郑葵阳
- 作品数：147 被引量：392H指数：9
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- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省高等教育教改立项研究课题更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- p38MAPK抑制剂对小鼠急性移植物抗宿主病的发生及小肠损伤的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨p38丝裂原激活的蛋白激酶（p38MAPK）抑制剂SB203580对小鼠异基因骨髓造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病（aGVHD）的发生及小肠损伤的影响。方法用60只BALB／c小鼠作为受鼠，分为正常对照组、单纯照射组、模型组和干预组，每组15只。单纯照射组、模型组和干预组小鼠均接受7．5Gyy射线全身照射。C57BL／6小鼠作为供鼠，取其骨髓细胞及脾细胞经尾静脉输注给接受照射后的受鼠，建立小鼠aGVHD模型。干预组为aGVHD模型小鼠给予SB203580干预，末次给药48h后处死。模型组小鼠为aGVHD模型仅给予等量二甲基亚砜。移植后观察小鼠的一般状态和生存情况。移植后10d取各组小鼠小肠组织，采用RT-PCR、Westernblot及免疫组化方法检测磷酸化p38MAPK、Fas、FasL的表达。结果干预组小鼠的体重下降程度为（13．00±0．50）％，轻于模型组的（25．00±0．75）％，差异有统计学意义（P〈0．05）；干预组小鼠的aGVHD的临床评分（3．33±0．82）低于模型组（6．33±1．36），差异有统计学意义（P〈0．05）；干预组小鼠的小肠组织中磷酸化p38MAPK、Fas、FasL的相对表达水平分别为1．43±0．02、0．81±0．03、0．97±0．03，均显著低于模型组的1．76±0．05、1．52±0．04、1．48±0．04。结论SB203580可抑制aGVHD小鼠小肠组织中p38MAPK通路的活化，减少Fas和FasL信号通路所引起的细胞凋亡，有效减轻aGVHD的发生及靶器官小肠的损害。
- 张翠平李小翠汤仁仙李向阳郑葵阳曾令宇
- 关键词：移植物抗宿主病小肠FAS配体
- 抗华支睾吸虫成虫抗原McAb制备及功能鉴定的研究
- 2012年
- 目的利用杂交瘤技术建立分泌抗华支睾吸虫成虫抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株并对其分泌抗体的免疫学活性进行初步鉴定。方法以华支睾吸虫成虫抗原免疫BALB／c小鼠，取其脾细胞与Sp2／0骨髓瘤细胞进行融合，筛选分泌高滴度单克隆抗体的杂交瘤细胞株，采用动物体内诱生的方法制备单克隆抗体并对其纯化，测定所制备单抗效价和其免疫球蛋白亚类，检测单抗与猪囊尾蚴、弓形虫、疟原虫和日本血吸虫抗原的交叉反应，观测单抗对虫体的识别部位和其与感染小鼠肝脏组织中抗原的结合情况。结果获得1株分泌高滴度抗华支睾吸虫成虫抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株，分泌的单抗命名为D10。其效价达1：200000以上，纯度达90％以上，亚类鉴定为IgGl类；单抗株D10与猪囊尾蚴、弓形虫、疟原虫和日本血吸虫抗原无交叉反应；免疫荧光法见其与华支睾吸虫成虫表皮及虫卵结合；免疫组化显示单抗株D10与病变肝脏组织中汇管区及周围间质中的抗原结合明显。结论制备的单抗株D10具有高效价和高特异性，为华支睾吸虫病的研究及华支睾吸虫病诊断抗体的研制奠定了基础。
- 孔德龙孙伟王东辉刘瀛汤仁仙付琳琳徐田云刘宜升郑葵阳
- 关键词：华支睾吸虫单克隆抗体ELISA
- 特异性siRNA沉默LASP-1对HepG2细胞增殖和迁移的影响被引量：1
- 2012年
