顾敬敏
- 作品数：58 被引量：142H指数：6
- 供职机构：吉林大学更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysK的表达及其多克隆抗体的制备被引量：4
- 2014年
- 将噬菌体与细菌孵育25min提取噬菌体感染细菌的总RNA,通过逆转录的方法获得cDNA,以此为模板进行PCR扩增得到目的片段,以pET-15b为载体构建重组质粒pET-15b-lysK并转入大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达金黄色葡萄球菌噬菌体K裂解酶基因lysK,表达产物蛋白经镍柱纯化后,测定LysK的裂解活性、裂解谱,并免疫家兔制备多克隆抗体。结果表明,成功诱导表达可溶性LysK并获得重组蛋白,酶谱试验证明LysK对金黄色葡萄球菌具有裂解活性,LysK比噬菌体K裂解谱广。制备的兔多克隆抗体能够与LysK发生特异性反应且具有较高效价,为后续进行LysK体内治疗研究打下了基础。
- 李跃宫鹏娟夏斐斐宋军顾敬敏张蕾杨梅孙长江冯新韩文瑜
- 关键词：金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶多克隆抗体
- 降解肺炎克雷伯氏菌荚膜多糖及生物被膜的噬菌体解聚酶
- 本发明公开了一种降解肺炎克雷伯氏菌荚膜多糖及生物被膜的噬菌体解聚酶，通过对肺炎克雷伯氏菌噬菌体GH‑K3基因组中第32个开放阅读框进行原核表达和纯化，获得了全新并具有高效活性的解聚酶depo32。该解聚酶对肺炎克雷伯氏菌...
- 韩文瑜顾敬敏蔡若鹏程梦珺
- 治疗细菌性疾病的有力武器——噬菌体及其裂解酶
- 噬菌体及其裂解酶作为针对细菌性感染疾病的新型治疗制剂,可以特异性的杀灭病原菌,具有很大的应用潜力.本研究主要概述了噬菌体及其裂解酶的研究现状及其最新的应用策略.
- 顾敬敏韩文瑜路荣雷连成杨勇军冯新孙长江杜崇涛
- 关键词：噬菌体裂解酶耐药性细菌感染
- HSP60基因作为靶点在脑膜炎治疗中的医用用途
- 本发明公开了HSP60基因作为靶点在脑膜炎治疗中的医用用途，利用SS2毒力因子ENO与HSP60互作诱导脑微血管内皮细胞凋亡的现象及HSP60在该过程中的作用机制，公开了HSP60基因作为靶点在脑膜炎治疗中的用途；本发明...
- 雷连成贾丽李扬刘洪涛姜合祥孙长江顾敬敏冯新李娜
- 文献传递
- 一株化脓隐秘杆菌噬菌体及其医用用途
- 本发明公开了一株化脓隐秘杆菌噬菌体，命名为科噬菌体vB_ApyS_JF1；于2020年11月2日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏名为<I>Arcanobacterium pyogenes phage </I>vB_Ap...
- 顾敬敏冀亚路韩文瑜周作勇姜秋杰
- 一种槲皮素复方中药饲料添加剂及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种槲皮素复方中药饲料添加剂及其制备方法和应用，属于饲料添加剂技术领域，本发明通过特定质量份数的槲皮素、精氨酸和甘露寡糖的结合，克服了现有技术中药饲料添加剂效果不佳、不能治疗猪呼吸道综合症和猪传染性胸膜肺炎的...
- 雷连成李丰阳张晓光李子亨李娜孙长江顾敬敏冯新
- 一种抑制K2型肺炎克雷伯菌生物被膜的解聚酶及其应用
- 本发明适用于生物技术领域，提供了一种抑制K2型肺炎克雷伯菌生物被膜的解聚酶Depo61，为对K2型肺炎克雷伯氏菌噬菌体P‑kp3第61位开放阅读框，进行原核表达和纯化产物，其氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示。本发明...
- 顾敬敏欧宏达赵日虹任思禹王雍然韩文瑜雷连成
- 应用噬菌体GH15和K治疗金黄色葡萄球菌感染被引量：9
- 2013年
- 【目的】研究金黄色葡萄球菌噬菌体GH15和K的生物学特性及联合用于治疗金黄色葡萄球菌感染的潜力。【方法】通过透射电镜观察噬菌体GH15和K的形态;测定二者的裂解谱和一步生长曲线;通过体外裂解实验和体内治疗实验分别测定单独使用GH15、K及二者混合使用时的裂解能力和对菌血症小鼠的保护效果。【结果】通过电镜观察发现两个噬菌体的外形相似,但GH15的尾部比K的长。GH15裂解谱较宽,可以裂解28株金葡菌,而K仅能裂解7株金葡菌。通过对两株噬菌体感染7株共同宿主菌形成的一步生长曲线进行拟合曲线分析,表明二者对不同宿主菌的增殖趋势是不同的。在体外,混合噬菌体与单个噬菌体的抑菌活性无明显差别;在体内实验中,混合噬菌体表现出优于单个噬菌体的治疗效果,用较低的剂量即可以达到高剂量单个噬菌体的治疗效果。【结论】GH15和K所形成的混合噬菌体在治疗金黄色葡萄球菌感染具有更大的应用潜力。
- 刘晓贺顾敬敏韩文瑜李跃韩东张庆明路荣宋军冯新雷连成
- 关键词：噬菌体鸡尾酒疗法
- 一种用于裂解大肠杆菌的融合裂解酶
- 本发明公开了一种用于杀灭大肠杆菌的融合裂解酶，同时还提供了其构建方法，利用生物技术把大肠杆菌素部分转运区域与一种噬菌体裂解酶融合在一起，即将Colicin A的结合区域、识别区（BR）与裂解酶融合在一起，构建成一种从菌体...
- 雷连成闫广谋王爽吕蒙朱日宁马强顾敬敏孙长江冯新韩文瑜
- 文献传递
- 裂解酶LysGH15的CHAP片段与底物互作的关键位点被引量：1
- 2017年
- 金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysGH15对金葡菌表现出广谱高效的抗菌活性,本课题组已深入研究其三维结构,其中CHAP片段是LysGH15起催化作用的关键活性片段。本试验进一步通过分子模拟和对接的方法预测出CHAP与底物多肽DGlnNH2-LLys-DAla-5Gly结合的"口袋"结构,该结构由D33、S35、F36、Y50、R71、T72及N75这些氨基酸位点组成。由于脂肪族非极性氨基酸丙氨酸侧链最短且不带电荷,因此将这些位点均突变为丙氨酸,逐一研究它们对CHAP片段催化活性的影响:圆二色谱试验结果说明突变体二级结构并未发生变化;酶谱试验结果定性的说明F36突变为丙氨酸后突变体蛋白F36A的活性完全丧失,而其他位点的氨基酸突变后蛋白活性并未发生明显改变;细菌浊度测定和菌落计数试验进一步证明突变体F36A活性完全丧失,而其他突变体活性不变;鉴于F36位于"口袋"结构的"口"的部位,36位氨基酸很可能参与到CHAP与底物多肽的结合。本试验鉴定了LysGH15的CHAP与底物多肽互作过程中起关键作用的氨基酸位点。
- 胡丽媛程梦珺张玉凤张蕾蔡若鹏孙长江冯新雷连成顾敬敏王烨韩文瑜
- 关键词：分子对接金黄色葡萄球菌
