张红 作品数:15 被引量:30 H指数:4 供职机构: 广西医科大学 更多>> 发文基金: 广西壮族自治区自然科学基金 广西教育厅科研项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
PPI1对人宫颈癌HeLa细胞紫杉醇敏感性的影响 2010年 目的探讨PPI1野生型和活化型突变体的表达对宫颈癌细胞株紫杉醇敏感性的影响。方法建立PPI1野生型和持续活化型突变体稳定表达的HeLa细胞株,用MTT实验、克隆形成实验、流式细胞术等方法观察转染PPI1的HeLa细胞对化疗药紫杉醇的敏感性,通过Western blot分析凋亡相关蛋白的表达及MAPK信号转导通路的活化情况。结果经紫杉醇处理后,PPI1持续活化型突变体的表达明显抑制HeLa细胞的增殖和克隆形成能力;该组细胞凋亡率及G2/M期细胞所占比例明显升高;Western blot分析表明,该组细胞促凋亡分子Bax的表达、Caspaes-3和Caspaes-8的活化及Bcl-2和p38的磷酸化程度明显增强。结论 PPI1持续活化型突变体的表达可明显增强HeLa细胞对紫杉醇的敏感性,其中涉及到Bax表达和Bcl-2磷酸化增强,Caspaes-3、Caspaes-8的活化增强和p38信号转导通路的活化增强。 曾麒燕 曾麟杰 黄勇奇 贺菽嘉 张红关键词:紫杉醇 细胞周期 信号转导 广西壮汉人群肥胖基因第一外显子的多态性分析 被引量:1 2003年 目的 :探讨广西肥胖症、非胰岛素依赖性糖尿病 (NIDDM)是否与肥胖基因突变有关 ,同时观察广西壮族汉族人群的肥胖基因 (ob基因 )多态性。方法 :将 2 96例研究对象分为三组 :肥胖 4 7例 ,NIDDM79例 ,对照组 170例 ,用 PCR法扩增各组 ob基因的第一外显子 ,再用改良的 SSCP法对 PCR扩增片段进行分析比较 ,并对异常扩增片段测序。结果 :广西壮族人 ob基因第一外显子存在多态性 A75→ T。结论 :ob基因第一外显子突变并非导致肥胖症。 曾麒燕 吴耀生 陈青云 罗佐杰 张红 朱其芳 林文珍关键词:肥胖基因 第一外显子 多态性分析 基因突变 PPI1诱导人宫颈癌HeLa细胞G2/M期停滞及机制研究 被引量:2 2008年 目的:探讨Ⅰ型磷酸酶抑制亚基1(PPI1)对人宫颈癌细胞系HeLa细胞周期的影响及其作用机制。方法:分别将PPI1野生型和短片段突变活化型基因通过脂质体介导转染人宫颈癌HeLa细胞,用RT-PCR和Western blot鉴定目的基因的表达;用流式细胞术分析瞬时转染HeLa细胞的细胞周期。对稳定转染的HeLa细胞用脱氧胸苷处理,通过流式细胞术观察PPI1对同步化HeLa细胞的细胞周期进展的影响。用免疫印迹分析细胞周期相关蛋白表达水平的变化。结果:野生型和突变活化型PPI1在HeLa细胞中均能有效表达。突变活化型PPI1基因的瞬时转染可使HeLa细胞G2/M期比例明显升高。经脱氧胸苷处理过的同步化的稳定转染的HeLa细胞中,突变活化型和野生型PPI1均可使HeLa细胞停滞在G2/M期的时间长于对照组,而且前者更明显。免疫印迹显示:突变活化型PPI1瞬时表达48h后,cyclin A、cyclin B1、p53和p21表达上调。经脱氧胸苷同步化并恢复正常培养基后,稳定表达突变活化型PPI1的细胞cyclin B1在10.5和12h,p53在6、7.5、9和10.5h表达明显增强;稳定表达野生型PPI1的细胞cyclin B1在10.5h的表达也比对照组明显增强。结论:突变活化型的Ⅰ型磷酸酶抑制亚基1可诱导宫颈癌HeLa细胞G2/M期停滞,它与cyclin A和cyclin B1表达上调及cyclin B1降解滞后有关,而G2/M期停滞的维持与p53和p21表达上调有关。 曾麒燕 黄毓 张红关键词:宫颈肿瘤 细胞周期蛋白质类 HELA细胞 广西地区汉族2型糖尿病血管并发症与血管紧张素转换酶Ⅰ基因多态性关系的研究 被引量:5 2002年 目的 探讨 2型糖尿病 (DM)及血管并发症与ACE基因插入 /缺失 (I/D)多态性的相关情况。方法 采用多聚酶链反应 (PCR)技术 ,对 12 0名广西地区汉族 2型DM组及 10 0名汉族正常对照组ACE基因I/D多态性进行检测。结果 2型糖尿病肾病 (DN)组ACE基因D等位基因及DD基因型频率高于正常对照组 ,Ⅰ等位基因及Ⅱ基因型频率低于正常对照组 ;2型DM合并冠心病 (CHD)组ID基因型频率高于无CHD组 ,Ⅱ型基因频率低于无CHD组。 