杨柳 作品数:26 被引量:123 H指数:8 供职机构: 中国科学院微生物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 中国科学院知识创新工程重要方向项目 更多>> 相关领域: 生物学 化学工程 轻工技术与工程 理学 更多>>
产环氧化物水解酶的黑曲霉菌种分离和发酵条件的研究 被引量:11 2001年 从土壤中筛选出一株能将苯基环氧乙烷立体选择性水解为R-苯基乙二醇的环氧化物水解酶的黑曲霉SQ-6。对其产酶发酵条件进行了研究,最佳碳、氮源分别为2.0%蔗糖和2.0%玉米浆,最适初始pH为4.0,该酶不需诱导,同时还研究了其他发酵条件对产酶的影响。使用含酶细胞进行底物苯基环氧乙烷转化,产物(R)-苯基乙二醇转化率为41%,ee值为99%。 沙倩 杨柳 王建军 郑国钧 吴襟 孙万儒关键词:黑曲霉 菌种分离 发酵 产海因酶的菌种筛选和产酶条件的研究 被引量:5 2002年 利用5-苄海因作为唯一氮源法筛选高产海因酶的菌种。从本实验室保存的221株菌种中筛选出12株具有不对称水解5-苄海因生成N-氨甲酰基-苯丙氨酸的菌株,其中假单胞菌(Pseudomonas sp.)X_4-49具有较高的产酶活力。对此菌的产酶条件的研究表明,产酶的最佳碳源为甘油,最佳氮源为蛋白胨,最佳诱导物为苄海因、尿嘧啶。苄海因作为诱导物的有效浓度为0.2%,产酶的最适培养基的初始pH为7.0,培养条件为33℃,13h。 杨柳 王建军 向四海 孙万儒关键词:海因酶 菌种筛选 产酶条件 假单胞菌 Sinorhizobium morelens S-5中N-氨甲酰基水解酶基因的克隆、表达和纯化 被引量:1 2006年 N-氨甲酰基水解酶是一种非常具有工业应用价值的水解酶,可用于制备光学纯氨基酸。通过LA PCR从Sinorhizobium morelensS-5菌中克隆到1.3kb的DNA片段,测序表明该片段上含有一个完整的N-氨甲酰基水解酶的基因(hyuC)序列。将hyuC基因克隆到表达载体pET30a上,重组质粒pET30a-HyuC在大肠杆菌中获得了高水平表达。重组的N-氨甲酰基水解酶经过热处理和三步柱色谱分离而纯化。纯化倍数为16.1倍,收率21.2%。该酶为同源四聚体,亚基分子量是38kDa。最适温度是60℃,最适pH为7.0。该酶有较高的热稳定性和氧化稳定性。Fe2+和Ca2+对酶的活性有一定的促进作用,而金属螯合剂和巯基试剂对酶活无明显影响。 吴胜 王建军 杨柳 孙万儒关键词:SINORHIZOBIUM 蛋白纯化 产γ-内酰胺水解酶菌株的筛选及发酵条件研究 被引量:10 2006年 (-)γ-内酰胺是合成两种抗艾滋病药物(-)carbovir和(-)abacavir的重要原料,具有重要的应用价值,微生物酶法拆分(+/-)γ-内酰胺生产(-)γ-内酰胺的方法具有良好的应用前景。以N-乙酰苯丙氨酸为唯一碳源,从土壤中筛选得到了69株具有酰胺水解酶活性的菌株,利用液相色谱分析方法确定了其中20株有较高的酰胺水解酶活性,利用手性色谱分析的方法进一步得到了一株具有较高立体选择性,能拆分(+/-)γ-内酰胺而获得(-)γ-内酰胺的菌株L29-9,对该菌株的产酶培养基的碳、氮源及初始pH值等进行了研究。结果表明:当选择碳源柠檬酸2g/L、氮源酵母提取物5g/Lp、H 7.0、培养时间40h时,通过完整细胞转化,在30℃下经过12h的反应,产物(-)γ-内酰胺产率达40%,ee值99.5%。 李海泉 苏磊 杨柳 王建军 郑国钧关键词:拆分 海因酶的研究进展 被引量:7 2001年 海因酶在生产手性药物中间体上具有广泛的应用价值 ,本文综述了海因酶的研究历史、分类与进化、酶学性质、工业应用及发展方向。 杨柳 孙万儒关键词:海因酶 手性药物 利用酵母菌转化制备木糖醇的方法 一种用单一微生物细胞转化木糖或木质素、半纤维素水解物制备木糖醇的方法,这种方法工艺简单、成本低、产率高,对于用廉价原料生产木糖醇具有实际意义。 江宁 贺鹏 孙万儒 卢大军 张博润 强亚静 杨柳利用磺酰化β-环糊精的手性化合物毛细管电泳拆分 被引量:9 2001年 在毛细管电泳仪上对萘心定、苯乙二醇和 β_苯基缩水甘油酸甲酯的外消旋体进行了拆分条件的研究。使用 pH3.0、10mmol/L的磷酸 -三乙醇胺电泳缓冲液 ,10kV反向电压 ,磺酰化 β_环糊精作为手性识别试剂 ,3种化合物的对映体获得了满意的分离度。同时发现 ,一定含量的甲醇可以提高中性化合物对映体分离度。 王建军 郑国钧 沙倩 杨柳 吴襟 孙万儒关键词:手性拆分 毛细管区带电泳 《中国生物物种名录——菌物卷》研究进展 生物多样性保护研究、管理和监测等许多工作都需要翔实的物种名录作为基础。建立可靠的生物物种名录也是生物多样性信息学建设的首要工作。我国的现代菌物学研究始于二十世纪初,一百多年来积累了丰富的资料和文献,特别是进入廿一世纪以来... 姚一建 赵明君 王科 魏铁铮 杨柳 邓红 苏锦河 李先斌 Paul Kirk关键词:菌物 数据库 产苯乙醇胺醇脱氢酶菌种筛选与发酵条件研究 被引量:7 2001年 A Arachnia sp.P163 producing alcohol dehydrogenase which is able to reduce aminoacetophenone to R\|1\|phenyl\|2\|aminoethanol was obtained from soil and cultures.The maximum activity of enzyme was produced by the LB medium containing 1% sodium citrate and peptone,0 1% phenylaminoethanol as inducer at 30℃ for 48 hs. 王佳亮 王建军 杨柳 吴襟 孙万儒关键词:醇脱氢酶 手性 发酵条件 菌种筛选 手性气相色谱分离α-醇腈和α-羟基酸对映体 被引量:9 2000年 以 3-丙酰基 - 2 ,6- O-二戊基 -γ-环糊精和 3-三氟乙酰基 - 2 ,6- O-二戊基 -γ-环糊精为手性固定相 ,利用气相色谱进行了 α-醇腈化合物、α-羟基酸以及二者共存时的对映体分离。系统观察了影响对映体分离的主要因素 ,优化了十种 α-醇腈和七种α-羟基酸拆分条件 ,3-三氟乙酰基 - 2 ,6- O-二戊基 -γ-环糊精毛细管柱的分离因子达到 1 .0 5~ 3.1 2 ,对 α-醇腈的拆分效果优于对应的 α-羟基酸 。 程树华 吴襟 郑国军 杨柳 沙倩 孙万儒关键词:Α-羟基酸 对映体