您的位置： 专家智库 > >

王赛赛

作品数：13 被引量：19H指数：3
供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金江苏省产学研联合创新资金项目江苏省农业科技自主创新基金更多>>
相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>

合作作者

文献类型

  • 8篇期刊文章
  • 2篇会议论文

领域

  • 6篇农业科学
  • 4篇生物学
  • 1篇自动化与计算...
  • 1篇医药卫生

主题

  • 6篇转座
  • 6篇转座子
  • 4篇转基因
  • 4篇基因
  • 3篇胚胎
  • 3篇活性
  • 3篇斑马
  • 3篇斑马鱼
  • 2篇小鼠
  • 2篇基因治疗
  • 1篇对转
  • 1篇硬骨鱼
  • 1篇硬骨鱼类
  • 1篇鱼类
  • 1篇早期胚胎
  • 1篇受体
  • 1篇胚胎成纤维细...
  • 1篇胚胎发育
  • 1篇种蛋
  • 1篇注射

机构

  • 10篇扬州大学

作者

  • 10篇王赛赛
  • 10篇高波
  • 9篇宋成义
  • 8篇陈才
  • 7篇沈丹
  • 4篇陈伟
  • 3篇史云强
  • 3篇薛松磊
  • 3篇钱跃
  • 3篇崔恒宓
  • 3篇王宵燕
  • 3篇张丽
  • 3篇王亚丽
  • 2篇王伟
  • 1篇谢雨琇
  • 1篇李庆平
  • 1篇刘帅军
  • 1篇杨昆仑

传媒

  • 3篇中国家禽
  • 2篇生物工程学报
  • 1篇中国农业科学
  • 1篇遗传
  • 1篇水产学报
  • 1篇2015中国...

