翟春生
- 作品数：64 被引量：212H指数：10
- 供职机构：中国人民解放军南京军区军事医学研究所更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 水貂病毒性肠炎细胞培养灭活苗的研制
- 1990年
- 目前用于预防水貂病毒性肠炎的疫苗有脏器组织灭活苗和细胞培养灭活苗两种,前者因有传播阿留申病的危险已基本淘汰。细胞培养灭活苗安全、可靠,国内已有不少地区应用,但其生产的技术环节未作报道。为了进行生产技术开发,我们对生产水貂病毒性肠炎细胞培养灭活疫苗的各个技术环节作了研究。现报告如下。
- 施正良王永山翟春生
- 关键词：水貂病毒性肠炎细胞培养灭活苗
- 应用酶联免疫吸附试验检测猪囊虫病特异抗体的研究被引量：4
- 1990年
- 用猪囊虫粗抗原、B 抗原、等电聚焦技术分离的抗原组份和特异单克隆抗体亲和层析抗原,以ELSA间接法检测猪囊虫病血清抗体,结果特异性均不理想。应用单克隆抗体分析查明,在某些囊虫抗原分子上既有特异性抗原位点,又有非特异性位点。用特异单克隆抗体以ELISA抑制法检测猪囊虫病血清抗体,结果完全消除了假阳性反应,病猪血清检出率为86.41％(89/103)。
- 翟春生王永山施正良
- 关键词：囊虫病单克隆抗体特异抗体
- 应用ELISA双抗体夹心法检测鸡病毒性关节炎病毒的研究被引量：4
- 1993年
- 本试验建立了检测鸡病毒性关节炎病毒的ELISA双抗体夹心法.取代反应、阻断试验均为阴性,与NDV、MDV和IBDV无交叉反应,对已知阳性标本的检测均为阳性;其敏感性比琼扩试验高80倍以上,这表明ELISA夹心法具有较高的特异性和敏感性.在人工感染后2～27d,关节滑膜、腱鞘和脾脏中病毒检出率为100％;还从肝脏、法氏囊和脑组织中检测到病毒.
- 唐雨德翟春生周宗安顾志香王元伦
- 关键词：病毒性关节炎病毒鸡病
- 用DIG－标记核酸探针鉴定传染性法氏囊病病毒被引量：4
- 1994年
- 用ＤＩＧ－标记ＩＢＤＶｃＤＮＡ探针进行斑点杂交试验鉴定传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）。实验结果证明，该探针能与试验的１０株ＩＢＤＶ的ＲＮＡ发生限性杂交反应，结果清晰稳定，无非特异性反应。本试验是一种新的敏感的ＩＢＤＶ鉴定方法。
- 王永山周宗安翟春生王元伦方元顾志香
- 关键词：IBD病毒CDNA探针
- 人胰岛素原类似物(BKRA)基因的合成与表达被引量：7
- 1998年
- 为了利用基因工程生产胰岛素，按照已知的人胰岛素Ａ、Ｂ链氨基酸序列和大肠杆菌偏爱的氨基酸密码子设计并合成了人胰岛素原类似物（ＢＫＲＡ）基因，其中以赖（Ｋ）－精（Ｒ）二肽编码区取代人胰岛素原Ｃ肽编码区．为了避免其编码蛋白在大肠杆菌中表达时被降解，通过人工接头将２个ＢＫＲＡ基因串联起来，接头部分氨基酸序列为Ａｒｇ－Ａｒｇ－Ａｓｎ－Ｓｅｒ．将串联的ＢＫＲＡ基因克隆到表达载体ｐＥＴ－２８ａ（＋），实现了在大肠杆菌中的融合表达，表达产物以包含体形式存在，约占细菌总蛋白２４％．表达产物氨基末端具有六组氨酸肽段，以ＨｉＴｒａｐ凝胶进行亲和层析，一步纯化可达纯度９５％以上．放射免疫测定表明，纯化的融合蛋白具有胰岛素抗原活性．
- 房德兴王永山周宗安翟春生顾志香王元伦
- 关键词：基因合成纯化
- 猪囊虫病基因工程疫苗的体液与细胞免疫反应被引量：8
- 1999年
