刘志萍
- 作品数：8 被引量：57H指数：4
- 供职机构：复旦大学上海医学院法医学系更多>>
- 发文基金：卫生部科学研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生政治法律生物学更多>>
- 大鼠死后组织细胞DNA含量变化与死亡时间的相关性研究被引量：7
- 2004年
- 目的应用流式细胞术研究大鼠死后组织细胞DNA含量变化与死亡时间的相关性。方法SD大鼠断颈处死后于不同时间段取心、肝、脾、肾器官组织,经胰蛋白酶消化等处理后制成单细胞悬液,应用流式细胞术,在620nm波长处检测各组不同器官组织细胞DNA含量,观察其变化规律。结果大鼠各器官组织细胞DNA含量随死亡时间延长均呈下降趋势。其中以脾组织细胞DNA含量变化趋势与死亡时间最具相关性,肝、肾次之,而心最差;死后48h,各器官组织细胞仅存微量完整的细胞核DNA。结论机体死亡后,各器官组织细胞核DNA含量随死亡时间的延长逐渐减少,具有一定的变化规律,可应用组织细胞DNA含量变化来推断死亡时间。
- 刘志萍陈新沈忆文赵子琴顾云菊
- 关键词：组织细胞死亡时间流式细胞术FEULGEN染色
- 组织细胞DNA含量变化与死亡时间的相关性研究被引量：10
- 2005年
- 目的研究人死后各器官组织细胞DNA降解变化规律,探讨其在推断死亡时间方面的应用价值,为推断死亡时间提供科学依据。方法已知死亡时间人尸体的心、肝、脾、肾,按死后6,12,24和48h四个时间段取材,制成石蜡切片,经Feulgen染色并图像分析;同时将各器官组织按不同时间段取材,制成单细胞悬液,应用流式细胞仪检测DNA含量。结果(1)人体各器官组织细胞经FCM检测,脾细胞核DNA随死亡时间延长呈现较好的下降梯度,而心、肝、肾,则由于自溶较快,死后6h细胞核DNA含量已很低,其变化情况与死亡时间的相关性不佳;(2)各器官组织细胞核DNA染色强度指数均随死亡时间的延长而下降。结论(1)机体死亡后,各器官组织细胞核DNA含量随死亡时间延长逐渐减少,具有一定的变化规律,其中以脾细胞核DNA含量的变化趋势与死亡时间最具相关性,肝、肾次之,而心最差;(2)方法学分析,图像分析技术(IAT)与流式细胞术(FCM)两种检测方法在研究组织细胞DNA含量变化方面,各有利弊,可互补不足。
- 陈新沈忆文顾云菊刘志萍孙淑惠赵子琴
- 关键词：死亡时间细胞核DNA含量FEULGEN染色DNA降解单细胞悬液FCM检测
- HLA-DQA1及DIS80基因分型在亲子鉴定中的应用被引量：1
- 2001年
- 周月琴刘志萍吴文庆
- 关键词：人类白细胞抗原亲子鉴定HLA-DQA1基因分型
- 采用ITO法鉴定母亲为姐妹的特殊半同胞关系被引量：1
- 2021年
- 目的鉴定张A、张B、张C和张X之间的关系是母亲为姐妹的同父异母半同胞关系(以下简称特殊半同胞)还是普通的一代表亲关系,探讨ITO法在判别特殊亲缘关系中的应用。方法提取4名被鉴定人的血痕DNA,使用PowerPlex®21系统和21+1 STR荧光检测试剂盒检测常染色体STR遗传标记,使用Investigator®Argus X-12 QS试剂盒检测X染色体STR遗传标记,使用ITO法计算特殊半同胞关系指数(special half sibling index,SHSI)与一代表亲关系指数(first cousin index,FCI)及两者的似然比。结果基于常染色体STR基因分型结果计算SHSI与FCI的似然比,结合X染色体STR基因分型结果进行分析,提示倾向于认为张A、张B、张C与张X的关系为特殊半同胞。结论对于特殊亲缘关系的鉴定,需要依照案情综合应用各种遗传标记,在分析共享等位基因得到不排除的结论后,可进一步采用ITO法根据案情建立判别假设,得到客观可靠的鉴定意见。
- 邵诚臣姚以宁周月琴刘志萍徐红梅谢建辉孙宽
- 关键词：法医遗传学短串联重复似然比
- 应用染色质免疫沉淀技术分析DNMT3b和HDAC1蛋白与SLC22A18基因启动子的结合
- 2010年
