刘红
- 作品数：16 被引量：49H指数：4
- 供职机构：汕头大学医学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 阴道毛滴虫衰老相关基因Tv-Sir2-like克隆与序列分析被引量：5
- 2004年
- 目的 :克隆单细胞模式生物阴道毛滴虫 (Tv)Sir2基因 ,以便探讨其功能。方法 :构建TvcDNA表达文库 ,筛选出Tv_Sir2_like基因 ,并对该基因进行序列分析。结果 :成功克隆Tv_Sir2_like基因。测序及序列分析显示 ,Tv_Sir2_like基因开放读码框长 1116bp ,编码 3 71个氨基酸残基的蛋白质。该氨基酸序列与SIR2的同源性最高 ,并具有SIR2 3个特征性的高度保守结构域。结论 :推测Tv_Sir2_like是Sir2的同源基因 ,其表达产物可能参与Tv转录沉默 。
- 张可浩傅玉才章家新刘红
- 关键词：阴道毛滴虫E基因衰老相关基因CDNA表达文库
- 新生大鼠卵母细胞凋亡信号通路SCF-FOXO3a的体外实验研究被引量：4
- 2009年
- 目的:研究FOXO3a(forkhead box group O)转录因子是否参与调控哺乳动物卵巢中裸露卵母细胞和原始卵泡内卵母细胞的凋亡。方法:体外分离培养新生大鼠卵母细胞巢和原始卵泡内的卵母细胞,干细胞因子(stem cell factor,SCF)单独或与磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)抑制剂LY 294002联合作用于卵母细胞,TUNEL法凋亡染色观察卵母细胞凋亡状况;RT-PCR、Western blotting检测FOXO3a及其下游靶分子与卵母细胞凋亡的关系。结果:SCF不影响卵母细胞FOXO3a总蛋白表达水平,但使其磷酸化水平增加,从而抑制了卵母细胞凋亡;LY 294002可完全阻断上述效果。SCF使FOXO3a的靶基因Bim和p27kip1表达下调,此作用同样可被LY 294002逆转。结论:FOXO3a和其下游靶基因Bim及p27kip1可能参与了SCF信号通路对新生大鼠卵母细胞的凋亡调控。
- 罗丽莉刘红钱元恕许锦阶张仁利傅玉才
- 关键词：新生大鼠FOXO3A
- 原生动物阴道毛滴虫的酵酶长寿保障基因LAG1同源基因克隆和序列分析(英文)被引量：3
- 2004年
- 为了探讨寄生性原虫阴道毛滴虫细胞生长和衰老相关基因 ,作者从阴道毛滴虫的cDNA表达文库中分离出一具 91 0碱基对的cDNA克隆 ,其编码框长 834bp ,推测蛋白质序列有 2 77个氨基酸。序列分析显示该克隆与酵酶长寿保障基因LAG1同源性最高 ,其氨基酸序列中含有LAG1及其同源基因保守的Lag1结构域和TLC结构域以及 6个跨膜螺旋区和一个C 未端的内质网保留信号域。因此推测该克隆系酵酶LAG1的同源基因 ,该基因可能参与阴道毛滴虫的神经酰胺生物合成以及调解细胞的生命期或细胞衰老。该基因的基因组DNA与其cDNA序列一致 。
- 傅玉才徐虹刘红张可浩林晖榕
- 关键词：原生动物阴道毛滴虫DNA克隆
- 一种新的阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因(英文)被引量：3
- 2004年
