王传恩
- 作品数：27 被引量：136H指数：7
- 供职机构：中山大学中山医学院人体解剖学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部跨世纪优秀人才培养计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- bFGF对体外培养的新生鼠隔区和中脑神经前体细胞的作用被引量：4
- 1998年
- 本研究使用浓度为30ng/ml的bFGF,在不同的培养时间,观察其对新生大鼠隔区和中脑腹侧的神经前体细胞和神经元的影响,为克隆神经前体细胞探索最佳培养时间.实验分别在培养2天和5天时用MTT法测定细胞的OD值,并观察其形态变化.结果显示,在这2个时间点,所测的隔区和中脑的实验组OD值均明显高于对照组,而且实验组的OD值在培养第5天时也明显高于培养2天时间点,但对照组的结果则刚好相反.光镜观察到在培养5天时实验组的细胞集落数及体积不但比对照组的多和大,而且也比培养2天的多和大.本实验提示选用培养5天的集落作神经前体细胞的克隆较好.
- 谢瑶阮奕文王传恩李满枝姚志彬
- 关键词：BFGF神经前体细胞隔区中脑
- 人神经生长因子基因真核细胞表达载体的构建与鉴定被引量：2
- 1999年
- 目的：构建携带人神经生长因子（ｈ Ｎ Ｇ Ｆ） 基因的真核细胞表达载体，为应用 Ｎ Ｇ Ｆ 进行老年性痴呆（ Ａ Ｄ） 等疾病基因治疗打基础。方法：应用基因重组技术将ｈ Ｎ Ｇ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ 克隆到逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｘ Ｓ Ｎ 中，用限制性内切酶酶切分析重组质粒ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ 中ｈ Ｎ Ｇ Ｆ基因的插入方向，用 Ｐ Ｃ Ｒ、斑点杂交和 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交对重组质粒ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ 作进一步鉴定。结果：ｈ Ｎ Ｇ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ已正确地克隆到逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｘ Ｓ Ｎ 中，而构建成重组逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ。结论：真核细胞表达载体ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ 的成功构建，为进一步开展 Ｎ Ｇ Ｆ基因治疗 Ａ Ｄ 等中枢神经系统疾病奠定了基础。
- 王传恩阮奕文姚志彬谢瑶郭辉玉
- 关键词：神经生长因子真核细胞老年性痴呆基因治疗
- 大脑皮质机械性损伤诱导Nestin表达和神经前体细胞增殖被引量：27
- 1999年
- 目的：探讨皮质损伤后 Ｎｅｓｔｉｎ 的表达和神经前体细胞的增殖情况。方法：在立体定位仪上横切成年大鼠的大脑皮质和胼胝体，于术后１４ ｄ 和３０ ｄ 分别杀死动物。用 Ｎｅｓｔｉｎ 、 Ｇ Ｆ Ａ Ｐ免疫组化和 Ｎｉｓｓｌ 染色方法，观察损伤后神经前体细胞和反应性星形胶质细胞的反应模式。结果：损伤后，伤口周围的皮质、扣带和胼胝体出现大量的 Ｎｅｓｔｉｎ 阳性细胞，伤侧侧脑室室管膜下区（ Ｓ Ｖ Ｚ） 的神经前体细胞也分裂增殖。 Ｎｅｓｔｉｎ 在皮质的表达呈现一个以切口为中心的梯度反应模式并持续到术后３０ ｄ 。在分布上，神经前体细胞与反应性星形胶质细胞有部分重叠。结论：机械性大脑皮质损伤可诱导切口周围和侧脑室 Ｓ Ｖ Ｚ神经前体细胞增殖，后者可能对脑损伤后的修复起重要作用。
