姜勇
- 作品数：325 被引量：1,682H指数：22
- 供职机构：教育部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 体内筛选骨肉瘤血管内皮特异性结合肽被引量：4
- 2009年
- 体内噬菌体技术则将噬菌体展示技术与动物模型相结合，可以更好地进行肿瘤组织特异性结合肽的筛选。Pasqualini等和Wadih等利用该方法筛选出了特异结合脑和肾的噬菌体克隆，1997年他们成功筛选到一条恶性黑色素瘤及乳腺癌上整合蛋白的特异性亲和短肽，把该肽与化疗药物耦联后进行动物实验，收到了很好的抗肿瘤效果。本研究首先制作骨肉瘤原位荷瘤裸鼠模型，然后利用体内噬菌体技术，筛选骨肉瘤血管内皮的特异性结合肽。
- 管明强史占军姜勇李朋杨澜波
- 关键词：特异性结合肽血管内皮骨肉瘤噬菌体展示技术荷瘤裸鼠模型抗肿瘤效果
- Prdx4蛋白表达改变对HeLa细胞迁移和侵袭的影响被引量：3
- 2016年
- 目的:观察过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,Prdx4)蛋白表达的改变对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法:采用脂质体瞬时转染法将表达质粒pc DNA3.0-HA-Prdx4转染HeLa细胞;LV-Prdx4 RNAi重组病毒感染HeLa细胞,构建Prdx4 shRNA HeLa细胞系沉默Prdx4的表达;用蛋白质印迹法证实Prdx4蛋白表达水平的变化;应用划痕愈合实验和Transwell迁移及侵袭实验分别检测细胞迁移及侵袭能力的变化。结果:pc DNA3.0-HA-Prdx4质粒转染组He La细胞的Prdx4蛋白表达水平明显上调(P<0.05),而Prdx4 shRNA HeLa稳定干扰细胞系Prdx4表达水平明显下调(P<0.05)。Prdx4过表达组HeLa细胞的迁移和侵袭能力明显增强,与空白对照组及空载体转染组比较,差异显著(P<0.01)。Prdx4表达干扰组HeLa细胞的迁移和侵袭能力明显受到抑制,与空白对照组及阴性对照组比较,差异显著(P<0.01)。结论:上调Prdx4蛋白表达水平可促进HeLa细胞的迁移和侵袭,在宫颈癌的发生和发展过程中可能起重要作用;下调Prdx4蛋白表达水平可以明显抑制HeLa细胞的迁移和侵袭能力,Prdx4有可能成为临床治疗宫颈癌的一个潜在靶点。
- 袁伟燕张丽石红琴龚小卫姜勇
- 关键词：宫颈癌细胞迁移细胞侵袭
- 钙依赖粘附素生理功能研究进展被引量：5
- 2000年
- 钙依赖粘附素是细胞之间粘附连接的重要组成分子 ,在发育及成年机体的组织结构中起着重要作用。钙依赖粘附素细胞外段决定其结合的特异性 ,其胞浆尾段与胞浆相关蛋白及细胞骨架的相互作用和联系对完整的生理性粘附也必不可少。粘附连接的调节涉及到钙依赖粘附素的量和质变化 ;此外 ,钙依赖粘附素 连环素复合体参与信号转导过程 ,并影响组织的结构和功能。
- 闫文生姜勇
- 关键词：信号传递
- IP-10基因在感染性肺疾病研究进展被引量：3
- 2013年
- 干扰素诱导蛋白10（interferon inducible protein10，IP-10）是CXC类趋化因子，其受体为CXCR3。IP-10在单核巨噬细胞、活化的成纤维细胞、内皮细胞、淋巴细胞等多种细胞表达。IP-10具有多种生物学功能，例如趋化炎症细胞，促进多种细胞释放炎症因子，抑制新血管生成，诱导细胞凋亡，抗病毒、抗肿瘤等作用。研究发现多种感染性肺疾病，如肺结核、严重急性呼吸综合征和高致病性禽流感等都会带来机体血清中IP-10含量的升高。近年研究表明IP-10基因转录调控在疾病的发生、发展中起关键作用，同时还可作为早期发现重症疾病的生物标记。本文围绕IP-10的基因结构、转录调控机制、生物学功能、与感染性肺疾病关系以及临床应用前景等几个方面作一简要介绍。
- 杨昭君刘爱华刘芸姜勇
- 关键词：干扰素诱导蛋白10
- pNTAP-PRAK真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达
- 2010年
- 目的:构建pNTAP-PRAK真核表达质粒,并建立其稳定表达的HEK293细胞系。方法:将人的PRAK亚克隆至串联亲和纯化(tandem affinity purification,TAP)载体pNTAP质粒上,构建成重组质粒pNTAP-PRAK,转化该重组质粒至感受态大肠杆菌DH5α,阳性克隆进行PCR、酶切及DNA测序验证正确后,利用PolyFect脂质体介导将其转染至HEK293细胞中,再通过G418筛选建立稳定表达TAP tag-PRAK融合蛋白的HEK293细胞系;利用Western blotting和细胞免疫荧光标记法检测融合蛋白TAP tag-PRAK的表达及细胞内定位情况。结果:重组真核表达载体构建正确,该重组质粒能在HEK293细胞中稳定表达,表达产物TAP tag-PRAK主要分布在核内。结论:成功构建pNTAP-PRAK真核表达载体并建立了其稳定表达的HEK293细胞系,TAP标签未对PRAK定位产生明显影响。
- 王达安龚小卫刘爱华梅柱中王丹明小燕王旭魏洁邓鹏姜勇
- 关键词：基因表达
- 人His-AWP1融合蛋白表达载体的构建及其在原核生物的表达被引量：7