- 目的建立优化的染色质免疫沉淀技术(ChIP),分析乳腺癌细胞MDA-MB-231中DNA甲基转移酶3b(Dnmt3b)和组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)与SLC22A18基因启动子区的结合情况。方法建立并优化ChIP实验技术,运用ChIP技术检测DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-dc)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A(TSA)分别单独和联合作用于人乳腺癌细胞MDA-MB-231后,用Dnmt3b和HDAC1特异性抗体沉淀DNA,聚合酶链式反应(PCR)检测SLC22A18基因5'端特异性序列,免疫印迹法(Westernblotting)检测Dnmt3b和HDAC1蛋白的表达情况。结果获得了优化的ChIP实验条件,Dnmt3b和HDAC1抗体沉淀的染色质片段中扩增出SLC22A18基因5'端特异性序列。5-aza-dc、TSA单独用药可抑制DNMT3b、HDAC1与SLC22A18启动子区特异序列的结合,5-aza-dc和TSA联合作用可以明显抑制DNMT3b、HDAC1与SLC22A18启动子的结合;Western blotting结果表明,5-aza-dc、TSA单独及联合用药不影响DNMT3b和HDAC1蛋白的表达。结论 DNMT3b和HDAC1在MDA-MB-231细胞内结合于SLC22A18基因启动子的特异区域,参与该基因的表达调控。
- 徐红梅孙健刘志萍赵子琴
- 关键词：SLC22A18DNA甲基转移酶3B组蛋白去乙酰化酶1染色质免疫沉淀免疫印迹法
- 用Chelex-100快速提取微量血痕中的DNA被引量：31
- 2003年
- 目的 观察用Chelex-100从微量血痕中提取DNA的效果。方法 40份血痕纱布,取血痕3 mm×3mm置于1.5 mL离心管中,采用5％Chelex-100加煮沸法,提取血痕纱布中的DNA。提取液经过紫外分光光法测定,测其A260/280的比值,计算提取液DNA的纯度和浓度;DNA提取液经微型琼脂糖凝胶电泳,检测其DNA电泳带。结果 Chelex-100能快速在1 h之内提取微量血痕中的DNA,其提取液DNA纯度:27.5％样品纯度A260/280比值大于1.6,72.5％样品纯度比值在1.08～1.54之间;提取液DNA浓度:80％样品小于100μg/mL,20％样品在100～166μg/mL之间。微型琼脂糖凝胶电泳未观察到DNA条带。结论 用Chelex-100法有助于快速提取微量血痕中的DNA。
- 周月琴朱伟刘志萍吴文庆
- 关键词：DNA
- 兔阴茎海绵体平滑肌细胞培养及其RyRs的表达被引量：7
- 2006年
- 目的探讨兰尼碱受体(RyRs)在兔阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSM)的正常表达。方法取雄性性成熟新西兰兔CCSM细胞,用组织块法进行细胞培养,差速贴壁法进行细胞纯化,利用倒置显微镜观察、免疫荧光染色法鉴定细胞纯度;取三代以内培养细胞,通过Genebank查出RyRscDNA序列,针对RyRs3种不同亚型的非同源部分用PrimerPremier5.0软件设计3对引物,以逆转录PCR方法分别检测RyRs3种亚型mRNA的表达,凝胶成像系统分析结果。结果培养7d开始有细胞从组织块长出,15～20d后长满瓶底,呈典型的“峰-谷”现象,经倒置显微镜观察见培养的细胞呈现典型的梭形,免疫荧光染色可见细胞内染为绿色的肌丝,证实培养的细胞为CCSM细胞,经差速贴壁法纯化后,细胞纯度可接近100%。经RT-PCR检测,CCSM只表达RyRs1,未见RyRs其余亚型的表达,提示CCSM表达RyRs1蛋白。结论CCSM表达RyRs中的1亚型,提示其可能参与CCSM细胞的钙调节,进而能调节阴茎勃起功能。
- 刘洪国朱广友赵子琴刘志萍
- 关键词：兰尼碱受体阴茎海绵体平滑肌细胞培养游离钙
- 通过计算叔伯指数排除近亲亲权关系2例被引量：2
- 2021年
- 1案例1.1简要案情案例1:陈某(女)为将孩子(男)出生医学证明上的母亲信息由姐姐改写为自己,与姐姐和孩子一同来我鉴定中心进行亲子关系鉴定。案例2:戴某(男)因怀疑女孩是自己弟弟的孩子,携女孩来我鉴定中心进行亲子关系鉴定。
- 邵诚臣孙宽孙宽刘志萍周月琴徐红梅赵子琴
- 关键词：法医物证学近亲