- 阮奕文王传恩童健尔姚志彬
- 关键词：NESTIN神经前体细胞巢蛋白
- 抗解脲脲原体单克隆抗体的制备被引量：1
- 1991年
- 作者用提纯的解脲脲原体抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞FO融合,获得3株稳定分泌抗解脲脲原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备了小鼠腹水抗体,并对杂交瘤细胞株进行了鉴定。用ELISA法测定该抗体腹水效价为1:64000～1:2048000,1F9、2B2抗体的Ig类型为IgG1,5H1为IgG2b。建立的3株能稳定分泌抗解脲脲原体的McAb杂交瘤细胞林,经液氮冻存后复苏,其分泌抗体能力不受影响。
- 王传恩林舜华何南祥
- 关键词：解脲脲原体杂交瘤单克隆抗体
- 眼镜蛇蛇毒因子与大鼠中性白细胞吞噬功能减退的量效研究被引量：3
- 1999年
- :研究中华眼镜蛇的蛇毒因子(CVF)与中性白细胞吞噬功能的量效关系及CVF在非协调性异种心脏移植应用中的意义。方法:①用不同剂量的CVF腹膜腔内注射(i.p.)SD大鼠,测定大鼠血液中性白细胞噬菌率;②经CVFi.p.处理后大鼠进行颈部豚鼠—大鼠异种心脏移植,然后测定移植前后大鼠不同时点的血液中性白细胞噬菌率。结果:①CVF能使大鼠血液中性白细胞噬菌功能减退,并呈量效关系;②经CVF处理的大鼠移植后无发生超急排斥反应(HAR),且血液中性白细胞噬菌率明显减退,至术后3d内仍未恢复。结论:①CVF有抑制中性白细胞噬菌功能,且呈量效关系;②CVF可抑制非协调性异种心脏移植的HAR,测定中性白细胞噬菌功能是一种简便测定CVF体内抗补体活性的方法。
- 区景松孙培吾王传恩
- 关键词：眼镜蛇毒液类中性白细胞心脏移植
- NGF/GDNF基因修饰神经干细胞移植对AD模型鼠行为学的疗效被引量：20
- 2002年
- 目的 观察NGF GDNF基因修饰神经干细胞 (NSC)单独和联合移植对AD模型鼠的学习记忆改善作用。 方法 单侧切断SD大鼠穹窿海马伞 (FF)制备AD模型鼠。术后 8～ 10d ,侧脑室移植基因修饰及未修饰的NSC。移植后 2周 ,进行Morris水迷宫行为学检测。 结果 NGF组和NGF +GDNF组的后 3个时间段的平均逃避潜伏期较损伤组和NSC组明显缩短 (P <0 0 1) ;平台象限游泳距离百分比明显增高 (P <0 0 1) ;GDNF组的平台象限游泳距离百分比高于NSC组 (P <0 0 1) ,但平均逃避潜伏期与NSC组无明显差异。 结论 NGF GDNF基因修饰NSC单独和联合移植对AD模型鼠的行为学有不同程度的疗效 ,其中NGF组和NGF +GDNF组疗效较好 ,但后者并未优于前者 。
- 阮奕文王传恩童建尔姚志彬
- 关键词：神经生长因子神经干细胞水迷宫
- NGF/GDNF基因修饰神经干细胞移植对AD模型鼠前脑胆碱能神经元的保护作用被引量：25
- 2002年