- 为了探讨以 Ｉ Ｓ Ｃ Ｏ Ｍ 作佐剂的猪囊虫病基因工程疫苗的免疫机理，对其诱导的体液免疫与细胞免疫反应进行了测定。用上述疫苗免疫 ９ 头试验猪，采用间接 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测体液免疫反应及通过淋巴细胞转化试验、 Ａ Ｎ Ａ Ｅ染色试验、 Ｅ玫瑰花环形成试验等检测细胞免疫反应；用该疫苗和铝胶苗分别免疫昆明小鼠各 ２０ 只，分别检测体液免疫反应和 Ｔ 淋巴细胞抑制／杀伤亚群的动态变化。体液免疫的检测结果显示，免疫后 ７ 天即出现抗体，２１ 天后抗体全部转阳，持续的时间不少于 １９３ 天，效价明显高于铝胶苗；细胞免疫检测结果显示，免疫猪外周血 Ｔ淋巴细胞转化率、 Ａ Ｎ Ａ Ｅ＋ 细胞和粗粒型 Ａ Ｎ Ａ Ｅ＋ 细胞、 Ｅ Ｒ Ｆ Ｃ和 Ｅａ Ｒ Ｆ Ｃ细胞显著升高，免疫小鼠 Ｔ淋巴细胞抑制／杀伤亚群显著升高；与铝胶苗及对照组比较，差异极显著。以上结果表明猪囊虫病基因工程疫苗可同时激发动物的体液免疫和细胞免疫反应，增强了机体的免疫调节功能及杀伤性 Ｔ 淋巴细胞功能。
- 唐雨德刘玉顾志香郁兴明翟春生
- 关键词：囊虫病基因工程疫苗体液免疫细胞免疫
- 应用ELISA检测囊虫病猪循环抗原的研究被引量：4
- 1992年
- 本项研究应用McAb以ELISA双抗体夹心法检测以免疫复合物(IC)形式存在于囊虫病猪血清中的循环抗原(CA)。用3.5％聚乙二醇沉淀猪血清中的IC,再经沸水浴破坏IC中的抗体,可以明显提高CA的检出率。病猪血清CA阳性率为100％(113/113),与棘球蚴和细颈囊尾蚴感染的猪血清有交叉反应。
- 翟春生施正良王永山
- 关键词：囊虫循环抗原单克隆抗体
- 麻雀体内传染性法氏囊病病毒的分离鉴定及理化特性研究被引量：6
- 1995年
- 从传染性法氏囊病（ＩＢＤ）阳性麻雀体内分离到了一株病毒，用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体夹心ＥＬＩＳＡ试验和ＤＩＧ－标记ＩＢＤＶｃＤＮＡ探针斑点杂交试验证明该病毒为ＩＢＤＶ。病毒可适应于鸡胚和鸡胚成纤维细胞，产生细胞病变效应（ＣＰＥ）。病毒血清型鉴定为Ⅰ型，病毒代谢抑制试验证明其基因组为ＲＮＡ，病毒核酸的电泳图谱呈两条特征带。病毒对乙醚不敏感，ｐＨ２．０不能灭活病毒，ｐＨ１２可使病毒失去感染性，５６℃作用３小时病毒仍有活性，７０℃１小时可灭活病毒。以上结果表明从麻雀体内分离到的ＩＢＤＶ理化性质比较稳定，与目前鸡场流行的ＩＢＤＶ极为相似，可能与鸡ＩＢＤＶ同源，提示麻雀可能在ＩＢＤ流行病学中起主要作用。
- 王永山周宗安翟春生王元伦顾志香方元
- 关键词：麻雀理化特性IBD病毒
- 抗胰岛素单克隆抗体的研究
- 1997年
- 用人工合成的人胰岛素原类似物基因大肠杆菌表达产物免疫 BALB/ c小鼠制备免疫脾细胞 ,与小鼠骨髓瘤 SP2 / 0细胞系融合 ,建立了 7株能分泌抗胰岛素单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞系。间接 EL ISA和免疫印迹试验结果表明 ,该单克隆抗体对人。
- 王永山房德兴周宗安翟春生顾志香
- 关键词：胰岛素单克隆抗体
- 囊虫病循环抗原酶联免疫试剂检测盒的研制被引量：13
- 1999年
- 以部分纯化囊虫抗原免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ 小鼠，取其脾细胞与 Ｓ Ｐ２／０ 细胞融合制备抗囊虫循环抗原（ Ｃ Ａ） Ｍｃ Ａｂ ，共获得 ８ 株分泌抗囊虫 Ｃ Ａ Ｍ ｃ Ａｂ 细胞株。经鉴定，筛选出组合后能获得最佳检测效果的 Ｃ Ａ Ｍ ｃ Ａｂ细胞株 Ｍ ｃ Ａｂ １ Ｃ７（包被）和 Ｈ Ｒ Ｐ１ Ｂ５ 作为检测用的 Ｍ ｃ Ａｂ，用其建立了检测囊虫 Ｃ Ａ 的双抗体夹心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ方法，并研制了囊虫病 Ｃ Ａ 检测试剂盒。试剂盒用于检测囊虫病 Ｃ Ａ，敏感、特异、快速、简便，囊虫病血清 Ｃ Ａ的检出率为 ９１．４３％ ，脑脊液 Ｃ Ａ 的检出率为 ９４．４４％ 。
- 刘玉唐雨德顾志香周宗安王永山于明明郁兴民翟春生
- 关键词：囊虫病循环抗原酶联免疫吸附试验
- 全文增补中
