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王剑锋: 作品数：61 被引量：249H指数：9; 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>; 发文基金：国家科技重大专项北京市自然科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>

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一种脊髓灰质炎Ⅱ型病毒单克隆抗体及其应用: 本发明涉及一种脊髓灰质炎II型病毒单克隆抗体及其应用，属于免疫学领域和疫苗领域。具体地，本发明涉及一种保藏编号为CGMCC No.12291的脊髓灰质炎Ⅱ型病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株、由所述杂交瘤细胞株生产的单克隆抗体以...; 李长贵徐康维英志芳王剑锋江征; 文献传递

sIPV疫苗D抗原含量双抗体夹心ELISA检测方法的建立及验证: 2023年; 目的建立牛多抗对兔多抗夹心ELISA方法检测Sabin株脊灰病毒灭活疫苗(Sabin strain inactivated poliovirus Vaccine,sIPV)D抗原含量,并对建立的方法进行验证。方法分别采用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型sIPV疫苗原液作为抗原制备兔多抗,并通过间接ELISA法检测其效价及特异性。以牛多抗为包被抗体、兔多抗为显示抗体建立检测D抗原含量的双抗体夹心ELISA方法,并对方法的准确度、精密度及D抗原专属性进行验证。用建立的方法检测国内5家企业sIPV疫苗样品。结果制备获得型别特异性好、效价高的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型兔多抗,并成功建立了双抗体夹心ELISA方法。采用四参数拟合,3型别标准曲线均具有良好的线性关系,R^(2)均>0.99。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型各试验加标回收率均为80%~120%,各浓度平均回收率分别为98.11%、97.41%、98.66%;重复性与中间精密度CV均<10%;能够对D/C抗原进行区分。建立的方法对5家企业生产的sIPV疫苗均能够进行D抗原定量检测。结论成功建立了检测sIPV疫苗D抗原含量的双抗体夹心ELISA方法,该方法准确度、精密度良好,具有一定的D抗原特异性,能够对不同厂家生产的疫苗进行检测。; 徐康维朱文慧宋彦丽英志芳王剑锋权娅茹李长贵; 关键词：D抗原酶联免疫吸附试验抗体

S/D法处理凝血因子浓缩物类制品的病毒灭活验证被引量：3: 2000年; 以水泡性口炎病毒 (VSV)为指示病毒 ,验证应用有机溶剂 /去污剂 (简称S/D)法灭活血液制品中病毒的生产工艺 ,并对不同厂家不同批号的四种凝血因子浓缩物类制品 (中间品 )的病毒灭活效果进行了分析总结。结果表明当制品中TNBP和Tween80终浓度为 0 3%和 1 0 % ,在 2 5± 1℃处理 6小时后对于包膜病毒确有显著的灭活效果。; 邱平周铁群王剑锋李长贵汪兴太

极性小分子抗原包被条件的摸索被引量：8: 1997年; 极性小分子抗原包被条件的摸索沈月雷邱平王剑锋戴斌李德富（中国药品生物制品检定所，北京１０００５０）当抗原的分子量较小和／或极性较强时，蛋白往往不容易被包被在酶标板上［１］。因为在常规包被过程中，蛋白主要是通过疏水作用结合在酶标板的表面［２］。为了提高...; 沈月雷邱平王剑锋戴斌李德富; 关键词：小分子包被单克隆抗体

人细小病毒B19主要抗原片段的表达及临床初步应用: 2002年; 周铁群李长贵王剑锋邱平李德富; 关键词：人细小病毒B19 酶联免疫吸附法献血员 ELISA

一种脊髓灰质炎Ⅰ型病毒单克隆抗体及其应用: 本发明涉及一种脊髓灰质炎I型病毒单克隆抗体及其应用，属于免疫学领域和疫苗学领域。更具体地，本发明涉及保藏编号为CGMCC No.12292的脊髓灰质炎Ⅰ型病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株、由所述杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体以及...; 李长贵徐康维英志芳王剑锋江征