- 目的铁氧还蛋白系铁硫蛋白,在多种反应体系中起着传递电子的作用,也参与抗滴虫药物甲硝咪唑杀虫作用的激活。本研究旨在克隆和分析阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因,以便进一步探讨其生理功能。方法构建阴道毛滴虫cDNA表达文库,分离cDNA进行克隆、测序及序列分析。结果在分离出的cDNA克隆中发现一个新的铁氧还蛋白基因。该基因读码框全长312bp,相应蛋白质序列具103个氨基酸;在该蛋白质前体的N端带有10个氨基酸残基的氢酶体靶片段(MLSQCSPLRF)。序列分析显示该铁氧还蛋白(TvFd2)与已报道的阴道毛滴虫铁氧还蛋白(TvFd)有高度同源性(69%);TvFd2与铁氧还蛋白(2Fe-2S)的两大亚类(氧化酶铁氧还蛋白和光合铁氧还蛋白)均具较低的同源性;可与(2Fe-2S)结合的4个半胱氨酸排列成典型的铁氧还蛋白保守序列(-C-X5-C-X2-C-Xn-C-)。结论分析表明TvFd2是一新的阴道毛滴虫铁氧还蛋白,其功能有待进一步研究。
- 傅玉才徐虹章家新张可浩刘红林晖榕郑晓虹
- 关键词：阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因克隆
- 阴道毛滴虫Rac1蛋白的cDNA克隆和序列分析(英文)被引量：1
- 2004年
- 目的 获得阴道毛滴虫Rac1蛋白的cDNA克隆 ,研究其在细胞周期中的调解作用。 方法 提取阴道毛滴虫总RNA ,构建cDNA表达文库 ,随机分离cDNA克隆并测序。用在线生物分析软件NCBIBLAST、ClustalW以及Treeview等程序进行序列分析。 结果 获得一株有 714bp的cDNA克隆。序列分析表明 ,该克隆开放阅读框具 60 0bp ,推测肽链具 2 0 0个氨基酸。该肽链与Rho家族中Rac1鸟苷三磷酸 (GTP)酶同源性最高 (>60 % ) ,并具多种RhoGTP酶的保守基序 ,如GTP结合部位、GTP酶激活蛋白作用基序、GTP分离抑制因子作用基序、鸟嘌呤核苷酸交换因子作用基序等。进化树分析显示该克隆属于Rac亚家族GTP酶 ,与原虫Rac1蛋白最接近。 结论 该克隆属RhoGTP酶的Rac亚家族 ,很可能是阴道毛滴虫的Rac1蛋白。
- 傅玉才章家新郑晓虹刘红
- 关键词：阴道毛滴虫L蛋白CDNA克隆GTP酶酶激活NCBI
- 阴道毛滴虫cDNA文库的构建和鉴定被引量：20
- 2003年
- 目的 :构建阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis,Tv)全长cDNA表达文库 ,筛选全长目的基因 ,研究与其细胞周期相关基因的结构和功能。方法 :从Tv中提取总RNA ,用ClonTech公司的SMARTTMcDNA文库试剂盒构建其全长cDNA表达文库。结果 :所建文库的初始滴度为6 78× 10 6 pfu mL ,经一次扩增后的滴度为 1 6 8× 10 9pfu mL ,重组率 >98%。结论 :成功构建Tv全长cDNA文库 。
- 章家新傅玉才郑晓虹刘红
- 关键词：阴道毛滴虫CDNA文库文库构建
- 应用抑制性消减杂交在阴道毛滴虫筛选热卡限制相关差异表达基因(英文)
- 2005年
- 热卡限制能使众多实验动物的寿命延长,而且它是唯一延缓哺乳动物衰老的途径。我们用原生动物阴道毛滴虫建立了热卡限制模型。在此研究体系中,该原生动物细胞周期在热卡限制的培养条件下较糖充足的培养条件下延长80%。本研究运用抑制性消减杂交的方法,以期筛选在两种培养条件下差异表达的基因,并从2个cDNA消减杂交文库中分离到15个克隆。经序列分析表明,有9个未知基因,6个已知基因。
- 刘红傅玉才张可浩许铭炎罗丽莉
- 关键词：消减杂交阴道毛滴虫抑制性消减杂交毛滴虫阴道原生动物
