李红梅
- 作品数：44 被引量：186H指数：8
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程文化科学更多>>
- 一种苦荞抗氧化肽及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种苦荞抗氧化肽，数量为3个，分别命名为苦荞抗氧化肽P1、苦荞抗氧化肽P2和苦荞抗氧化肽P3，氨基酸序列分别为Gly‑Glu‑Val‑Pro‑Trp、Tyr‑Met‑Glu‑Asn‑Phe和Ala‑Phe‑T...
- 李红梅罗小雨雷霆雯许庆忠费烨张礼林何晓兰王筑婷莫晓川
- 文献传递
- 714例疑似自身免疫性肝病患者相关自身抗体的检测被引量：5
- 2015年
- 目的:观察在疑似自身免疫性肝病(AILD)患者相关自身抗体的阳性率及自身免疫性肝病检出率。方法:采用间接免疫荧光法检测714例疑似AILD患者血清标本中的抗线粒体抗体(AMA)、抗核抗体(ANA)及抗平滑肌抗体(SMA),免疫印迹法检测抗线粒体抗体亚型-丙酮酸脱氢酶复合物(AMA-M2)、抗肝肾微粒体抗体(LKM-1)、肝细胞溶质抗原I型抗体(LC-1)、可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体(SLA/LP),并查阅临床资料进行确诊。结果:ANA、AMA、SMA、AMA-M2、LC-1、SLA/LP、LKM-1阳性率分别为37.67%、11.34%、1.97%、16.94%、1.68%、1.40%、0.56%,确诊原发性胆汁性肝硬化(PBC)68例(9.52%),自身免疫性肝炎(AIH)疑似患者4例(0.56%),未检出原发性胆管炎(PSC)患者。结论:AILD中,以PBC最常见,间接免疫荧光法和免疫印迹法联合应用检测自身抗体可减少AILD的漏诊。
- 王明珠张华刘强李红梅刘水和
- 关键词：自身免疫疾病
- 两种细胞系中内源性C-反应蛋白的表达和定位分析
- 2008年
- 目的观察在不同刺激条件下,不同组织来源细胞系中内源性C-反应蛋白(CRP)的表达及定位情况。方法培养人单核细胞系THP-1和人肝细胞系LO2,用佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞;使用内毒素(LPS)对两种细胞进行刺激,同时收集LPS刺激后的THP-1细胞的培养液上清加入到LO2细胞的培养液中进行孵育,运用Western blot和免疫细胞化学技术检测上述刺激条件下CRP在两种细胞中的表达及其定位情况。结果Western blot检测表明,在未受到刺激时,两种细胞的裂解物中均检测到一定量的CRP,在细胞培养液上清中没有检测到;受到LPS刺激后,THP-1细胞内的CRP表达增加,且在培养液上清中也检测到少量的CRP,但对于LO2细胞,刺激前后CRP的表达和分泌没有明显变化;当用LPS刺激后的THP-1细胞的培养液上清处理LO2细胞后,在LO2的细胞裂解物和培养液上清中均检测到CRP。免疫细胞化学检测结果显示,整个THP-1细胞中均可检测到标记的CRP的荧光信号,其中以核内的最明显,LPS刺激可以增加该蛋白的表达,使其核定位更加明显;在LO2细胞中,CRP定位于核外,LPS刺激对其表达和定位没有明显影响,而给予LPS刺激的THP-1细胞培养液上清处理后,LO2细胞中标记CRP的荧光信号增强,尤其以细胞膜上的增强明显。结论LPS不能直接上调肝细胞LO2内的CRP表达,却可以诱导THP-1表达分泌某些细胞因子来增加CRP的合成分泌;CRP在肝细胞系LO2和单核-巨噬细胞系THP-1中的定位有明显不同,在LO2中主要表现为分泌型蛋白的定位特征,而在THP-1细胞中却有明显的核定位表现。
