赵玫
- 作品数:46 被引量:153H指数:6
- 供职机构:中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 热休克蛋白70对X射线照射下wtp53蛋白的影响被引量:1
- 2001年
- 目的 探讨反义热休克蛋白 70 (hsc70 )在X射线照射下对野生型p5 3(wtp5 3)的影响。方法 利用脂质体方法将本室构建的反义hsc70真核表达重组质粒pXAhsc70转染wtp5 3的MCF 7乳腺癌细胞 ,PCR证实外源DNA存在。Westernblot检测hsc70蛋白下降程度。X射线照射转染细胞后 ,检测wtp5 3蛋白的表达情况及半衰期变化。结果 转染重组质粒的细胞中hsc70蛋白下降 5 3% ;不同剂量X射线照射下 ,反义hsc70的存在能够提高wtp5 3的表达 ;4Gy相同剂量照射后 ,转染反义hsc70重组质粒的细胞中wtp5 3的半衰期延长。结论 反义hsc70能够上调wtp5 3的表达、稳定X射线照射下的wtp5 3蛋白并延长其半衰期 ;推测hsc70可能参与了wtp5
- 赵玫范云霞黄常志徐枫杜菲林梁
- 关键词:反义RNA热休克蛋白70X射线照射肿瘤
- 反义hsc70抑瘤效应的研究
- 本研究探讨反义hsc70 RNA对人乳腺癌细胞的体外增殖和体内成瘤能力的影响,观察反义hsc70 RNA对MCF7/Adr人乳腺癌细胞耐药性影响,研究其与突变型P53稳定性和肿瘤耐药之间的关系.
- 范云霞赵玫茆灿泉徐枫杜菲周纯乔绘红黄常志
- 关键词:肿瘤细胞耐药性乳腺癌细胞
- 文献传递
- 利用pTet-Off系统研究NAIF1对食管癌细胞系EC9706生物学行为的影响
- 2011年
- 目的:利用pTet-off可诱导表达系统将NAIF1重组质粒导入食管癌EC9706中进行生物学行为影响研究。方法:构建pTRE2-NAIF1质粒,与PTK-Hyg质粒共转染入可诱导表达细胞系TF93(由EC9706构建而得),经筛选并鉴定获得稳定可诱导表达克隆。以此克隆采用MTT法检测细胞增殖、流式细胞术(FCM)检测细胞周期、Transwell小室法检测细胞迁移和检测细胞黏附能力的改变。结果:经筛选并鉴定获得了稳定的可诱导表达TF93-pTRE2-NAIF1克隆。NAIF1在体外可以抑制EC9706细胞增殖、导致G0/G1期细胞阻滞、抑制其迁移和黏附能力。结论:NAIF1能抑制食管癌细胞系EC9706的恶性生物学行为,为食管癌的基因治疗提供了可能的新靶点。
- 罗清钟佳玲赵玫马怡茗刘健王佳黄常志
- 关键词:食管癌EC9706
- PIP5KL1在肿瘤恶性行为中作用的初步研究
- 本研究通过构建PIP5KLI基因重组质粒,将其转染人宫颈癌hela细胞,研究了PIP5KLI基因对肿瘤恶性行为的影响。
- 时岚罗清赵玫余权戴亚云马怡茗袁兴华黄常志
- 关键词:宫颈癌HELA细胞基因重组质粒
- 文献传递
- 过表达FLJ22349促进人胚胎肾细胞HEK293及乳腺癌细胞MCF-7的生长
- 2008年
- 目的:人假想蛋白FLJ22349基因位于染色体22q13.2上,编码一个229个氨基酸的蛋白。表达谱分析发现多种肿瘤组织中有FLJ22349的表达,预测该基因可能与肿瘤的发生发展有密切关系。本研究旨在用生物信息学方法分析FLJ22349的结构和功能,并初步研究FLJ22349在HEK293及乳腺癌细胞中的作用。方法:运用各种生物信息学数据库初步分析FLJ22349的结构和功能。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析FLJ22349基因在小鼠正常组织,人癌症细胞株及HEK293中的表达情况。将载有FLJ22349的基因的质粒转染入HEK293,MCF-7,MDA-MB231中,观察该基因的亚细胞定位。MTT检测细胞的生长变化。结果:FLJ22349基因在人类、猩猩、恒河猴、褐家鼠、小鼠和狗中有很高的同源性,但与其它已知的基因无同源性。小鼠正常组织中有FLJ22349表达;乳腺癌细胞株MDA-MB231,肝癌细胞株Bel-7402也有表达;主要定位于细胞核;转染FLJ22349的HEK293,MCF-7细胞株生长曲线显示促进细胞生长(P<0.05)。FLJ22349转染120h后,MTT实验观察到HEK293,MCF-7细胞的增殖率分别为299%,456%;而对照组分别为233%,272%。结论:FLJ22349基因过表达促进HEK293和MCF-7细胞的生长。