年份

  • 1篇2021
  • 1篇2018
  • 3篇2017
  • 3篇2016
  • 2篇2015
共 13 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
多转座子载体的构建及转座特性比较研究
2015年
【目的】转座子(transposon,Tn)是染色体上可自主复制和移位的基本单位,普遍存在生物体基因组内,Sleeping beauty(SB)、piggy Bac(PB)和Tol2分别来源于鲑鱼、甘蓝尺蠖蛾和青鳉鱼,是目前脊椎动物中活性较高的转座子。比较了这3种转座子在哺乳动物细胞的转染、插入和剪切效率,从而获得细胞水平上的高活性转座子系统。【方法】通过高保真PCR法分别从SB、PB和Tol23种转座子载体克隆3种转座子3′和5′端的转座元件,测序正确后,将各转座元件依次亚克隆至p T2-HB载体框架,构建成包含这3种转座子的多转座子载体pT3-PST。将绿色荧光蛋白表达框CAG-GFP和新霉素表达框PGK-NEO分别克隆至p T3-PST载体,获得两个表达载体pT3-PST-CAG-GFP和pT3-PGK-NEO。将这两个表达载体分别和转座酶表达质粒pCMV-SB100X、p CMV-HAhy PBase、p CMV-Tol2以1﹕1质量比混合,经多聚阳离子PEI包裹,共转染小鼠胚胎成纤维细胞(3T3),同时以突变失活的转座酶质粒SB△DD与转座子载体共转染作为阴性对照组。转染GFP 36 h后,用荧光显微镜进行检测GFP表达率,提取细胞基因组,以Amp基因作为内参,进行实时荧光定量PCR,检测GFP插入拷贝数;根据被剪切位置上下游序列设计引物,进行实时荧光定量PCR,检测3种转座子的剪切效率。细胞转染NEO 48 h后,用浓度为500μg·m L-1的G418进行耐药性筛选,至正常细胞基本全部死亡(10 d),将细胞进行吉姆萨染液染色,统计耐药细胞数,从而比较各组转座活性。【结果】成功构建了多转座子载体PT3-PST、pT3-PST-CAG-GFP和pT3-PGK-NEO。实验组转染细胞效率均大于50%,且差异不显著(P>0.05)。SB组GFP相对拷贝数高于Tol2和PB组,但差异不显著(P>0.05),均显著高于对照组(P<0.05)。SB和PB组剪切效率显著高于Tol2组(P<0.05),但SB和PB组之间差异不显著(P>0.05)。pT3-PGK-NEO与转座酶共转染3T3细胞,G418抗性筛选结果表明,SB组耐药细胞数显著高于P
沈丹谢雨琇李庆平薛松磊史云强王赛赛陈才钱跃高波崔恒宓宋成义
关键词：胚胎成纤维细胞
猪esr基因反转录转座子插入多态性及其与大白猪生产性能的关联性分析被引量：4
2021年
雌激素受体(Estrogen receptor,esr)介导雌激素影响相关基因表达,从而调控哺乳动物的生长和繁殖机能。为了探讨esr基因的反转录转座子多态性对猪生长性能的影响,文中应用比较基因组学和生物信息学方法,预测猪esr基因的反转录转座子插入位点,采用PCR方法验证不同品种猪中插入多态性,并将该基因型与大白猪性能进行关联分析。结果显示,esr1和esr2基因验证后得到4个反转录转座子多态性位点,分别是位于esr1基因内含子2的esr1-SINE-RIP1、位于内含子5的esr1-LINE-RIP2和esr1-SINE-RIP3,以及位于esr2基因内含子1的esr2-LINE-RIP。其中esr1-SINE-RIP1的287 bp SINE插入对大白猪的活体背膘厚和100 kg体重背膘厚有显著影响(P<0.05),纯合有插入(SINE^(+/+))的活体背膘厚和100kg体重背膘厚显著高于杂合有插入(SINE^(+/-))和无插入(SINE^(-/-))型。这表明esr1-SINE-RIP1位点可作为分子标记辅助选育大白猪的背膘厚性状。
迟诚林安亚龙李凯媛顾浩王赛赛陈才高波宋成义王宵燕
关键词：雌激素受体反转录转座子
种蛋开窗封口方法对转基因鸡胚孵化和发育的影响
2016年
试验旨在优化一种方便快捷高效的开窗封口方法,检测其对鸡胚孵化和生长发育的影响。将种蛋孵化至HH14阶段,在钝端开一小孔进行胚胎外源DNA显微注射,然后分别用医用胶布、医用胶布+石蜡膜两种方法进行封口,继续孵化至出雏。检测孵化第7、14和21天的鸡胚成活率、孵化率及初生体重。结果表明,胶布封口孵化率高于胶布+石蜡膜,两组孵化率虽然显著低于正常种蛋孵化率,但优于传统封口方法。两种封口方法对雏鸡初生重影响不明显,与对照组差异不显著。研究为转基因鸡制备提供了一种方便有效的开窗封口方法,为提高转基因鸡效率奠定基础。
王亚丽王赛赛高波宋成义
关键词：孵化率初生重显微注射
Tc1/Mariner转座子超家族的研究进展被引量：2
2017年
随着高通量测序技术的迅猛发展,越来越多的生物基因组注释结果表明:转座子几乎存在于所有生物的基因组中,是大多数生物基因组的重要组分。其中,Tc1/Mariner转座子是自然界中分布最广泛的一类DNA转座子超家族,在自然界已经发现14个有活性的Tc1/Mariner转座子(如Minos,Mos1等),另外通过分子重构也获得高活性的人工转座子,如睡美人转座子(Sleeping Beauty,SB)。SB和Mos1等转座子作为基因转移载体已被广泛应用于转基因、基因捕获和基因治疗等领域的研究中,并取得了很好的应用效果。本文将重点综述Tc1/Mariner转座子的结构、分类、分布、转座机制、活性转座子的挖掘,及其在转基因、基因捕获和基因治疗等研究领域的应用。
