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唐深: 作品数：67 被引量：128H指数：6; 供职机构：广西医科大学基础医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>; 相关领域：医药卫生文化科学生物学理学更多>>

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锰铅镉复合暴露对人神经母细胞瘤细胞的毒性作用被引量：2: 2019年; 目的探索重金属复合暴露对人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞的毒性效应。方法将SK-N-SH细胞分别暴露于空白培养基(对照)和氯化锰(125、250、500、750、1000、1500、2000、4000、6000μmol/L),乙酸铅(500、750、1000、1500、2000、2500、3000μmol/L),氯化镉(5、10、15、20、30、40、60、80μmol/L)单一及二元、三元复合溶液24、48、96 h后,检测细胞存活率,计算锰、铅、镉的药物抑制浓度(IC)。其中,二元、三元复合溶液的浓度均为相应金属IC10、IC20、IC30、IC50的等毒效应比混合,分别用毒性单位法、混合毒性指数法对毒性效应进行评价。结果与对照组相比,不同浓度锰、铅、镉单独染毒不同时间SK-N-SH细胞的存活率均较低,除500μmol/L铅染毒24、96 h组和5μmol/L镉染毒24、48 h组外,差异均有统计学意义(P<0.05);随着锰、铅、镉单独染毒浓度的升高和染毒时间的延长,SK-N-SH细胞的存活率均呈下降趋势。三种金属对SK-N-SH的细胞急性毒性依次为镉(IC50:38.728μmol/L)>锰(IC50:442.739μmol/L)>铅(IC50:1624.850μmol/L)。同一金属不同染毒时间的IC50排序均为96 h<48 h<24 h。锰和镉复合暴露对SK-N-SH细胞的联合毒性在24 h均表现为拮抗作用,在48 h均表现为协同作用;96 h在毒效应为IC10、IC20时均表现为部分相加作用,在IC30、IC50时均表现为协同作用。镉和铅对SK-N-SH细胞的联合毒性在24 h毒效应为IC10、IC20、IC30时均表现为拮抗作用,在IC50时表现为部分相加作用;在48 h毒效应为IC10时表现为拮抗作用,在IC20、IC30、IC50时均表现为部分相加作用;在96 h时均表现为部分相加作用。铅和锰对SK-N-SH细胞的联合毒性在24、96 h毒效应为IC50时分别表现为简单相加、协同作用,其余均表现为部分相加作用。锰、铅、镉对SK-N-SH细胞的联合作用在24、96 h时均表现为部分相加作用;48 h时在IC10、IC20、IC30均表现为协同作用,在IC50时表现为部分相加作用。结论�; 徐怡璐吴彬石倩倩韦兰成敖青青孟玲韦雪静李习艺唐深王新航陆彩玲; 关键词：锰联合毒性效应神经毒性 SK-N-SH细胞

输尿管热损伤后TGF-β亚型及α-SMA表达的实验研究被引量：1: 2019年; 目的探讨输尿管钬激光损伤后瘢痕形成相关因子(TGF-β亚型及α-SMA)的表达情况。方法采用定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定正常兔输尿管以及钬激光损伤后兔输尿管TGF-β亚型(TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3)及α-SMA的表达水平,并进行统计学分析。结果与正常兔输尿管比较,钬激光损伤兔输尿管3周后TGF-β1、TGF-β2及α-SMA表达量明显增高(P<0.05),而两组TGF-β3表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论钬激光输尿管热损伤导致TGF-β亚型及α-SMA表达发生变化,与输尿管瘢痕形成及狭窄发生密切相关。; 刘昕孙毅海唐深陶卫琦李少红黄才胜黄超斌黄慧宁谢阳; 关键词：输尿管 Α-SMA

PP2Ac去甲基化在BaP诱导HBE细胞恶性转化中的作用被引量：1: 2019年; 目的探讨蛋白磷酸酶2A催化亚基(PP2Ac)去甲基化在苯并(a)芘(benzo[a]pyrene,BaP)诱导人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial,HBE)恶性转化中的变化及可能作用。方法用40μmol/L BaP处理人支气管上皮细胞,每周一次,共15周,构建BaP诱导的HBE细胞恶性转化模型,采用软琼脂试验和裸鼠成瘤试验鉴定恶性转化是否构建成功,使用蛋白免疫印迹(Western blot)分析比较恶性转化细胞和同期对照组细胞中PP2Ac去甲基化及其调节蛋白表达变化。结果软琼脂试验和裸鼠成瘤试验结果显示,经BaP处理后的细胞能在软琼脂中形成细胞集落,接种BaP诱导转化细胞的裸鼠可见肿块,说明恶性转化成功。蛋白免疫印迹(Western blot)检测蛋白表达发现,经BaP诱导恶性转化的HBE细胞和经100μmol/L BaP单次刺激24 h的HBE细胞与正常HBE细胞相比,总PP2Ac表达均无差异,亮氨酸羧基甲基转移酶1(LCMT1)表达均明显下降,蛋白磷酸酶甲基酯酶1(PME-1)和PP2Ac去甲基化(Dem-PP2Ac)表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PP2Ac去甲基化在BaP诱导细胞恶性转化中发挥作用,可能通过增强PP2Ac去甲基化促进BaP致肺癌发生。; 敖青青韦雪静王新航梁紫微李韵晴张宁陈慕婷陆彩玲唐深黄海燕李习艺; 关键词：人支气管上皮细胞