- 陈腾祥李红梅胡水旺杨婷刘亚伟刘靖华姜勇
- 关键词：C-反应蛋白蛋白定位单核细胞佛波酯
- 不同性别家兔各组织器官中SOD活性和MDA含量比较被引量：2
- 2003年
- 目的 了解SOD活性和MDA含量在不同性别和不同组织器官中差异。方法测定不同性别家兔的肝组织匀浆、心肌组织匀浆、脑组织匀浆及肾组织匀浆中的总SOD(T-SOD)活性和MDA含量。结果SOD活性和MDA含量在不同组织中差异有显著意义;SOD活性在肝组织中最高,在脑组织中最低,而MDA含量在脑组织中最高,肝组织中最低;雌性家兔肝,脑和肾组织中SOD活性显著高于雄性家兔,而雄性家兔脑组织中MDA含量显著高于雌性。结论 总SOD活性和MDA含量具有性别和组织器官差异。
- 雷霆雯马小平李红梅吴宁
- 关键词：丙二醛抗氧化能力组织器官
- 漏芦对细胞色素P450酶活性及mRNA表达影响被引量：4
- 2007年
- 目的研究漏芦对CYP2E1酶活性及其mRNA表达水平的影响。方法以大鼠原代肝细胞为研究对象,实验组分别加入不同浓度漏芦(15.6,31.2,62.4 mg/ml)处理48 h,用苯胺羟化酶(aniline hydroxylase,ANH)活性反映CYP2E1酶活性,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CYP2E1mRNA表达水平。结果漏芦作用后,CYP2E1酶活性及相应mRNA的表达呈浓度依赖性抑制。漏芦在15.6,31.2,62.4 mg/ml浓度下对CYP2E1酶活性的抑制率分别为22.5%,55.8%,64.7%;对CYP2E1mRNA表达水平的抑制率分别为36.6%,51.7%,61.4%。结论漏芦浓度依赖性抑制CYP2E1酶活性,在转录水平下调大鼠肝细胞CY2E1的表达。
- 吴宁李红梅吴青青许庆忠唐良华雷霆雯
- 关键词：CYP2E1RT-PCR漏芦
- 内毒素休克小鼠肝脏细胞质膜差异蛋白质组的二维液相色谱分析被引量：1
- 2008年
- 目的:建立和优化肝脏细胞质膜蛋白质研究的方法系统,并对正常组小鼠和内毒素休克小鼠组肝脏细胞质膜蛋白质进行二维液相色谱分离,分析两者之间的差异表达谱.方法:BALB/c小鼠20只随机分为正常组和内毒素休克小鼠组(10只,LPS刺激3h,LPS剂量为35mg/kg),n=10.采用差速离心结合蔗糖密度梯度离心法分离和富集两组肝脏细胞质膜蛋白,分别将两组样品按蛋白质PI进行一维的色谱聚焦分离,然后每个PI组分再按蛋白质的疏水性经二维HPLC分离,利用ProteoVue软件将UV光吸收图谱转换成PI对疏水性的胶样图谱,再利用DeltaVue软件分析两组肝脏质膜蛋白质组的表达差异.结果:图像分析显示两组比值在≥2.0及≤0.5的差异蛋白点共有24个,与正常组比较,在内毒素休克小鼠的肝脏质膜蛋白中有16个蛋白点表达上调,8个蛋白点表达下调.结论:正常组和内毒素休克小鼠组的肝脏质膜蛋白质组有明显差异.
- 李红梅陈丽夏高晓赵明哲胡水旺姜勇
- 关键词：内毒素休克
- 内毒素休克小鼠肝脏细胞质膜蛋白质组学研究
- 脓毒症(sepsis)是感染引起的全身炎症反应征候群，其严重并发症--感染性休克(septic shock)是创伤、烧伤和手术后病人最主要的死亡原因之一。统计表明，临床半数的脓毒症是由于革兰氏阴性菌(Gram-negat...