- 2003年
- 目的 获取人His-AWP1融合蛋白,为下阶段深入研究AWP1的结构、功能及筛取与其相互作用的蛋白打下基础 方法 应用逆转录聚合酶链反府(RT-PCR)法从人ECV304内皮细胞系中克隆AWP1 cDNA,并将其重组于能表达6个组氨酸残基的原核表达质粒DET-14b中。经酶节、序列鉴定,选择正确重组克隆,将其质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,用Ni2+-NTA His柱纯化和SDS-PAGE分离蛋门。结果克隆到一个627 bp的AWP1 cDNA片段.重组质粒目的DNA测序正确.纯化出了一个分子量约为38 kD的融合蛋白。结论用基因工程方法在原核细胞表达并成功纯化出His-AWP融合蛋白。
- 莫永炎曹永宽刘亚伟龚小卫姜勇
- 关键词：ECV304细胞
- p38MAPK在LPS诱导的小鼠肺组织诱导性一氧化氮合酶(iNOS)表达中的作用
- 2001年
- 阚文宏闫文生黄巧冰姜勇赵克森
- 关键词：内毒素休克肺组织诱导性一氧化氮合酶INOSP38MAPK小鼠
- 定心方对大鼠心肌缺血再灌注损伤时p38丝裂原活化蛋白激酶和肿瘤坏死因子α的影响被引量：18
- 2004年
- 目的:探讨定心方防治大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)抗体组、定心方小剂量组和定心方大剂量组,每组12只。利用结扎、放松左冠状动脉的方法制作大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。用放射自显影激酶活性测定心肌中p38丝裂原激活蛋白激酶(p38mitogen-activatedproteinkinases,p38MAPK)活性。用2,4二硝基苯肼显色法测定血清乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)活性。用免疫酶联吸附法(ELISA)检测心肌内TNF-α含量。结果:定心方大、小剂量组均能不同程度地提高再灌注后平均动脉压(meanarterialpressure,MAP),减少血清LDH的活性。MI/R模型组大鼠心肌中TNF-α的含量(pg/g)显著高于假手术组(1120±111和165±16;t=23.483,P<0.01);与模型组相比,TNF-α抗体组、定心方大、小剂量组均能显著降低心肌中TNF-α含量,分别为312±25,515±54,843±86;差异有显著性意义(t=18.341,23.142,5.554,P均<0.01)。MI/R模型组大鼠心肌中p38MAPK活性(nkat/g)显著高于假手术组(90.01±2.88和16.67±0;t=44.00,P<0.01);TNF-α抗体组心肌中p38MAPK活性(93.35±2.55)与模型组无显著性差异(t=0.866,P>0.05);定心方大。
- 赵晓山贾钰华姜勇罗仁秦清和
- 关键词：定心方心肌缺血再灌注损伤P38丝裂原活化蛋白激酶肿瘤坏死因子Α
- 一种用于穿透多肽筛选的随机文库的构建及筛选被引量：2
- 2006年
- 以增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescenceprotein,EGFP)为示踪物,在pET-14b载体上构建编码12个氨基酸的随机多肽表达文库.建立一种简便、经济、有效的文库筛选方法,从所构建的文库中筛选出细胞穿透多肽(cell-penetratingpeptide,CPP).采用点突变技术,首先在pET-14b载体多克隆位点NdeⅠ和XhoⅠ之间加入4个限制性内切酶位点,随后在BamHⅠ位点后加入三联终止密码子,接着再利用亚克隆的方法在KpnⅠ和XhoⅠ之间插入EGFP,形成一个新的用于原核表达示踪蛋白的载体pET-14bMCStop/EGFP.最后再利用点突变技术在上述构建的示踪载体的多克隆位点XhoⅠ和BamHⅠ之间插入36个随机碱基序列.以His-Tat-EGFP作为工具建立有效的筛选方法,利用这种方法对文库进行筛选.酶切和测序表明,示踪载体的构建是正确的,且在大肠杆菌中可有效地表达出His标记的EGFP.在示踪载体的基础上构建的随机多肽文库至少包含了105个独立克隆,其中90%以上的克隆插入的随机片段都是36个碱基.建立的筛选方法是可行的,并用此方法进行了初步的筛选.
- 刘瑜刘亚伟李海玉刘靖华邓鹏姜勇
- 关键词：跨膜转运内化
- 丝裂原活化蛋白激酶激活蛋白激酶(MK)研究进展被引量：5
- 2007年
- 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路介导多种重要的细胞生理反应.对下游蛋白激酶的磷酸化是MAPK家族成员发挥生理作用的重要方式.在MAPK的下游存在3个结构上相关的MAPK激活蛋白激酶(MAPKAPKorMK),即MK2,MK3和MK5.在被MAPK激活后,MK可将信号传递至细胞内不同靶标,从而在转录和翻译水平调节基因表达,调控细胞骨架和细胞周期,介导细胞迁移和胚胎发育.最近,在基因敲除研究的基础上,不同MK亚族成员之间的功能区分已经逐渐明晰,使我们对于MK的认识有了长足的进步.
- 龚小卫姜勇
- 关键词：丝裂原活化蛋白激酶信号转导
