方国源
- 作品数：8 被引量：18H指数：2
- 供职机构：中山医科大学更多>>
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- 支原体全DNA光敏生物素探针杂交方法的建立
- 1995年
- 支原体基因组全ＤＮＡ分子量较小，本研究直接制备肺炎支原体（ＭＦ），人型支原体（ＭＨ）和解脲脲原体（ＵＵ）中３个型ＳＵ１，ＳＵ４，ＳＵ８全ＤＮＡ光敏生物素探针，用斑点杂交鉴定表明探针可用于检测同种支原体，但３个型ＵＵ探针不能用于型别鉴定。探针检测灵敏度较一般片段ＤＮＡ探针灵敏度低，可能是由于前者分子量放大，降低了杂交速率和效率。直接提取全ＤＮＡ作光敏生物素标记，简化了探针制备过程，且无放射性损害及衰减，探针易于保存。
- 赖小敏方国源王传恩李彩霞
- 关键词：支原体属遗传学DNA探针核酸杂交
- 用自制全细胞抗原检测肺炎支原体抗体ABC-ELISA方法的建立及应用
- 1995年
- 用自制全细胞抗原建立了ABC－ELISA检测MP－IgG抗体方法，其敏感性高于常规ELISA和以美国产抗原建立的CF方法，特异性和重复性也好。应用该方法检测了62例来自广州市两家医院儿科肺炎住院儿童的血清和79例广州市某高校健康大学生体检血清．结果显示肺炎儿童组8例抗体阳性，占病例总数的12．9％，抗体最高滴度为1∶800，一般为1∶200～1∶400，其中有2例双份血清抗体滴度增高4倍或以上，且随着年龄的增长，抗体阳性例数和P／N比值均增高（有显著性差异，t检验分完。1为P＜0．005和P＜0．01）；大学生组50例抗体阳性，抗体最高滴度为1∶12800，一般为1∶1600～1∶3200。提示，在广州市儿童和大学生中存在MP感染；支原体过儿童肺炎占儿童肺炎病因一定比例。MP感染率和抗MPIgG抗体水平在儿童中有随年龄增长而逐渐增加的趋向。
- 赖小敏黄彩贤方国源李彩霞
- 关键词：ABC-ELISA肺炎支原体支原体肺炎
- 免疫印迹分析肺炎支原体抗原与抗体成分被引量：2
- 1995年
- 分别以ＭＰ国际标准株ＦＨ株和地方株北京８２株兔免疫血清对自制的ＦＨ株、北京８２株全细胞抗原和美国产ＣＦ抗原三种抗原作了免疫印迹分析。同时用以上三种抗原分析了６２例肺炎儿童血清和７９例健康大学生血清。结果表明ＭＰ的１７０ＫＤ和７１ＫＤ，还有２３ＫＤ多肽免疫原性较强，其中１７０ＫＤ多肽可能为ＭＰ的主要致病物质粘附因子Ｐ＿ｈ蛋白，自制ＦＨ株抗原与美国产ＣＦ抗原蛋白成分较为相似。
- 赖小敏黄彩贤方国源李彩霞
- 关键词：肺炎支原体抗原抗体免疫印迹技术
- 广州市某大学学生肺炎支原体感染的血清流行病学研究被引量：1
- 1989年
- 本文报道广州市某大学86年级新生自入学开始至1年半期间内,从先后三次健康检采集血清标本共1064份,应用微量补体结合试验测检其肺炎支原体(MP)抗体,阳性率第一次(1986.9)为者225名,血清的MP补结抗体阳性率(阳转率)分别为0.89%(2/225)、22.42%(50/223)和20.0%(35/175)。第二、三次血清MP补结抗体阳转率较第一次的阳性北有非常显著差异(P值<0.01)。提示该批大学生在入学一年半期间内,可能发生过MP感染的流行。
- 方国源黄彩贤麦卓雄黄婉贞李彩霞张柯佳
- 关键词：肺炎支原体
- 猪苓多糖、硒及红细胞对LAK细胞杀伤活性的影响被引量：7
- 2000年