- 戴亚云赵玫余权方明镜时岚罗清袁兴华黄常志
- 关键词:HEK293细胞生长
- 反义HSC70与mtP53和肿瘤耐药关系的探讨被引量:3
- 2001年
- 目的 观察反义HSC 70RNA对MCF7/Adr人乳腺癌细胞耐药性影响 ,探讨其与突变型p5 3稳定性和肿瘤耐药间的关系。方法 利用DNA重组技术将人HSC70cDNA片段反向克隆至真核表达载体pLXSN中 ,构建反义人HSC70真核表达质粒pX AHSC70。用脂质体方法将重组质粒转染至MCF7/Adr人乳腺癌细胞内 ,以PCR确定转染细胞中外源DNA存在后 ,Westernblot检测HSC70蛋白的抑制程度。MTT法检测细胞耐药性的影响。p5 3稳定性实验分析反义HSC70RNA对突变型p5 3半衰期的改变。结果 经G418筛选获得稳定表达反义HSC70RNA的细胞株MAc70 ,与空载体MAX细胞相比 ,HSC70蛋白表达下降 42 % ,细胞耐药性显著下降。p5 3稳定性实验表明 ,其胞内突变型p5 3含量下降 ,半衰期缩短 ,稳定性明显下降。结论 反义HSC70RNA能够明显降低HSC70蛋白表达 ,导致乳腺癌细胞的耐药性下降 ,提示HSC70可能通过增强突变型p5 3稳定性的途径而参与MCF7/Adr乳腺癌细胞的耐药。
- 范云霞赵玫黄常志施一江袁兴华徐枫杜菲
- 关键词:MTP53反义RNA乳腺癌
- Hsp70、mtP53稳定性与肿瘤及化疗敏感性的关系
- 目的:观察反义热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)对人MCF7/Adr人乳腺癌细胞的生物学特性的影响,探讨其抗肿瘤作用.观察反义hsp70对MCF7/Adr人乳腺癌细胞耐药性影响,探讨...
- 黄常志范云霞赵玫茆灿泉徐枫杜菲林梁
- 文献传递
- 以双质粒逆病毒载体系统快速建立梯度过表达hMTA1稳转单克隆细胞系的方法被引量:1
- 2012年
- 目的利用逆病毒表达载体快速构建梯度过表达人MTA1稳转单克隆细胞系。方法利用噬菌斑原位杂交筛选人肺噬菌体文库,以阳性克隆为模板,RT-PCR获得人MTA1完整CDS序列。以逆病毒表达载体pMX为基础,经过多次酶切连接,构建逆病毒表达载体pMX-MTA1-flag-IRES-EGFP。将构建好的逆病毒载体系统,转染293-gag/pol细胞,包装出含该表达载体的逆病毒颗粒。以含病毒上清多次感染HCT116细胞,获得稳定转染MTA1的HCT116多克隆细胞系。将该多克隆细胞系按合适比例稀释后接种至10cm大皿,获得大量单克隆细胞系,以GFP为筛选标志,筛选不同荧光强度的单细胞克隆进行扩增并分析MTA1与GFP表达水平的线性关系。结果测序结果显示成功克隆出人MTA1表达序列。免疫荧光、Western Blot结果证实成功构建出梯度过表达MTA1的稳转细胞系。相关性验证结果显示构建的非融合载体MTA1与GFP的表达呈明显的线性相关,相关系数r=0.932,P<0.01。结论利用逆病毒表达系统,快速成功构建并筛选出MTA1与GFP非融合梯度过表达稳转单克隆细胞系,为MTA1基因功能研究提供了良好模型。该逆转录病毒平台可用于快速建立其他基因的稳转单克隆细胞系。
- 刘健王海娟张金龙常亚楠孟希亭张雪燕梁肖付明赵玫林晨黄常志钱海利
- 关键词:MTA1GFP单克隆
- 热休克蛋白在喉癌中的表达被引量:23
- 1998年
- 目的探讨热休克蛋白(heatshockproteins,HSPs)在喉癌组织及其正常喉粘膜中的表达。方法采用狭缝杂交(Slotblotanalysis)技术对21例喉癌组织及其正常喉粘膜的HSP90、HSP70和HSP27mRNA表达水平进行检测。结果①HSP90α和HSP70在喉癌组织中呈过度表达,表达量是自身正常喉粘膜的5倍以上。②HSP27和HSP90β在喉癌组织及正常喉粘膜中呈低水平表达,其表达量在两种组织中差异无显著性。结论HSP70和HSP90α在喉癌的致病过程中起着重要的作用。弄清它们的作用机理,将为HSPs用于喉癌的生物治疗提供理论依据。
- 徐先发赵玫施一江唐平章李庆宏黄常志
- 关键词:喉肿瘤热休克蛋白基因表达
- 天花预防接种面临的挑战与DNA痘苗
- 2006年
- 介绍美国重新启动种痘的动因,LIR、A27L、A33R、B5R基因痘苗建立、修饰的Ankara痘苗和Lister基因缺失痘苗动物保护力、安全试验、临床研究现状及预防天花、人类猴痘的前景。
- 高一彤曲京华赵玫