白脂素包涵体表达纯化及其功能评价: 2020年; 目的构建白脂素的原核表达质粒,表达及纯化重组白脂素蛋白,并初步探索其功能,为进一步研究白脂素作用机制及其生理病理作用提供依据。方法利用基因工程技术构建表达白脂素BL21菌株,经异丙基硫代半乳糖苷诱导,梯度尿素复性,亲和层析纯化及去内毒素处理得到可用于细胞和动物实验的重组白脂素。采用血糖仪检测重组白脂素腹腔注射后C57小鼠血糖变化情况。Alamar Blue检测重组白脂素作用24 h对MIHA细胞活性的影响;重组白脂素刺激MIHA细胞24 h,用蒽酮法检测糖原含量。结果在37℃,A600 nm=0.8,IPTG终浓度为1 mmol/L诱导4 h目的蛋白表达效果较好。通过纯化和去内毒素处理,重组白脂素纯度大于95%,内毒素含量小于1 EU/mg,可以用于动物与细胞实验。腹腔注射重组白脂素60 min后C57小鼠血糖升高至峰值(重组白脂素组vs对照组P=0.021),120 min恢复到正常水平(重组白脂素组vs对照组P=0.03)。重组白脂素刺激MIHA细胞24 h,对细胞活性没有影响;检测糖原发现,不同浓度白脂素组糖原与对照组比较差异有统计学意义(P1=0.013,P2=0.036,P3=0.011)。结论通过原核表达系统成功表达及纯化了白脂素蛋白,该方法纯化后的白脂素具有降低MIHA细胞糖原含量及升高小鼠血糖的作用,这为白脂素功能的进一步研究提供了理论依据。; 韦雪静敖青青孟玲徐怡璐陆彩玲陆彩玲唐深李习艺; 关键词：包涵体糖原分解血糖

锰对神经细胞超微结构的影响被引量：5: 2004年; 目的为探讨锰(Mn)神经毒性的作用机制,利用原代培养的神经细胞模型,探讨不同浓度Mn对神经细胞超微结构的影响。方法新生Wistar大鼠大脑皮层神经细胞原代培养,不同浓度Mn染毒,以MTT试验结果作细胞存活曲线。选取3个MTT试验结果差异有显著性差异的点值设定染Mn的低、中、高剂量组,透射电镜观察各组超微结构改变。结果01mmolL染Mn24h神经细胞存活率与对照组比较,差异无显著性,04～8mmolL染Mn后24h神经细胞存活率明显下降且存在剂量反应关系。以01、04、1mmolL为染Mn低、中、高剂量组,透射电镜显示各剂量组超微结构改变特征不同。低剂量组见粗面内质网增生,中剂量组以胞核改变最为明显,高剂量组以溶酶体改变为主。结论Mn在体外可剂量依赖性地引起神经细胞死亡,不同浓度Mn作用引起细胞超微结构改变的特征不同。; 李习艺郭松超唐深陈维平邝晓聪; 关键词：锰神经细胞细胞存活超微结构