- KL与其受体Kit在不同发育阶段大鼠卵巢卵泡中的表达研究被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨KL(kitligand)与Kit蛋白在各年龄段大鼠卵巢组织的各种细胞中的表达。方法:分别取1d、2d、4d、8d、16d、3个月、12个月龄大鼠卵巢,制备组织切片,用免疫组织化学技术观察KL及Kit蛋白在各年龄段大鼠卵巢组织各种细胞中的表达状况。结果:在实验观察期,大鼠卵巢中KL在部分早期原始卵泡和原始卵泡的卵母细胞中表达,在初级卵泡以后各级卵泡的卵母细胞中均表达,而各级卵泡的颗粒细胞均不表达。在性成熟前,随着卵巢的发育KL逐渐出现在卵巢膜细胞和间质细胞中;性成熟后卵巢的间质细胞、卵泡膜细胞、卵巢膜上皮细胞以及黄体细胞均表达大量的KL蛋白。在实验观察的各年龄段大鼠卵巢中从早期原始卵泡到窦状卵泡的卵母细胞均表达Kit蛋白,但表达量随卵泡的发育逐渐减弱;随着卵巢的发育,Kit蛋白逐渐出现在卵巢的膜上皮细胞、卵泡膜细胞和间质细胞中;Kit也在黄体细胞中表达。在一些初级卵泡至窦状卵泡的少数颗粒细胞中也观察到Kit蛋白表达。结论:KL蛋白在各级卵泡的卵母细胞中表达,在颗粒细胞中不表达,KL与其受体Kit都在卵母细胞中表达,这些结果提示卵母细胞的生长可能受自身KL-Kit信号的调节。
- 罗丽莉黄菊隋旭霞刘红傅玉才
- 关键词：KIT卵巢
- 染料木素对成年及老年大鼠卵巢发育的影响被引量：8
- 2009年
- 目的探讨染料木素对中年、早期老年大鼠卵泡发育的影响。方法用染料木素对4和10个月龄大鼠进行灌胃[160mg/(kg.d)],连续用药4周后处死,分别取染料木素灌胃组(试验组)和对照组大鼠双侧卵巢,用苏木素-伊红(hematoxylin-eoxin,HE)染色观察不同发育阶段卵泡比例,同时对9～10个月龄大鼠行阴道涂片,观察其动情周期变化,连续6周。结果在染料木素灌胃组的4个月龄大鼠卵巢内原始卵泡、次级卵泡的比例升高,窦状卵泡、闭锁卵泡的比例下降;在染料木素灌胃组的10个月龄大鼠卵巢内原始卵泡、次级卵泡的比例升高,闭锁卵泡的比例下降,且灌胃组的10个月龄大鼠维持着规则的动情周期。结论染料木素能延迟中年、早期老年期大鼠卵巢内原始卵泡发育启动,抑制各级卵泡闭锁,而可能有益于延长卵巢的生殖寿命。
- 苗淑红傅玉才许锦阶刘红罗丽莉
- 关键词：染料木素卵泡发育闭锁
- 阴道毛滴虫长寿保障基因Tv-LAG1的克隆和表达
- 2006年
- 目的克隆原生动物阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis,Tv)长寿保障基因[longevityassurancegene1(LAG1)]的同源基因Tv-LAG1。构建Tv-LAG1原核表达重组体及表达其融合蛋白。方法从阴道毛滴虫cDNA表达文库中筛选LAG1的同源基因,用pET41表达载体与Tv-LAG1cDNA克隆构建原核表达重组体并表达融合蛋白,纯化表达产物用SDS-PAGE法鉴定。用纯化的融合蛋白免疫家兔,获得抗血清,采用Western-blot法对抗体特异性进行分析鉴定。结果成功构建pET41/Tv-LAG1原核表达重组体,并表达出预期大小的重组蛋白。用融合蛋白免疫家兔获得的抗体能特异性识别Tv-Lag1p/GST融合蛋白。结论Tv-Lag1p/GST融合蛋白获得高效表达,并成功纯化,初步实验证明具有一定的免疫原性,为研究Tv-Lag1p在模式生物阴道毛滴虫的细胞定位以及其功能奠定了基础。
- 刘红傅玉才张仁利钱元恕
- 关键词：阴道毛滴虫衰老