- 目的 观察NGF GDNF基因修饰神经干细胞 (NSC)单独和联合移植对穹窿海马伞 (FF)切断后胆碱能神经元的保护作用。 方法 将两种基因修饰的NSC单独和联合移植入FF切断的大鼠侧脑室。移植后 3周取脑行ChAT免疫组织化学染色 ,用Student NewmanKaels方法对内侧隔核 (MS)和斜角带垂直支 (VDB)的ChAT阳性细胞数 (损伤侧与正常侧的百分比 )进行计数分析。 结果 NGF组伤侧MS的ChAT阳性神经元数为 81% ,明显高于损伤组 (34% )、NSC组 (36 % )和GDNF组 (5 0 % ) ,P <0 0 1;NGF +GDNF组为 6 8% ,明显高于损伤组和NSC组 (P <0 0 1) ,亦高于GDNF组 (P <0 0 5 ) ;GDNF组与损伤组和NSC组相比 ,有统计学意义 (P <0 0 5 )。NGF组和NGF +GD NF组伤侧VDB的ChAT阳性神经元数分别为 80 %和 72 % ,明显高于损伤组 (5 6 % )和NSC组 (5 2 % ) ,P <0 0 1,亦高于GDNF组 (5 9% ) ,P <0 0 5 ;GDNF组与损害组和NSC组相比无明显差异 (P >0 0 5 )。 结论 NGF GDNF基因修饰NSC单独和联合移植均能不同程度地保护损伤的ChAT阳性神经元 ,NGF组和NGF +GDNF组作用较大 ,GDNF组作用较小。
- 阮奕文袁群芳王传恩姚志彬
- 关键词：神经营养因子神经干细胞乙酰胆碱酯酶
- 支原体全DNA光敏生物素探针杂交方法的建立
- 1995年
- 支原体基因组全ＤＮＡ分子量较小，本研究直接制备肺炎支原体（ＭＦ），人型支原体（ＭＨ）和解脲脲原体（ＵＵ）中３个型ＳＵ１，ＳＵ４，ＳＵ８全ＤＮＡ光敏生物素探针，用斑点杂交鉴定表明探针可用于检测同种支原体，但３个型ＵＵ探针不能用于型别鉴定。探针检测灵敏度较一般片段ＤＮＡ探针灵敏度低，可能是由于前者分子量放大，降低了杂交速率和效率。直接提取全ＤＮＡ作光敏生物素标记，简化了探针制备过程，且无放射性损害及衰减，探针易于保存。
- 赖小敏方国源王传恩李彩霞
- 关键词：支原体属遗传学DNA探针核酸杂交
- 当归芍药散加味方及其拆方对中老年大鼠淋巴细胞增殖的影响被引量：7
- 2003年
- 目的:研究当归芍药散加味方(DSS)及其拆方对中老年大鼠淋巴细胞功能的影响。方法:选用中老年大鼠(18月龄),分组灌服DSS全方及其拆方水煎液,3周后,各组大鼠脾细胞分别加入ConA、异丙肾上腺素(ISO)、心得安或DSS大鼠血清诱导淋巴细胞增殖,用四氮唑蓝比色法比较各组大鼠淋巴细胞增殖(A值)变化。结果:全方组、君臣药组、佐药组大鼠淋巴细胞增殖的A值与对照组比较,差异有显著性(P<0.01);加入ISO后全方组各ConA浓度A值明显减少(P<0.01),再加入心得安或DSS大鼠血清后,A值又恢复到未加ISO水平。结论:DSS及其拆方均可促进老年大鼠淋巴细胞增殖,DSS可拮抗ISO的抑制淋巴细胞增殖作用。
- 何宏文王传恩谢瑶姚志彬
- 关键词：拆方淋巴细胞增殖淋巴细胞增殖
- 体外培养获取高纯度神经前体细胞被引量：6
- 2000年
- 目的 获取较高纯度的神经前体细胞 (NPC)。方法 加入 30ng/mlbFGF培养E12天大鼠皮质、海马和隔区的NPC ,用免疫组化与免疫荧光组化方法将其显示。结果 加bFGF组的NPC不断分裂 ,形成大量的分裂球并维持到第 4代 ;绝大部分细胞 (约 98%以上 )表达Nestin ,约有 6 0 %为BrdU和Nestin免疫荧光双标阳性细胞。对照组的分裂球维持时间较短 ,随培养时间延长细胞向外迁移生长 ;第 2代约有 6 0 %细胞表达Nestin ,40 %为BrdU和Nestin免疫荧光双标阳性细胞。结论 bFGF对E12天大鼠脑组织的NPC有明显的促分裂作用 ,选用胎龄较小的胚脑组织加入适量的bFGF培养可获取较高纯度的NPC。
- 阮奕文谢瑶王传恩姚志彬
- 关键词：神经前体细胞碱性成纤维细胞生长因子体外培养