- 目的 探讨猪苓多糖 (PUPS)、微量元素硒 (Se)及红细胞 (RBC)对LAK细胞杀伤活性的影响。方法 分离正常人外周血单个核细胞 (PBMC)在体外分别与不同浓度的PUPS、亚硒酸钠及红细胞单独或与IL 2协同诱导 ,以MTT法检测LAK细胞活性 ,用ELISA检测培养上清中TNF α和IFN γ含量。结果 不同浓度的PUPS和Se能单独诱导LAK细胞 ,与IL 2协同诱导的LAK细胞活性明显提高 ,细胞分泌的TNF和IFN浓度增高。RBC对LAK细胞的杀伤活性有明显地增强作用 ,并呈浓度依赖关系。结论 PUPS、Se及RBC对LAK细胞杀伤性有明显增强作用 ,细胞杀伤活性的提高可能与内源性TNF和IFN的产生增加有关。本研究为PUPS、Se及RBC与IL 2协同诱导细胞的研究和临床应用提供了理论依据。
- 王传恩方国源李彩霞
- 关键词：猪苓多糖红细胞杀伤细胞杀伤活性
- 全DNA光敏生物素探针杂交法检测支原体被引量：1
- 1996年
- 分别以人型支原体（ＭＨ）、解脲支原体（ＵＵ）三个血清型（ＳＵ１、ＳＵ４与ＳＵ８）全ＤＮＡ与等体积光敏生物素混合，用特种紫外光照射制备成探针。在分离培养的基础上，用上述全ＤＮＡ光敏生物素探针，对８２例非淋菌尿道炎病人标本作了检测，结果分离培养ＭＨ２２例，ＵＵ５５例；探针法检出ＭＨ２０例，ＵＵ５３例，两方法ＭＨ、ＵＵ阳性标本均有重叠，提示ＵＵ感染率较ＭＨ感染率高，且ＭＨ感染多数伴随在ＵＵ感染中。三型ＵＵ探针检测结果表明某一单型ＵＵ探针不能代替分离培养检测出所有型ＵＵ。
- 赖小敏方国源王传恩李彩霞
- 关键词：尿道炎解脲支原体核酸杂交光敏生物素
- PCR和分离培养同时检测儿童呼吸道感染的支原体
- 1998年
- 为了解广州市儿童呼吸道支原体感染情况，用一条共同的上游引物，二条特异性的下游引物建立的ＰＣＲ方法能同时扩增ＭＰ的６９１ｂｐ和ＭＧ的４３８ｂｐ粘附因子基因片段，但不会扩增其他支原体和细菌的ＤＮＡ。以ＰＣＲ和分离培养同时检测了１６２份呼吸道感染患儿的咽拭标本，结果ＰＣＲ检测到１２份阳性ＭＰＤＮＡ，阳性率为７４％；从１份阳性标本分离培养并克隆出１株ＭＰ。二方法均未检测到ＭＧ。提示在广州市呼吸道感染患儿中存在ＭＰ的感染，所检测的患儿无ＭＧ感染。
- 赖小敏方国源李彩霞王传恩佘桂源
- 关键词：呼吸道感染聚合酶链反应支原体
- PCR和分离培养检测细胞培养支原体污染的比较被引量：7
- 1999年
- 目的：检测细胞培养中支原体的污染，建立支原体通用的ＰＣＲ方法。方法：根据已出版的序列设计并合成一对支原体（柔膜体纲）１６ＳｒＲＮＡ基因组特异引物。对实验室所存的１２种支原体、大肠杆菌、变形杆菌及无支原体污染的组织培养细胞进行了ＰＣＲ扩增。以ＰＣＲ与分离培养比较检测了３３份细胞培养标本。结果：１２种支原体均出现了约６２０ｂｐ左右的特异性扩增带，敏感性为１００～１０００个支原体细胞，且常见的６种细胞培养污染支原体的扩增片段均能被ＨｉｎｄⅢ切成２８０与３４０ｂｐ左右的２条带。理论上推测这对引物可扩增所有支原体１６ＳｒＤＮＡ。但对大肠杆菌、变形杆菌及无支原体污染的组织培养细胞等未见有扩增带出现。在对３３份细胞培养标本的检测中，除ＰＣＲ和分离培养同时检出２份阳性外，前方法还另检出阳性３份。５份ＰＣＲ扩增物均被ＨｉｎｄⅢ切出２条带。结论：ＰＣＲ较分离培养敏感性高，可提高细胞培养污染支原体的检出率，防止出现假阴性结果；如做好质量控制，对于一般实验室检测细胞培养支原体污染。
- 赖小敏方国源李彩霞王传恩
- 关键词：细胞培养聚合酶链反应
