王安平 作品数:112 被引量:181 H指数:7 供职机构: 江苏农牧科技职业学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 文化科学 更多>>
一种响应面法优化三七茎叶皂苷提取液的除杂方法 本发明公开了一种响应面法优化三七茎叶皂苷提取液的除杂方法,包括:1:2.5浓度的三七茎叶皂苷提取原液制备;1%浓度的壳聚糖溶液制备;将所述皂苷提取原液稀释成质量浓度为1:6的提取液,在50℃下加入0.8mL/g的所述壳聚... 秦枫 朱善元 吴双 陈玉勇 郭长明 王安平 吴植 王永娟 洪伟鸣 徐海文献传递 用于鉴定1型和3型鸭肝炎病毒与新型鸭呼肠孤病毒的引物探针组及方法 本发明公开了一种用于鉴定1型和3型鸭肝炎病毒与新型鸭呼肠孤病毒的引物探针组及方法,第一引物对的上游引物如SEQ ID No:1所示,第一引物对的下游引物如SEQ ID No:2所示,第一探针如SEQ ID No:3所示;... 吴双 袁慧莎 朱善元 林梦舟 吴植 张聪 王安平 谢军 刘莉 姜勇番鸭细小病毒VP3基因在昆虫细胞中的表达与鉴定 被引量:2 2018年 为使番鸭细小病毒VP3基因在昆虫细胞中正确表达,根据已发表的该病毒的VP3基因序列设计1对引物。以PCR方法扩增VP3基因;构建转移载体p Fast Bac1-VP3,转化DH10Bac感受态细胞,得到重组Bacmid DNA;转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒r Bac-VP3。通过间接免疫荧光、Western-blot试验、SDS-PAGE分析目的片段在昆虫细胞中的表达情况。成功构建了转移载体p Fast Bac1-VP3,获得重组杆状病毒r Bac-VP3,VP3基因在杆状病毒表达系统中成功表达,得到大小约58 ku的蛋白。 吴萌 朱善元 吴海涛 张继玲 王安平关键词:番鸭细小病毒 VP3基因 杆状病毒表达系统 转染 SF9细胞 含重组人组织激肽释放酶降血压牛奶的开发 人组织激肽释放酶(human tissue kallikrein,KLK1)具有降血压和肾脏损伤修复等广泛的生物学作用,在心血管疾病防治方面具有广阔的应用前景.我们将KLK1cDNA降隆入自行构建的鸡输卵管特异表达载体p... 高波 房浩霞 王安平 孙怀昌关键词:人组织激肽释放酶 牛奶 降血压 文献传递 牛气管抗菌肽在毕赤酵母中的表达与鉴定 被引量:4 2011年 为了在毕赤酵母中获得牛气管抗菌肽(bTAP)的表达,根据已发表的牛气管抗菌肽序列和毕赤酵母对密码子的偏爱性设计2对引物,采用重叠延伸PCR法获得bTAP DNA序列,将其与毕赤酵母(Pichia pastoris)pPIC9K质粒连接,构建表达载体pPIC9K-bTAP。用SalⅠ酶切线性化pPIC9K-bTAP质粒后电转化毕赤酵母GS115,经G418筛选阳性克隆,并用甲醇诱导其表达。SDS-PAGE分析结果表明表达的重组蛋白质分子量正确,抑菌试验结果表明表达的重组蛋白质bTAP对金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌效果。 王安平 李哲峰 朱善元 王永娟 吴双 黄文强 左伟勇 洪伟鸣 孙怀昌关键词:毕赤酵母 抗菌活性 禽腺联病毒VP3基因的原核表达及多抗的制备 2013年 根据已发表的禽腺联病毒(AAAV)基因组序列设计了1对引物,经PCR扩增出VP3基因,将其克隆入原核表达载体pET-30a,并转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下VP3蛋白获得了正确表达,SDS-PAGE结果显示,表达的重组蛋白的分子质量正确。将目的蛋白切胶免疫ICR小鼠,制备了针对重组蛋白VP3的多抗血清,Western-blot结果显示,制备的抗血清能够与AAAV VP抗原发生特异反应。结果表明,VP3基因在大肠杆菌中获得了成功表达,且制备的多抗血清可以用于VP基因的表达检测。 王安平 朱善元 王永娟 吴双 左伟勇 洪伟鸣关键词:VP基因 原核表达 一种新型鸭呼肠孤病毒抗体的双抗原间接ELISA检测方法 本发明提供一种新型鸭呼肠孤病毒抗体的双抗原间接ELISA检测方法,涉及病毒抗体检测技术领域。该新型鸭呼肠孤病毒抗体的双抗原间接ELISA检测方法,将新型鸭呼肠孤病毒结构蛋白σC和非结构蛋白p18重组蛋白的高抗原指数区域作... 卢会鹏 陈新凯 朱善元 吴植 王安平 吴双 周末 朱睿vp2基因特异miRNA对鸡传染性法氏囊病毒复制的抑制 为探索vp2 基因特异miRNA 对鸡传染性法氏囊病毒复制的抑制作用,笔者在前期研究基础上,将两个有效的vp2 基因特异miRNA 表达框分别克隆入含neo 基因的pTarget 载体中获得miRNA 单表达或双表达载体... 王永娟 朱善元 左伟勇 王安平 吴双 孙怀昌关键词:IBDV VP2 MIRNA 禽腺联病毒Rep78、Rep52基因的原核表达及多抗制备 被引量:1 2013年 为制备禽腺联病毒Rep蛋白多抗血清,根据已发表的禽腺联病毒基因组序列设计2对引物,扩增出Rep78、Rep52基因,分别将其克隆入原核表达载体pET-30a,并转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下,2种蛋白均获得了高效表达,SDS-PAGE显示2种重组蛋白分子量均正确。将重组蛋白切胶免疫ICR小鼠,分别制备了针对2种蛋白的多抗血清,Western blot实验显示制备的抗血清能够与Rep78和Rep52抗原发生特异反应。以上结果说明,Rep78和Rep52蛋白在大肠杆菌中获得成功表达,且制备的多抗血清可用于Rep基因的表达检测。 朱善元 王安平 吴双 王永娟 左伟勇 洪伟鸣关键词:原核表达 抗血清 慢病毒介导siRNA抑制1型鸭肝炎病毒复制 被引量:1 2017年 为筛选能抑制DHAV-1复制的siRNA,探索RNAi技术在鸭病毒性肝炎防治中的应用,采用PCR法扩增DHAV-1 RdRp基因,并构建pEGFP-RdRp融合表达EGFP-RdRp蛋白;根据RdRp的序列测定结果,设计3条RdRp特异siRNA,并合成相应shRNA分别插入pmiRZipΔ中构建pRdRp-shRNA;共转染pRdRp-shRNA和pEGFP-RdRp于HEK-293T细胞,通过荧光显微镜法、流式细胞术、相对荧光定量PCR法筛选抑制效率较高的siRNA;将高效siRNA用于病毒载体pmiRZip介导的慢病毒制备;通过计算重组慢病毒转导、DHAV-1感染的鸭胚胎成纤维细胞中病毒TCID50和RdRp基因表达量确定siRNA对病毒及病毒基因的抑制作用。结果显示,3个siRNA均能抑制RdRp基因的表达,包含GDD模体的shRNA2的抑制率最高,对应重组病毒能使DHAV-1的TCID50下降6.2lg,RdRp基因转录量下降89.6%,抑制时间至少达120h,为鸭病毒性肝炎临床防治提供了新思路。 王永娟 董亚青 朱善元 王安平 洪伟鸣 吴双 左伟勇关键词:鸭病毒性肝炎 RDRP