沈丹陈才王赛赛陈伟高波宋成义
关键词：转基因基因治疗
转基因显微注射剂量对鸡胚转基因效率和胚胎发育的影响被引量：1
2017年
研究旨在探讨显微注射剂量对鸡胚孵化和转基因效率的影响。将SB转座子介导的转基因载体分别设置为20 ng、50 ng和100 ng,通过显微注射技术注射至14HH鸡胚血管,继续孵化至出雏。检测孵化第7、14和21天的鸡胚成活率,出雏率、初生体重和性腺阳性率。结果表明,50 ng剂量组鸡胚性腺阳性率明显高于其它两组,且各剂量组间绿色荧光蛋白基因表达强度差异不显著。各剂量组之间种蛋成活率、出雏率和雏鸡初生重差异均不显著(P>0.05)。本研究为鸡胚显微注射剂量优化提供参考,对提高转基因鸡制备效率具有重要意义。
王亚丽王赛赛张丽高波宋成义
关键词：注射剂量胚胎发育
斑马鱼活性转座子(ZB)的发现及其活性验证研究
由于活性转座子在基因组内具有可以移动的特性,因此在转基因和基因治疗等领域具有很好的应用前景,目前PB、SB、To12等转座子已经作为基因治疗和转基因的重要介导载体进行广泛应用,并取得显著进展.本研究通过生物信息学分析,在...
沈丹薛松磊钱跃王赛赛陈才史云强高波王宵燕崔恒宓宋成义
关键词：转座子转基因斑马鱼小鼠基因治疗
环境污染物对斑马鱼早期胚胎转座子转录活性的影响被引量：1
2017年
转座子在生物基因组中占据重要的组成部分,是基因组中可移动和扩展的重要元件,其转座活性受外界环境因子调控。为了探讨环境应激对基因组转座子表达活性的影响,用环境污染物二噁英(TCDD)和重金属Cu^(2+)或Cd^(2+)处理斑马鱼早期胚胎,通过荧光定量PCR(q RT-PCR)比较处理前后9种结构完整的转座子转录活性变化,这9种转座子分别是DNA转座子Tc1家族的Tc-a、Tc-b、Tc-c、Tc-d、Tc-e,反转录转座子病毒家族ZB-ERV-1、ZB-ERV-2、反转录转座子LINE家族L1-323和L1-21。结果发现,TCDD使8个转座子转录活性明显下调,1个转座子显著上调;Cu^(2+)导致7个转座子上调,2个显著下调;Cd^(2+)导致6个转座子上调,3个显著下调。研究表明,斑马鱼转座子转录活性受环境因素影响显著,环境胁迫可能是转座子活性变化的原因之一。本研究对了解和评估环境因子对鱼类转座子活性的影响作用具有重要的意义,为进一步研究生物基因组的进化机制提供参考。
高波陈才张丽沈丹王赛赛陈伟王伟产舒恒宋成义
关键词：斑马鱼转座子污染物转录活性
BMPMP3、BMPBMP10、BMPBMP15基因在雏鸡和成年鸡主要器官中的表达特性研究被引量：4
2016年
骨形态发生蛋白(BMP)是转化生长因子超家族中的重要成员,其信号通路控制着诸如中胚层形成、神经系统分化、牙齿和骨骼发育以及癌症发生等许多重要的生物学过程。研究旨在分析BMP家族中的BMP3、BMP10、BMP15在雏鸡和成年鸡主要器官中表达水平。采用RT-PCR方法分析BMP3、BMP10、BMP15在雏鸡、成年鸡主要器官中的表达情况,并分析这3个基因在雏鸡和成年鸡心脏中的表达差异性。结果表明:BMP3、BMP10在雏鸡和成年鸡两阶段主要器官中均可表达,BMP15在成年鸡母鸡各器官均有表达,公鸡仅肝中有表达;BMP3在雏鸡心脏中表达水平显著高于成年鸡(P<0.05),BMP10表达水平两者差异不显著(P>0.05),BMP15在成年鸡表达水平显著高于雏鸡(P<0.05)。研究结果为BMP信号通路研究提供参考。
王赛赛王亚丽沈丹薛松磊钱跃史云强陈才钟继汉刘帅军高波
9种硬骨鱼类转座组注释
2018年
通过生物信息学手段对9种硬骨鱼转座组进行注释。结果表明9种硬骨鱼类转座组大小和构成差异显著,其转座组含量从高到低分别为斑马鱼、矛尾鱼、青鳉鱼、罗非鱼、花斑剑尾鱼、大西洋鳕鱼、三刺鱼、金娃娃和红鳍东方鲀,转座子含量和基因组大小呈正相关。DNA转座子在硬骨鱼类中具有多样性高和含量差异大的特点(0.50%–38.37%),是硬骨鱼类转座组差异的主要决定因素,其中h AT和Tc/Mariner超家族是硬骨鱼类主要的DNA转座子。RNA转座子在硬骨鱼类中也具有多样性高的特点,其中LINE转座子占硬骨鱼类基因组的0.53%–5.75%,共检测到14个超家族分布,其中L1、L2、RTE和Rex转座子扩增较为明显,LTR转座子除了在斑马鱼和三刺鱼中含量达到5.58%和2.51%,在大多硬骨鱼类基因组中的含量低于2%,在硬骨鱼类中共检测到6个LTR转座子(Copia、DIRS、ERV、Gypsy、Ngaro和Pao)超家族分布,其中扩增最为明显的是Gypsy。而SINE转座子在硬骨鱼类中扩增最弱,仅在斑马鱼和矛尾鱼中分别达到3.28%和5.64%,在其他7个物种中低于1%。SINE中t RNA、5S和MIR三个超家族在部分硬骨鱼类中有一定程度扩增。本研究表明硬骨鱼类转座组具有多样性丰富、差异大的特点,转座组差异与硬骨鱼基因组大小有很强的相关性,转座组是决定硬骨鱼基因组大小的重要因素。
高波沈丹陈才王赛赛杨昆仑陈伟王伟张丽宋成义
关键词：硬骨鱼转座子注释
斑马鱼活性ZB转座子的挖掘及其应用研究
DNA转座子是一种在生物界广泛分布,且能够在宿主基因组移动的DNA 元件,是一种重要的遗传操作工具.目前,PB,SB,Tol2 等DNA 转座子在转基因,基因捕获,基因治疗等领域应用广泛,但目前国内具有自主知识产权的转座...
沈丹王赛赛陈才钟继汉陈伟高波王宵燕崔恒宓宋成义
关键词：转座子转基因斑马鱼小鼠
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0