杨君敬
- 作品数：20 被引量：27H指数：4
- 供职机构：中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 集约化养猪场嗜流产衣原体病流行状况的初步调查被引量：7
- 2012年
- 本试验对北京郊区5个规模化猪场断奶仔猪、育成猪、育肥猪和怀孕母猪采集血清共507份,同时采集密切接触饲养人员、仔猪、育肥猪的喉头拭子、母猪阴道拭子及公猪的精液共183份。分别使用间接血凝诊断试剂盒、法国ELISA试剂盒检测抗体;利用直接荧光染色法检测抗原,包括166份猪喉头拭子、阴道拭子和精液以及17份饲养人员喉头拭子。结果发现间接血凝诊断试剂盒、ELISA试剂盒抗体阳性率分别为4.14%和2.17%;抗原平均阳性率为14.8%,其中精液阳性率达到37.5%,母猪阴道拭子阳性率为27.5%,饲养人员阳性率为23.5%。本试验证实北京郊区猪嗜流产衣原体在种公猪、母猪群和饲养员呈高流行趋势。同时研究结果显示,5个被调查的规模化猪场嗜流产衣原体抗体阳性率显著低于有报道的其他省市,这与间接血凝诊断试剂盒检测结果高于ELISA试剂有关。针对发现的问题,必须采取有效措施控制种公猪精液污染衣原体现象,阻断向母猪和饲养人员传播,以降低人兽共患病发生的风险。
- 田德雨刘哲翔李靖杨君敬信先汪明何诚
- 关键词：抗体抗原
- 变质鸡蛋中蜡样芽孢杆菌的分离与鉴定被引量：7
- 2011年
- 从山东地区保存超过14 d大范围出现变质鸡蛋中分离到一株细菌,经过培养特性、生理生化鉴定和16S rDNA鉴定,鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。分别将变质鸡蛋、煮熟的变质蛋、健康鸡蛋进行厌氧培养和细菌计数,发现健康鸡蛋和煮熟的变质蛋无蜡样芽孢杆菌,而变质鸡蛋中的细菌数量达到1.3×108CFU/g。本试验表明,蛋黄中过量的蜡样芽孢杆菌可能与鸡蛋变质有关,应注意过量添加蜡样芽孢杆菌可能影响蛋品的保鲜和食用安全性。
- 潘青杨君敬李树梅欧长波曾汶曙何诚
- 关键词：变质蜡样芽孢杆菌鸡蛋
- 鹦鹉热衣原体孔雀株的分离与初步鉴定
- 2009年4月份,天津市某动物园送检的孔雀表现以精神委顿、腹泻、鼻炎、呼吸困难、眼睑有粘性分泌物、死亡率20%左右的主要临床特征,其中雏孔雀死亡较严重。临床病理剖检表现为严重气囊炎、心包炎、肺脏局灶性纤维素性渗出等。采集...
- 杨君敬凌勇袁吉磊何诚
- 文献传递
- 禽嗜鹦鹉热衣原体外膜蛋白N-PmpD及制备方法和应用
- 本发明提供了一种禽嗜鹦鹉热衣原体(Chlamydophila psittaci)外膜蛋白N-PmpD及制备方法和应用。本发明提供的N-PmpD蛋白其为：1)由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质，或2)在S...
- 何诚凌勇袁吉磊杨君敬
- 文献传递
- 北京郊区猪戊型肝炎流行初步调查被引量：4
- 2012年
- 用间接ELISA试剂盒对北京市郊区所采集的174份猪血清样品进行了抗体检测,结果显示,其抗体总阳性率达62.1%。针对戊型肝炎病毒(HEV)ORF2/ORF3重叠区设计了简并引物,采用巢式RT-PCR对随即采取的少量猪粪便样品进行了抗原检测。结果表明,部分粪便样品中存在HEV。
- 李靖刘波杨君敬田德雨凌勇何诚
- 关键词：戊型肝炎病毒血清流行病学逆转录聚合酶链式反应
- 人工感染羊嗜流产衣原体豚鼠流产模型的建立
- 目的通过人工感染怀孕豚鼠建立嗜流产衣原体发病模型,观察流产病理学变化的差异,确定豚鼠是否可以作为嗜流产衣原体的动物模型。方法 35只清洁级怀孕40d的豚鼠随机分为7组,每组5只。将羊嗜流产衣原体分离株B10011、CG1...
