陈莉
- 作品数：10 被引量：14H指数：3
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- tRNA的应用前景被引量：1
- 2000年
- 陈莉金由辛王德宝
- 关键词：TRNA类似物
- 人线粒体tRNA^(Leu(UUR))及其突变体的基因克隆、表达和纯化被引量：2
- 2000年
- 将化学法合成的人线粒体tRNALeu(UUR)及其突变体(tRNALeu(M))基因分别连接到载体pGEM-9zf (?)中, 并转化到大肠杆菌JM109中得到两个转化体分别为Leu-W和Leu-M. 在IPTG的诱导下, tRNALeu(UUR)和tRNALeu(M)的表达量可达总小分子RNA的19.10%和17.76%. 经DEAE-sepherose CL4B柱层析可使它们的纯度提高3倍. 最后用15%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化, 并用大肠杆菌亮氨酰tRNA合成酶(LeuRS)分别测定了它们的氨酰化反应动力学常数. 结果显示, mtRNALeu(M)的Kcat / Km值约为mtRNALeu(UUR) 的1/5, 提示该突变可使mtRNALeu(UUR)的氨基酸接受能力明显下降.
- 韩伟国陈莉刘静查锡良金由辛王德宝
- 关键词：突变体基因克隆纯化
- 枯草杆菌TrpRS的固定化及亲和RNA筛选被引量：1
- 2000年
- 为研究 t RNATrp与色氨酰 - t RNA合成酶 ( Trp RS)的相互识别及其结构与功能的关系 ,纯化了枯草杆菌 Trp RS,并用溴化氰活化的 Sepharose4B将 Trp RS固定化 ,固定化 Trp RS的蛋白回收率为 95.5% ,活力回收率为 31 .3% .研究了固定化 Trp RS的酶学性质 ,其热稳定性和贮存稳定性方面均比液相 Trp RS有了较大的提高 ,最适温度、最适 p H均有一定程度的增大 ,工作稳定性良好 .以固定化 Trp RS为亲和层析介质 ,对含有 2 0个核苷酸随机序列 ,长度为 56个核苷酸的单链RNA随机库进行了三轮筛选 .实验结果表明 ,固定化 Trp RS可以作为 SELEX亲和层析介质 ,进行模拟 t RNATrp分子的 RNA随机库的 SELEX筛选 .
- 陈莉刘全胜金由辛王德宝
- 关键词：固定化酶SELEX
- 3种水稻线粒体tRNA^(Trp)突变体的克隆和活力鉴定被引量：5
- 2001年
- 设计并完成了 3种水稻线粒体tRNATrp的突变 ,体外转录并用枯草杆菌和人色氨酰tRNA合成酶 (TrpRS)对tRNATrp及其突变体进行了活力测定 .3种突变体的氨酰化活力比野生型水稻线粒体tRNATrp分别上升了 1 8、1 5和 5倍 .说明A1 U72和G5 C68对于提高线粒体tRNATrp被细胞质TrpRS氨酰化能力的作用并不大 ,细胞质tRNATrp与细胞质TrpRS的识别方式并不适用于线粒体tRNATrp与细胞质TrpRS的相互识别 .
- 何新霞徐丰陈莉金由辛王德宝
- 关键词：水稻突变体克隆
- RNA研究的网络资源被引量：3
- 2000年
- 随着RNA功能多样性的发现 ,RNA研究领域日益受到重视 ,同时RNA序列、二级结构和三维模建数据已有较大增长 .利用这些数据可以有效地搜索结构信息和进行功能提示 .与此同时 ,计算科学的优越性以及全球网络的发展促进了RNA相关数据库和网络站点的建设 ,为RNA的研究带来了极大的方便 .介绍了RNA序列和结构数据库、软件资源以及一些常用的在线分析工具 ,文中所列网络资源均可在http :/ /dna .sibc .ac.cn/bio/rna.
- 陈莉金由辛王德宝
- 关键词：网络浏览器数据库RNA
- tRNA^(Trp)的种属特异性元件被引量：2
- 2000年
- 通过同源性比较原核、古核和真核生物tRNA^(Trp)的核苷酸序列表明tRNA^(Trp)的种属特异性元件可能存在于氨基酸接受茎、D茎、反密码茎以及识别位碱基等处。设计并完成了tRNA^(Trp)的突变,体外转录及原核、真核两种不同来源的色氨酰tRNA合成酶对tRNA^(Trp)及其突变体的测活以确定tRNA^(Trp)的种属特异性元件,进一步揭示tRNA^(Trp)及其合成酶之间的精确识别和共进化过程。原核野生型tRNA^(Trp)其接受茎突变成真核相应的核苷酸后失去了被原核色氨酰tRNA合成酶氨酰化的活力,却被赋予了真核合成酶的氨酰化活力。反密码茎、D茎对于氨酰化活力则影响细微。结果表明tRNA^(Trp)的种属特异性元件主要位于接受茎部位,即氨基酸接受茎和识别位碱基处。研究结果对于tRNA进化及药物的设计具有重要的意义。
- 陈莉金由辛王德宝黄敏婵薛红王子晖
- tRNATrp的结构与功能
- 陈莉
- 关键词：核酸转移核糖核酸