低pH孵放法灭活静注人免疫球蛋白中脂包膜病毒效果验证的研究被引量：7: 2009年; 选用不同核酸类型的脂包膜病毒,其中RNA病毒为水疱性口炎病毒(VSV),DNA病毒为伪狂犬病毒(PRV),将两种指示病毒分别用于验证低pH孵放法对不同厂家生产的人血静脉注射用丙种球蛋白(IVIG)的病毒灭活效果。结果表明,液体IVIG的pH值为3.8～4.4,在23～25℃环境中,孵放21天可灭活VSV和PRV,两种指示病毒的灭活效果分别为≥5.50～6.62和≥5.38～6.62logTCID50/0.1ml。因此,低pH孵放法是一种安全、有效且简便实用的灭活脂包膜病毒的方法。; 王剑锋英志芳李长贵方捍华; 关键词：低PH 病毒灭活

基于NA活性检测细胞基质流感疫苗病毒滴度新方法的建立: 2020年; 目的:建立基于神经氨酸酶(neuraminidase,NA)活性检测细胞基质流感疫苗病毒滴度的新方法,并进行初步应用。方法:对NA活性检测使用底物的浓度和终止液类型、病毒感染靶细胞数目以及细胞裂解剂等反应条件进行优化,采用建立的方法检测细胞基质培养的流感疫苗毒种的病毒滴度,并与传统的病毒滴定法检测结果进行比较。结果:NA活性检测法的最适底物浓度为25μmol/L,最适终止液为0.2 mol/L Na 2CO 3。细胞数目为4×10^4个/孔,病毒感染48 h后,用0.5%TritonX-100裂解,检测细胞内复制病毒的NA活性,产生的相对荧光值最大。检测4批细胞基质培养的流感疫苗毒种病毒滴度,该方法与传统病毒滴定法检测结果差异无统计学意义(P>0.05),具有较好的一致性。结论:本研究建立了基于NA活性检测细胞基质流感疫苗病毒滴度的新方法,可用于生产过程中细胞基质流感病毒毒种的检定。; 赵慧王剑锋英志芳徐康维李娟李长贵; 关键词：神经氨酸酶

新型冠状病毒高效价中和血清的快速制备及应用被引量：6: 2020年; 目的制备新型冠状病毒高效价中和血清。方法使用重组表达的新型冠状病毒RBD蛋白作为免疫原,免疫SPF级家兔,制备抗血清。通过ELISA和微量中和试验检测抗血清效价。将制备的抗血清分发至我国多家新冠灭活疫苗研发企业,检测抗血清效价。结果经3次免疫后,抗血清的ELISA效价大于160万,中和效价为8192。5家企业返回微量中和效价检测结果的几何平均效价为6950。结论成功制备了新型冠状病毒高效价中和血清,并分发至我国多家新型冠状病毒灭活疫苗生产企业用于毒株鉴别及外源病毒因子检测,解决了制约疫苗快速研发的技术瓶颈。; 徐康维王剑锋权娅茹邵铭赵慧李长贵王军志; 关键词：新型冠状病毒抗血清

定量检测Ⅲ型Sabin株脊髓灰质病毒突变的荧光MAPREC法的建立和应用: 2018年; 目的:使用荧光标记代替同位素标记,建立定量检测Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒472位U到C突变比例的MAPREC(mutant analysis by PCR and restriction enzyme cleavage)法。方法:提取病毒样品RNA,反转录合成c DNA后进行非对称PCR反应以生成单链DNA扩增产物,之后采用荧光标记引物进行扩增,合成双链产物,以突变位点敏感的限制性内切酶作用后电泳分离,并分析样品的突变比例。结果:采用建立的方法对4个国际标准品进行检测,100%DNA突变标准品、IS DNA标准品、LMVR标准品以及HMVR标准品的标示值分别为100%、0.9%、0.7%、1.1%,检测结果分别为95.59%、0.84%、0.68%、1.07%,与其标示值一致性良好,并且不同实验间RSD均小于15%。检测9个批次样品,结果突变率均小于1%,符合WHO要求。结论:初步建立了基于荧光素标记的MAPREC方法,可以代替同位素法进行病毒突变的定量检测。; 徐康维张平英志芳何蕊王剑锋江征李长贵; 关键词：脊髓灰质炎病毒疫苗荧光标记突变率

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