- 李红梅
- 关键词：蛋白质组学感染性休克
- 半定量RT—PCR检测内毒素休克小鼠肝脏组织S100A9的表达被引量：1
- 2009年
- 目的：分析S100A9基因在内毒素休克小鼠肝脏组织中的表达情况。方法：20只SPF级BALB／c小鼠随机分为正常组（10只）和内毒素休克组（10只，LPS刺激3小时，LPS剂量为35mg／k）；采用RT—PCR方法检测两组肝脏组织中S100A9mRNA的表达水平。结果：S100A9mRNA在内毒素休克小鼠肝脏中表达增强，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：S100A9基因表达上调在内毒素休克的发生发展中可能起重要作用。
- 李红梅陈丽夏高晓
- 关键词：S100A9内毒素休克
- C反应蛋白真核表达载体的构建与表达被引量：3
- 2008年
- 目的构建人C反应蛋白(CRP)真核表达载体,并观察其在NIH3T3细胞中的表达定位情况。方法利用带HA反向互补序列碱基的特异性引物,从p91023/CRP载体上将编码人CRP的基因序列亚克隆到真核表达载体pcDNA3上;对阳性克隆进行PCR、酶切和测序鉴定,利用脂质体转染方法转染NIH3T3细胞;并使用Westernblot和细胞免疫化学技术对重组质粒pcDNA3/HA-CRP在NIH3T3细胞中的表达及其蛋白定位进行分析。结果PCR、双酶切和测序鉴定表明,pcDNA3/HA-CRP真核表达质粒构建正确;转染实验发现,该质粒能够在NIH3T3细胞中表达,表达产物主要定位在细胞膜和核周边内质网的区域。结论成功构建了带HA标签的人CRP真核表达载体,该载体能够在哺乳动物细胞NIH3T3中表达,为进一步研究CRP的细胞内生物学功能提供了一个重要的工具。
- 陈腾祥李红梅胡水旺刘靖华姜勇
- 关键词：C反应蛋白基因表达蛋白定位
- 人Spsb1基因慢病毒干扰载体的构建及病毒包装
- 2017年
- 目的:构建人Spsb1基因的shRNA慢病毒干扰载体,为研究该基因在肝癌细胞生长、增殖、转移和浸润中的作用打下前期基础。方法:根据shRNA的设计原则设计一段shRNA和阴性对照shRNA,化学合成DNA双链中的两条单链,通过退火和配对后与慢病毒干扰载体LV-3(p GLVH1/GFP+Puro)连接,阳性克隆子LV3-Spsb1测序鉴定;将LV3-Spsb1和辅助质粒p CMV-delta8.91/p CMV-VSVG共转染HEK293T细胞,转染后24 h在荧光显微镜下观察细胞转染效率;用转染后收集到的病毒液感染肝癌细胞SMMC-7721,荧光显微镜下观察细胞荧光;用1 mg/L嘌呤霉素杀死未感染的细胞,Western blot检测细胞内源性Spsb1基因表达量。结果:测序鉴定证明获得的LV3-Spsb1质粒是所需要的目的慢病毒shRNA干扰载体;通过与辅助质粒共转染HEK293T细胞后,细胞在荧光显微镜下发出明亮的绿色荧光,提示细胞转染效率较高;病毒液感染SMMC-7721后,细胞内出现绿色荧光,证明共转染系统可以成功包装shRNA-Spsb1重组慢病毒颗粒;Western blot结果显示shRNA-Spsb1重组慢病毒能够抑制细胞内Spsb1基因表达,证明shRNA-Spsb1的确可以降低肝癌细胞内源性Spsb1基因表达,可用于后期的基因功能研究。结论:成功构建人Spsb1基因的慢病毒shRNA干扰载体LV3-Spsb1并包装出其慢病毒颗粒。
- 孙达权石松徐莹莹雷霆雯莫晓川王筑婷李红梅徐国强
- 关键词：肝肿瘤脂质体转染