- 目的应用RNA干扰技术沉默细胞内LASP-1蛋白的表达,探讨LASP-1蛋白对人肝癌HepG2细胞增殖和迁移的作用。方法根据LASP-1 mRNA编码序列设计RNA干扰靶点并构建特异性小干扰RNA(siRNA),通过脂质体转染入HepG2细胞,采用Western blot法检测LASP-1蛋白的表达。采用CCK-8增殖实验、平板克隆形成实验、Transwell和划痕愈合实验方法,观察HepG2细胞增殖及迁移情况。结果 (1)LASP-1 siRNA对LASP-1蛋白表达水平有显著的下调作用(P<0.05)。(2)体外实验结果显示,与HepG2组及阴性对照组相比,siRNA组HepG2细胞增殖和克隆形成率明显被抑制(P<0.05),其迁移能力也下降(P<0.05)。结论下调LASP-1蛋白表达可显著抑制HepG2细胞的增殖和迁移能力,提示LASP-1在肝癌细胞恶性增殖和转移过程中具有重要作用,为临床上寻找抑制肝癌增殖转移的靶点提供新的思路和方法。
- 孔凡运胡丽娜张海清李向阳尤红娟汤仁仙郑葵阳
- 关键词：RNA干扰HEPG2细胞增殖迁移
- 快速斑点免疫金染色法检测抗日本血吸虫抗体方法的建立与初步应用被引量：6
- 2003年
- 目的 建立简便、经济和敏感、特异的快速免疫学诊断方法。方法 将日本血吸虫可溶性虫卵抗原点加于混合纤维素酯微孔滤膜 ,以快速斑点免疫金染色法 (F -Dot-IGS)检测日本血吸虫病患者血清抗体。结果 初步结果显示 ,共检测 5 5例日本血吸虫病患者血清抗体 ,阳性率 10 0 % ;检测 4 0例义务献血员血清均为阴性 ;5 0例肝吸虫病患者血清 ,1例出现阳性反应 ,交叉反应率为 2 0 % ;10例肺吸虫病人血清未见交叉反应。结论 本法快速 ,更为简便、经济 ,有较高的敏感性和特异性 ,适于基层。
- 郑葵阳杜文平刘宜升付琳琳
- 关键词：日本血吸虫抗体免疫学诊断方法日本血吸虫病
- 四种抗原用于Dot-IGSS和Dot-ELISA诊断日本血吸虫病的比较被引量：9
- 1994年
- 以日本血吸虫可溶性成虫抗原(AWA)、尿素溶解性成虫抗原(JWU)、硫酸铵沉淀成虫抗原(AW)和可溶性虫卵抗原(SEA),用斑点免疫金银染色试验(Dot-IGSS)和Dot-ELISA诊断日本血吸虫病.结果显示:Dot-IGSS法,4种抗原分别检测50例日本血吸虫病人血清,抗体检出率均达100.0%,50例正常人阴性符合率98.0%—100.0%,与肝吸虫病人的交叉反应率0%—2.0%(P>0.05),Dot-ELISA法、AWA、AW和SEA阳性符合率均为100.0%,JWU为90.0%,低于其它抗原(P<0.05),与正常人阴性符合率及肝吸虫病人交叉反应率分别为94.0%—100.0%及0%—6.0%.各抗原检出抗体滴度,Dot-IGSS均高于Dot-ELISA(P<0.05—0.01).抗原浓度在500.0μg/ml,两法抗体检出结果无差异(100.0%),至6.25μg/ml,酶标法检出率为0,而金标法仍为70.0%—80.0%(P<0.01).
- 郑葵阳杜文平吴中兴郑霞
- 关键词：抗原斑点酶联免疫吸附试验日本血吸虫病
- 尘螨与过敏性疾病的关系被引量：2
- 2010年
- 目的进一步调查徐州市区人群尘螨感染情况,了解尘螨的生物学特性及其与临床过敏性疾病的关系,为管理部门制定决策及公众采取预防措施提供依据。方法采用尘螨变应原皮肤点刺试验(skin prick test,SPT),并以组胺当量标准检测健康人群及临床过敏患者的阳性率;检测居民室内尘螨并计数。结果检测在校大、中、小学生和幼儿307人,阳性50人(16.3%);临床过敏患者997例,阳性713例(71.5%)。健康人群与患者组内各年龄段之间SPT阳性率差异无统计学意义(P>0.05),但各组女性SPT阳性率均高于男性(P<0.05);检测居民卧室30户,螨检阳性23户(76.7%)。结论徐州市区居民室内尘螨孳生多见,易引起过敏,患者四季均可发病。加强居室环境螨类控制,是减轻螨病症状和减少过敏发作的重要预防措施。
- 韩天李益明邢道荣郑葵阳刘宜升付琳琳
- 关键词：尘螨过敏变应原皮肤点刺试验
- Sonic Hedgehog(SHH)促进胶原蛋白诱导关节炎大鼠滑膜成纤维细胞的增殖被引量：2
- 2016年
