朱华松 作品数:21 被引量:28 H指数:4 供职机构: 武汉生物制品研究所有限责任公司 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
牛血清白蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定 2007年 用牛血清白蛋白(BSA)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,培养上清经过双抗体夹心法检测初步筛选分泌鼠IgG的杂交瘤细胞,将此种杂交瘤细胞注射小鼠产生的腹水用间接ELISA法筛选,获得4株能稳定分泌抗BSA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2A5、3A3、3G6、4A8。鉴定结果显示,2A5细胞分泌IgG2a/κ,其余3株细胞分泌IgG1/κ;纯化后4株腹水单抗的纯度达90%以上,对BSA的ELISA滴度均可达到1∶100000以上;4株单抗均不与人以及马、猪、羊、兔、豚鼠等血清发生交叉反应;W estern B lotting试验证明4株单抗均识别分子量为68000的BSA;用间接ELISA法测定4株单抗相对亲和力及相对敏感度大小依次为3A3>2A5>3G6>4A8;杂交瘤细胞株连续培养3个月以及冻存半年后复苏,细胞生长良好,杂交瘤细胞分泌的抗体效价稳定。 余健 周志军 彭祥兵 朱华松 施金荣 余模松关键词:牛血清白蛋白 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验 检测狂犬病疫苗抗原含量的竞争ELISA的建立及初步应用 被引量:4 2007年 为满足狂犬病疫苗生产质量控制的需要,建立了竞争ELISA检测法,通过标准曲线的确定来计算病毒抗原的相对含量,并与ELISA间接法和双抗体夹心法结果进行比较。该方法方便准确,可对培养中的病毒抗原相对含量进行全程监测,是一种有效的辅助检测手段。 周志军 孙文 施金荣 朱华松 陈雪婷 王平关键词:竞争ELISA 狂犬病毒 抗原含量 重组HIV-1抗原的应用及评价 2002年 将纯化的基因重组HIV 1P2 4和融合蛋白P2 4 gp4 1包被微孔板 ,用ELISA分别检测正常人血清和HIV Ab国家参比品 (Panel)。rP2 4对 2 0份HIV Ab阳性Panel的检出率为 95 % (19/ 2 0 ) ,对 2 0份HIV Ab阳性Panel通过率为90 % (18/ 2 0 ) ,P2 4 gp4 1对 2 0份HIV Ab阳性Panel检出率为 90 % (18/ 2 0 ) ,对 2 0份HIV Ab阴性Panel的通过率为6 0 % (12 / 2 0 ) ;rP2 4和P2 4 gP4 1对正常人血清的检测结果均为阴性。结果表明研制的P2 4具有较高的敏感性和特异性 。 陈伟 陈克金 朱华松 余模松关键词:基因重组 融合蛋白 ELISA 丙型肝炎病毒C区和NS3区嵌合基因的克隆及表达 2006年 目的获得丙型肝炎病毒(HCV)C-NS3嵌合抗原,以提高HCV酶联免疫吸附试验诊断试剂的质量。方法应用SOE-PCR(拼接重叠延伸PCR)的方法,构建了HCV的C区和NS3区的嵌合基因,克隆于表达载体pGEX-4T3,并转化于大肠杆菌BL21,经筛选,IPTG诱导HCV的C-NS3嵌合抗原的表达。经SDS-PAGE检测表达水平,Western blot检测抗原特异性。结果SOE-PCR构建的HCV C区和NS3区嵌合基因在BL21中获得表达。经鉴定,其相对分子质量约为75000,并具有高度特异性。结论已获得HCV C-NS3嵌合抗原,为提高HCV酶联免疫吸附试验诊断试剂的质量奠定了基础。 彭祥兵 余健 黄仕和 周志军 李健 朱华松 张爱华 闭兰 赵亚杰 余模松关键词:嵌合基因 丙型肝炎病毒 HIV-1型衣壳蛋白P24在大肠杆菌中的表达、纯化及鉴定 被引量:4 1999年 用聚合酶链式反应 (PCR)从 HIV - 1gag基因序列中扩增出衣壳蛋白 (P2 4)基因 ,插入表达载体p GEX- 4T3中 ,构成重组质粒 p GEX- p2 4,在大肠杆菌 BL 2 1中高效表达出重组 P2 4。经 Glutathione- Sepharose4B亲和层析纯化后 ,重组 P2 4在间接 EL ISA和免疫印迹中表现出很高的抗原特异性和免疫反应性。 陈伟 张为 李茜 朱华松 闭兰 余模松关键词:HIV-1 P24 大肠杆菌 基因重组HIV-1 P24抗原的应用分析 2002年 目的 分析重组HIV-1-p24抗原,以便研制HIV-抗体诊断试剂。方法 以纯化重组P24为包被抗原,应用ELISA检测HIV-Ab国家参比品和正常人血清。结果20份阳性HIV-Ab检出阳性19份,符合率为95%;20份阴性HIV-Ab检出阴性18份,符合率为90%;50份正常人血清检测结果均为阴性。结论 所研制的重组P24抗原具有较高的特异性和敏感性,可用于制备HIV抗体诊断试剂。 陈克金 朱华松 余模松 陈伟关键词:P24抗原 人破伤风类毒素免疫血浆筛选试验中两种抗体检测方法的比较 被引量:2 2006年 应用酶联免疫法(ELISA)和间接血凝法(IHA)对1014份破伤风类毒素全程免疫后人血浆进行抗体水平检测,比较两者的收浆率、收浆符合率以及与动物实验的相关性。结果表明两者收浆率均达80%。ELISA法与IHA法的合格浆符合率达92%,与动物实验的相关性更好。ELISA法操作简便快速,结果判读客观明确,优于传统的IHA法,可作为人破伤风类毒素免疫血浆筛选的常规方法。 朱华松 周志军 尹斌 李健关键词:ELISA IHA 符合率 人破伤风类毒素特免血浆筛选试验中两种抗体检测方法的比较 应用酶联免疫法(ELISA)和间接血凝法(IHA)对1014份破伤风类毒素全程免疫后人血浆进行抗体水平检测,比较两者的收浆合格率,合格浆符合率以及与动物实验的相关性.结果表明两者收浆合格率均达80﹪.ELISA法与IHA... 朱华松 周志军 尹斌 李健关键词:破伤风类毒素 全程免疫 酶联免疫法 间接血凝法 文献传递 梅毒诊断用RPR纸片法试剂的制备和应用 1991年 当前梅毒病的普查和诊断使用最为广泛的非螺旋体抗原是 VDRL(Venereal Disease Resea-rch Laboratory)抗原以及由它改进而来的试剂,如 USR(Unheated Serum Reagin),RPR(Ra-pid Plasma Reagin CaM Test)。RST(ReaginScreen Test)等。国外大多采用 RPR 纸片法,因为它使用更为简便,可用肉眼观察结果而不需显微镜,试验纸片一次性使用,必要时可长期保存试验结果。 许旭初 朱华松 李琼芳关键词:梅毒诊断 RPR 纸片法 梅毒病 梅毒血清 二期梅毒 ELISA抗体检测试剂盒在狂犬病毒特免血浆筛选中的初步应用 被引量:8 2005年 用SepharoseCL6B纯化灭活的狂犬疫苗原液作为包被抗原,对试剂盒生产工艺进行优化,根据ELISA相对效价和SNT效价的正相关性,设计出能满足大规模狂犬病毒特异性免疫血浆筛选需要的合理可靠的收浆方案。 周志军 尹斌 朱华松 肖鼎昌 秦丽关键词:ELISA 病毒纯化 狂犬病毒抗体