2型DM并视网膜病变 (DR)组ACE基因各等位基因及基因型频率与无DR组及正常对照组比较无统计学意义 ;2型DM并高血压组 (HP)ACE基因各等位基因及基因型频率与无HP组及正常对照组比较无统计学意义。结论 ①广西地区汉族 2型DM合并DN及合并CHD与ACE基因I/D多态性有关 ;②DD基因型及D等位基因可能为 2型DM合并DN的易感基因 ,Ⅱ型及Ⅰ型等位基因可能为 2型DM合并DN的保护基因 ;ID型基因可能为 2型DM合并CHD的易感基因 ,Ⅱ型基因可能为 2型DM合并CHD的保护基因。③广西汉族 2型DM合并HP及合并DR与ACE基因I/D多态性无关联。 廖蕴华 冼苏 罗佐杰 孙安远 郭谊 张红 陈宇明关键词:聚合酶链反应 汉族 血管并发症 基因多态性 Ⅰ型磷酸酶抑制亚基-1对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响 被引量:6 2007年 背景与目的:Ⅰ型磷酸酶抑制亚基-1(inhibitor-1 of protein phosphataseⅠ,PPI1)依赖于35位苏氨酸的磷酸化而发挥抑制作用。本研究目的在于观察PPI1野生型和持续活化型突变体的表达对宫颈癌细胞株的凋亡及凋亡刺激敏感性的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法:通过Lipofectamine介导,用PPI1野生型和持续活化型突变体表达质粒分别转染HeLa细胞,以未转染的及转染空载体的HeLa细胞为对照组,用RT-PCR和Western blot鉴定目的蛋白的表达;通过克隆形成实验观察PPI1对细胞克隆形成能力的影响,用Hoechst33258荧光染色、亚二倍体分析法分析PPI1对HeLa细胞凋亡的影响,用流式细胞术分析转染PPI1后的HeLa细胞对肿瘤坏死因子(tumor-necrosis factor,TNF)凋亡刺激的敏感性,用Western blot分析PPI1对凋亡相关蛋白表达及MAPK信号转导通路的影响。结果:PPI1野生型和持续活化型突变体在HeLa细胞中能够有效表达。荧光染色和亚二倍体分析均表明PPI1持续活化型突变体的表达使细胞凋亡增多,并能明显抑制HeLa细胞的克隆形成能力。Western blot分析表明,PPI1持续活化型突变体可使促凋亡分子P53、P27、BAK表达上调,而抗凋亡分子Bcl-2和Bcl-xL的表达下调。流式细胞术分析表明PPI1持续活化型突变体表达的HeLa细胞在TNF-α刺激后细胞凋亡率为19.06%,而对照组为2.67%和1.89%。Westernblot分析表明,TNF刺激后,在JNK信号转导通路中,该组细胞JNK的磷酸化程度比对照组明显增强,而且持续的时间也较长;对于p38信号转导通路,则在TNF刺激30min后,p38出现磷酸化,而其他组均无。结论:PPI1持续活化型突变体的表达可诱导宫颈癌细胞株的凋亡,并能明显增强HeLa细胞对TNF凋亡刺激的敏感性,其中涉及到JNK、p38信号转导通路的活化增强。 曾麒燕 秦雪 张红关键词:HELA细胞 细胞凋亡 信号转导 肿瘤坏死因子 2型糖尿病合并高血压与血管紧张素转化酶I基因多态性的相关性及其脂质代谢的研究 被引量:8 2002年 目的 :探讨广西汉族 2型糖尿病 (DM)合并高血压与 ACE基因 I/ D多态性的相关情况及其与血脂代谢的关系。方法 :采用多聚酶链反应 (PCR)技术 ,对 81例广西地区汉族 2型 DM无合并高血压患者和 39例 2型 DM合并高血压患者及 10 0名汉族正常对照的 ACE基因插入 /缺失 (I/ D)多态性及血脂进行检测。结果 :2型 DM合并高血压组 ACE基因各等位基因及基因型频率与正常对照组及无合并高血压组比较均无统计学意义 (P >0 .0 5 )。 2型 DM合并高血压 DD基因型组及 ID基因型组甘油三酯 (TG)、总胆固醇 (TC)及低密度脂蛋白胆固醇 (L DL- C)高于正常组 ,高密度脂蛋白胆固醇 (HDL- C)低于正常组 (P<0 .0 5 ) ;II基因型组 TG、TC及 L DL- C低于 DD基因型组及 ID基因型组 (P <0 .0 5 ) ,与正常组对照组比较无统计学意义 ,HDL - C高于 DD基因型组及 ID基因型 (P <0 .0 5 ) ;ID基因型组 TG高于正常组、DD基因型组及 II基因型组 (P <0 .0 5 )。结论 :广西地区汉族 2型 DM合并高血压与 ACE基因 I/ D多态性无关联。 