- 目的探讨Sonic Hedgehog(SHH)在滑膜成纤维细胞增殖中的作用。方法收集类风湿性关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)、强直性脊柱炎(AS)患者及健康正常人血清样本各(30例),ELISA检测上述血清SHH的含量。SD大鼠皮内注射2型胶原蛋白(Col2)诱导RA大鼠模型(CIA),取其滑膜组织原代培养滑膜成纤维细胞(SF)。免疫荧光细胞化学染色法检测vimentin表达鉴定SF,并检测SHH在SF中的表达。培养SF给予SHH-胶质瘤相关癌基因1(Gli-1)通路特异性阻断剂GANT61处理72 h,Western blot法检测SF表达SHH的变化情况,CCK-8法检测SF的增殖情况。结果 RA患者血清中SHH的含量较SLE、AS患者及正常组含量升高。成功建立CIA模型及分离培养SF;CIA-SF表达SHH较正常组SF高。给予GANT61处理72 h,CIA-SF中SHH蛋白表达降低且细胞增殖水平下降。结论 SHH参与RA发病与CIA-SF增殖有关。
- 李慧秦苏萍孙德旭潘伟李向阳孔凡运郑葵阳汤仁仙
- 关键词：滑膜成纤维细胞SHH
- 刚地弓形虫抑制蛋白的原核表达与免疫反应性分析被引量：3
- 2015年
- 目的克隆并表达刚地弓形虫抑制蛋白(Tg PRF)基因,并分析其免疫反应性。方法提取弓形虫RH株速殖子总RNA,根据Tg PRF的基因编码序列设计引物,RT-PCR扩增产物双酶切后连接入p ET30a(+)载体,重组质粒转化入大肠埃希菌(E.coli)DH5α,经双酶切、PCR和测序鉴定阳性菌落。p ET30a(+)-Tg PRF转化至E.coli BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结合考马斯亮蓝染色检测表达产物。重组蛋白经镍亲和层析法纯化后,以兔抗弓形虫血清为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)分析r Tg PRF蛋白的免疫反应性。结果 Tg PRF基因RT-PCR扩增产物约为492 bp。经双酶切、PCR和测序结果显示,重组质粒p ET30a(+)-Tg PRF构建成功。SDS-PAGE结果显示,经IPTG诱导获得相对分子质量(Mr)约35 000的可溶性重组蛋白。Western blotting结果显示,r Tg PRF蛋白能被兔抗弓形虫血清识别。结论本研究克隆的Tg PRF基因序列能在原核表达系统中表达,且具有免疫反应性。
- 原飞刘转转张波曹建平郑葵阳王德广
- 关键词：刚地弓形虫抑制蛋白基因克隆原核表达免疫反应性
- 三种吸虫抗原与日本血吸虫抗原之间的交叉反应性及其表位研究被引量：1
- 1996年
- 采用免疫标记技术（ＴＥＳ一ＩＥＳＴ、ＡＷＡ一ＩＥＳＴ和ＴＥＳ一ＩＦＡＴ）及酶联免疫印渍技术（ＥＬＩＢ）对卫氏并殖吸虫，华支睾吸虫和姜片虫成虫可溶性抗原与日本血吸虫卵和成虫可溶性抗原之间的交叉反应性及其表位分子基础进行了研究。７１０份上述３种吸虫病人血清与日本血吸虫抗原之间的交叉反应率分别为３．９％（１０／２５９），４．２％（１１／２６１）和３．２％（６／１９０）．用ＥＬＩＢ对上述吸虫组分抗原分析结果表明，卫氏并殖吸虫、华支睾吸虫和姜片虫抗原与日本血吸虫抗原之间的交叉反应表位分子量分别为９７～７６ｋｕ，４０～１４．５ｋｕ和１０６～１４ｋｕ，华支睾吸虫和姜片虫成虫抗原之间显示６７～１４ｋｕ，范围的交又反应表位分子量。本研究为今后纯化抗原，提高血清学方法的特异性和敏感性，提供了重要依据。
- 龚唯曹岷施云松骆伟夏超明庞智郑葵阳李允鹤
- 关键词：卫氏并殖吸虫日本血吸虫表位
- 基于胜任力模型的临床医师培训体系探讨被引量：6
- 2012年
- 以能力为本的培训已成为世界各国人力资源培训的重要趋势。阐述胜任力及胜任力模型概念的基础,分析传统的培训体系与基于胜任力模型培训体系的不同,提出基于胜任力模型的临床医师培训体系的具体程序设计及评估方法,可以为我国的临床医学教育综合改革提供新的视角。
- 梁茜郑葵阳
- 关键词：胜任力临床医师