- 凌勇曾光旭杨君敬袁吉磊何诚
- 关键词：动物模型
- 文献传递
- 流产嗜性衣原体1B株pomp18基因β折叠区的克隆与表达
- 2009年
- 为探索POMP18蛋白的生物学功能、揭示其在流产衣原体病诊断和防治中的作用,本试验依据流产嗜性衣原体S26/3株全基因序列设计引物,用PCR法扩增流产衣原体pomp18基因β折叠区,将特异性扩增片段克隆入pMD18-T载体,测序比较分析序列后确认为目的基因,提交GenBank(Accession EU326104)。与GenBank中流产嗜性衣原体S26/3株的pomp18基因和氨基酸序列的相似性均达99%,与其他各型衣原体代表株的相似性为79%~80%。将pomp18基因β折叠区亚克隆到pET-32a(+)表达载体上,重组表达载体转化BL21(DE3)表达宿主菌,以IPTG诱导该重组菌,结果显示该重组菌表达了59 kD大小的融合蛋白;用羊流产嗜性衣原体多克隆抗体对表达的重组蛋白进行Western blotting试验,结果显示该重组蛋白具有免疫原性。本研究首次克隆、表达了流产衣原体pomp18基因β折叠区,原核表达获得了59 kD重组蛋白,为进一步探讨其生物学功能奠定基础。
- 杨君敬凌勇何诚秦秀慧栗绍文袁吉磊
- 关键词：克隆流产嗜性衣原体
- 寄生虫核酸疫苗研究进展被引量：1
- 2007年
- 寄生虫核酸疫苗是近年来出现和发展起来的一种新型疫苗；它不仅可以引起体液免疫，而且还能诱导高水平的细胞免疫应答，在寄生虫病的预防方面显示出了强大的优势。目前，已经在利什曼病、疟疾、血吸虫病等寄生虫病中开展了相关研究，该文从寄生虫核酸疫苗的免疫机制、特点、应用以及影响免疫效果的因素等方面阐述了最近几年来在这一领域取得的成果。
- 刘相叶吴秀萍杨君敬王学林于艳玲邓洪宽刘明远
- 关键词：寄生虫核酸疫苗免疫机制影响因素
- 人工感染羊嗜流产衣原体豚鼠流产模型的建立
- 2008年
- 目的通过人工感染怀孕豚鼠建立嗜流产衣原体发病模型,观察流产病理学变化的差异,确定豚鼠是否可以作为嗜流产衣原体的动物模型。方法35只清洁级怀孕40 d的豚鼠随机分为7组,每组5只。将羊嗜流产衣原体分离株B10011、CG1株分别以三个剂量组(10-1,10-2,10-3)腹腔攻毒1次,每只0.5 mL,以灭菌生理盐水为阴性对照。攻毒后观察豚鼠的临床体征、流产和死亡数量。攻毒后20 d安乐死处理剩余的大小豚鼠,无菌摘取组织,分成2份。一份-20℃冷冻保存,PCR检测病原在组织中的分布;另外一份固定于10%中性甲醛溶液,组织切片和免疫组化观察。结果(1)羊嗜流产衣原体分离株B10011和CG1均可造成怀孕豚鼠流产、产弱胎、畸形胎或死胎。2种分离株感染不同剂量造成豚鼠平均流产时间、流产数量、豚鼠死亡数量均有显著差异,且CG1株敏感性高于B10011株。(2)2个分离株均可造成肾脏、肝脏肿大,肺脏呈局灶性出血,卵巢出血坏死,胎盘子宫阜水肿;病理组织学显示肾小管上皮细胞变性、坏死,单核细胞大量增生;肝细胞颗粒样病变。脾髓质弥漫性出血,皮质区淋巴小结生发中心萎缩。(3)免疫组化结果显示衣原体包涵体主要分布于肾脏近曲小管、远曲小管,以及脾脏的髓质区。(4)PCR检测显示分离株感染后,肾脏、脾脏、肺脏、肝脏中均呈阳性。在卵巢组织中,高剂量组呈阳性。结论以B10011和CG1分离株人工感染怀孕豚鼠均可导致豚鼠出现流产,且CG1分离株敏感性较高,呈剂量-效应关系;感染豚鼠病理学变化与临床羊流产相似。因此,人工感染豚鼠流产模型可以用于反刍动物嗜流产衣原体病的研究。
- 凌勇曾光旭杨君敬袁吉磊何诚
- 关键词：动物
- 禽鹦鹉热嗜性衣原体PmpD基因N端区的克隆与表达被引量：1
- 2010年
- 为探讨禽鹦鹉热嗜性衣原体PmpD基因的生物学功能,本实验根据禽类鹦鹉热嗜性衣原体Cal-10株全基因序列设计引物,用PCR法扩增禽嗜性衣原体PmpD基因N端区,将特异性目的基因片段克隆入PBS-TII载体,经测序后确认为目的基因,并提交GenBank。试验扩增的禽鹦鹉热嗜性衣原体Cal株PmpD基因与禽鹦鹉热衣原体6BC株的PmpD基因和氨基酸序列的相似性均达99%,与流产衣原体成员嗜流产衣原体S26/3株、嗜豚鼠衣原体(GPIC)、嗜猫衣原体(Fe/C-56)核苷酸相似性分别为89%、82%和77%。PmpD基因N端区基因亚克隆到pET-32a(+)载体上,重组表达载体转化BL21(DE3)表达宿主菌,以IPTG诱导该重组菌,结果表达了约63 ku大小的融合蛋白;分别用禽鹦鹉热嗜性衣原体多克隆抗体、猪、羊流产嗜性衣原体多克隆抗体与表达出的重组蛋白进行Western blotting检测,结果表明该蛋白与禽源衣原体多克隆抗体呈阳性反应,与猪、羊源衣原体多克隆抗体呈阴性反应,显示该重组蛋白具有种属特异性。本研究首次表达了禽类鹦鹉热嗜性衣原体PmpD基因的N端区的重组蛋白,为进一步研究其生物学功能提供依据。
- 袁吉磊何诚蒋毅凌勇杨君敬张发明李应超陈曦
- 关键词：克隆重组蛋白