牛磺酸影响人外周血T淋巴细胞增殖及分化功能的体外研究被引量：1: 2023年; 目的:研究牛磺酸(Tau)对人外周血T淋巴细胞体外活化增殖及分化的影响及其作用机制。方法:无菌分离健康志愿者外周血淋巴细胞,建立植物凝集素(PHA)刺激T细胞体外活化增殖模型。实验设置对照组(control组)、PHA刺激组(PHA5μg/mL组)及Tau处理组(PHA+Tau 80 mmol/L组、PHA+Tau 160 mmol/L组)。细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测T淋巴细胞增殖率;瑞—吉染色法观察细胞形态及计算转化率;实时荧光定量PCR检测T细胞增殖标志物Ki67,Th1转录因子T-bet及细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),Th2转录因子GATA-3及白介素-4/6(IL-4/6),凋亡相关因子Fas、FasL基因表达水平;活性氧(ROS)试剂盒检测细胞内ROS水平。结果:与control组相比,PHA 5μg/mL组T淋巴细胞转化率、增殖率、增殖标志物Ki67、Th1相关因子T-bet、IFN-γ、TNF-α、凋亡相关因子Fas基因表达及胞内ROS水平升高(P<0.05),凋亡相关因子FasL基因,Th2相关因子GATA-3、IL-6基因表达水平降低(P<0.05)。与PHA 5μg/mL组相比,PHA+Tau 80 mmol/L组与PHA+Tau 160 mmol/L组T淋巴细胞转化率、增殖率、Ki67基因表达及胞内ROS水平均下降(P<0.05),Th2相关因子IL-4、IL-6基因表达水平均升高(P<0.05),Th1相关因子IFN-γ、FasL基因表达水平差异均无统计学意义(P>0.05),PHA+Tau 80 mmol/L组Th1相关因子T-bet、TNF-α、Th2相关因子GATA-3及Fas基因表达水平差异无统计学意义(P>0.05),PHA+Tau 160 mmol/L组Th1相关因子T-bet、TNF-α、Th2相关因子GATA-3及Fas基因表达水平升高(P<0.05)。结论:Tau可能通过下调Ki67表达和增强Fas-AICD途径抑制T细胞增殖转化,并可能通过降低胞内ROS含量,提高Th1/Th2活化水平,调节Th1/Th2平衡偏向Th1分化,发挥调节T淋巴细胞活化增殖及分化的作用。; 孔星星蓝利袁江浪陈成英王新航刘彧冰李菡陆彩玲李习艺唐深; 关键词：牛磺酸 T淋巴细胞增殖 TH1/TH2分化

创新能力的培养是教学改革的重要任务: 2001年; 冷静唐深; 关键词：教学改革创造性思维知识经济时代培养创新能力应试教育

研究生重新开设免疫学实验课的几点体会: 2004年; 唐深肖庆樊晓晖; 关键词：免疫学实验同学实验课示教

组织蛋白酶B在化疗药物Etoposide作用后肝癌细胞中表达的研究被引量：1: 2007年; 目的初步探讨组织蛋白酶B(CB)在化疗药物Etoposide作用后肝癌细胞中的表达及其意义。方法MTT法检测不同浓度(0~600μg/ml)Etoposide作用24h后HepG2细胞存活率,琼脂糖电泳法检测细胞凋亡DNA片段化,荧光定量PCR检测CB表达水平。结果不同浓度(2.4~600μg/ml)Etoposide作用HepG2细胞24h后细胞存活率显著下降,且与药物浓度呈负相关(R=-0.81,P=0.00);琼脂糖电泳法检测细胞凋亡DNA片段化未见典型梯状条带,CB表达水平增加(2.8±0.43)^(3.91±0.02)倍,与对照组比较差异有统计学意义(P=0.00),并与细胞存活率呈负相关(r=-0.94,P=0.00)。结论CB在Etoposide作用后HepG2细胞表达增高,提示药物治疗后有可能通过激活CB表达而促进残留肿瘤细胞的侵袭和转移。; 唐深肖庆樊晓晖; 关键词：组织蛋白酶B HEPG2 荧光实时定量PCR 肝癌细胞

海马组织蛋白不同染色方法的比较被引量：1: 2013年; [目的]通过实验,比较不同染色方法对海马组织蛋白质双向凝胶电泳(2-dimensional gel electrophoresis,2-DE)分离效果的影响,为类似的海马组织蛋白分离研究提供参考。[方法]分离、制备大鼠海马组织总蛋白样品并进行蛋白定量,不同含量海马蛋白质经2-DE分离后分别采用改良考马斯亮蓝染色、硝酸银染色法,中浓度上样量的的凝胶经考马斯亮蓝染色后也用考马斯亮蓝-硝酸银进行复染,比较不同染色方法对2-DE分离效果的影响。[结果]不同染色方法随上样量增加,所见蛋白斑点增加,干扰物质也增加。在本研究条件下,700μg上样量采用硝酸银染色效果最佳,考马斯亮蓝则显示1800μg上样量效果更优。1200μg考马斯亮蓝-硝酸银复染的效果较单独考染效果好。[结论]硝酸银染色较改良考马斯亮蓝更敏感,凝胶所见蛋白质斑点更多,考马斯亮蓝-硝酸银复染效果较单独改良考马斯亮蓝好。; 陆彩玲唐深刘楠楠黄玲李习艺郭松超; 关键词：蛋白质组学海马染色

唐深

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