 目的:研究母体暴露壬基酚对仔鼠学习记忆及脑组织AchE和ChAT活性的影响。方法:母鼠孕9~15d灌胃壬基酚(0、50、100、200mg/kg),用Morris水迷宫法观察壬基酚对仔鼠学习记忆的影响;检测F1仔鼠垂体和海马组织乙酰胆碱脂酶(AchE)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)的活性。结果:与阴性对照组比较,NP200mg/kg组仔鼠水迷宫中逃避潜伏期延长,脑组织ChAT活性明显下降、AchE活性上升(P<0.05)。结论:壬基酚可透过胎盘屏障影响仔鼠学习记忆功能,机理可能与影响胆碱能神经系统功能有关。 卢宁 俞捷 许洁 陈佳瑜 张仁义 继海续关键词:壬基酚 仔鼠 神经毒性