2型 DM合并高血压 DD基因型及 ID基因型者与正常人比较更易患高甘油三酯血症、高总胆固醇血症及高低密度脂蛋白胆固醇血症 ,II基因型者不易患高脂血症 ; 冼苏 廖蕴华 罗佐杰 郭宜 张红 陈宇明 邓有辉 凌影豫关键词:2型糖尿病 高血压 多态性 脂质代谢 聚合酶链反应 2型糖尿病合并冠心病与血管紧张素转化酶I基因多态性的相关性及脂质代谢的研究 被引量:1 2002年 目的 :探讨 2型糖尿病 (DM)合并冠心病 (CHD)与血管紧张素转化酶 I(ACE)基因插入 /缺失 (I/ D)多态性的相关性及其各基因型血脂代谢情况。方法 :采用多聚酶链反应 (PCR)技术 ,对 32例广西地区汉族 2型 DM合并 CHD患者 ,88例 2型DM无合并 CHD患者及 10 0名汉族正常对照的 ACE基因 I/ D多态性及血脂进行检测。结果 :2型 DM合并 CHD组 ACE基因 D等位基因及 ID基因型发生频率高于正常对照组及无合并 CHD组 (P <0 .0 5 ) ;I等位基因及 II基因型频率低于正常对照组及无合并 CHD(P <0 .0 5 )。 2型 DM合并 CHD组 ID基因型组甘油三酯 (TG)及总胆固醇 (TC)高于正常对照组、DD基因型组及 II基因型组 ,高密度脂蛋白胆固醇 (HDL- C)低于正常对照组 ,低密度脂蛋白胆固醇 (L DL- C)高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ;2型 DM合并 CHD DD基因型组 TG、L DL- C及 TC高于正常对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :1广西地区汉族 2型 DM合并 CHD与 ACE基因 I/ D多态性有关。 2 D等位基因及 ID基因型可能为 2型 DM合并 CHD的易感基因 ,I等位基因及 II基因型可能为 2型 DM合并 CHD的保护基因。 3广西地区汉族 2型 DM合并 CHD的 ID基因型者及 廖蕴华 冼苏 罗佐杰 陈宇明 郭谊 黎伟 张红 邓有辉 凌影豫关键词:2型糖尿病 冠心病 多态性 脂质代谢 PPI1在裸鼠体内抑制人宫颈癌细胞HeLa生长的研究 被引量:3 2014年 探讨PPI1基因在裸鼠体内对人宫颈癌细胞生长的抑制作用。首先将稳定表达PPI1野生型和突变活化型基因的人宫颈癌细胞HeLa进行裸鼠体内致瘤,观察PPI1对肿瘤生长的影响;其次构建野生型HeLa细胞宫颈癌裸鼠模型,通过在体电脉冲技术,将PPI1野生型和突变活化型基因导入瘤体内进行基因治疗,观察裸鼠的存活情况;FACS分析移植瘤的细胞周期分布;免疫组化法检测移植瘤中的PPI1、cyclin B1、p53和p21的表达水平。在致瘤实验中,稳定表达PPI1突变活化型基因的HeLa细胞组的瘤结节生长缓慢,瘤结节明显小于对照组;在基因治疗实验中,PPI1突变活化型基因治疗组的裸鼠生存期明显延长,瘤组织中的肿瘤细胞呈现G2/M期停滞,cyclin B1和p21的表达水平明显增强,而突变型p53的表达明显减弱。PPI1活化型突变体对裸鼠HeLa移植瘤生长有明显的抑制作用。 黄毓 曾麟杰 张红 廖志红 曾麒燕关键词:抑制增殖 裸鼠移植瘤 基因治疗 体外受精—胚胎移植后异位妊娠的相关因素分析 一.研究目的 通过对IVF-ET助孕妊娠后发生异位妊娠的患者与正常宫内继续妊娠的患者的诊疗资料进行对比分析,寻找出影响IVF/ICSI周期中发生异位妊娠相关因素,用以指导临床改善IVF/ICSI-ET周期妊娠结局。 二.... 张红关键词:体外受精-胚胎移植 异位妊娠 输卵管因素 激素水平 文献传递 酶标白桂木凝集素糖蛋白结合特性的分析 被引量:5 2000年 采用辣根过氧化物酶 ( HRP)标记白桂木凝集素 ( AHL) ,应用酶联夹心法及糖竞争抑制实验 ,研究 AHL的糖蛋白结合特性 .研究表明 ,AHL能与两种不同类型的糖蛋白结合 ,一类以胃蛋白酶为代表 ,AHL能以高亲和力与胃蛋白酶结合 .其次能与β-乳球蛋白、牛血清清蛋白结合 ,但结合力依次递减 .AHL也能与透明质酸以较高亲和力相结合 .AHL与胃蛋白酶、β-乳球蛋白、牛血清清蛋白、透明质酸的结合受 Me- Gal的强烈竞争抑制 ,亦受 Me- Man\D- Gal\Raf的抑制 .另一类为Con A,AHL与 Con A的结合受 Me- Man的强烈竞争抑制 ,并受 Me- Glc\D- Man\D- Fru\D- Glc的较强抑制 .各种糖的封闭性抑制实验结果与竞争性抑制实验相似 .提示 AHL上存在 O-糖苷键结合位点 . 吴耀生 张红 周素芳 邓勇 周德义 林文珍关键词:糖蛋白