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李文辉

作品数：6 被引量：19H指数：3
供职机构：东北农业大学更多>>
相关领域：生物学农业科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 2篇专利
  • 1篇学位论文

领域

  • 2篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 3篇活性
  • 3篇基因
  • 3篇干扰素
  • 3篇干扰素-Α
  • 3篇纯化
  • 2篇野猪
  • 2篇原核
  • 2篇种牛
  • 2篇转录
  • 2篇木糖
  • 2篇木糖还原酶
  • 2篇基因转录
  • 1篇生物学
  • 1篇生物学活性
  • 1篇抗病毒
  • 1篇抗病毒活性
  • 1篇克隆
  • 1篇活性检测
  • 1篇基因克隆
  • 1篇基因重组

机构

  • 6篇东北农业大学
  • 1篇黑龙江省农业...

作者

  • 6篇李文辉
  • 5篇王君伟
  • 4篇孙仰峰
  • 3篇李勐
  • 2篇魏双施
  • 1篇杨秀琴
  • 1篇王巍
  • 1篇高明春
  • 1篇王薇

传媒

  • 1篇中国预防兽医...
  • 1篇中国生物工程...
  • 1篇中国兽医科学

年份

  • 1篇2012
  • 2篇2009
  • 2篇2008
  • 1篇2007
共 6 条 记 录，以下是 1-6
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排序方式：
一种牛干扰素－α多肽基因
一种牛干扰素－α多肽基因，它涉及一种牛干扰素－α基因。它解决了目前牛干扰素－α基因在原核表达体系内存在低表达和构建表达载体后转录的mRNA翻译活性低的问题。本发明牛干扰素－α多肽基因序列如SEQ ID NO：1所示。本发...
王君伟孙仰峰李勐李文辉
文献传递
牛IFN-α基因高效表达及纯化的研究被引量：7
2008年
基于对RNA二级结构的预测和密码子偏性计算,通过计算机辅助软件进行牛IFN-α基因优化,经人工合成优化后的基因与pWL表达载体连接后诱导表达,并对表达条件进行优化。SDS-PAGE分析表明,其产物分子量约为17ku,最优表达条件下蛋白表达量占菌体总蛋白的33%,表达产物以包涵体形式存在。经过包涵体溶解、初步复性后利用CM Sepharose Fast Flow离子交换层析柱作为蛋白质复性系统,采用梯度法进行牛α-干扰素包涵体蛋白质的纯化复性。结果表明,梯度离子交换层析法能有效地复性牛α-干扰素包涵体,复性后的重组牛α-干扰素的纯度达95%,通过离子交换层析柱纯化和复性后,重组牛α-干扰素在MDBK/VSV细胞系上的抗病毒活性为5.56×106u/mg。
孙仰峰李文辉李勐高明春王薇魏双施王君伟
关键词：抗病毒活性纯化
一种牛干扰素-α多肽基因
一种牛干扰素-α多肽基因，它涉及一种牛干扰素-α基因。它解决了目前牛干扰素-α基因在原核表达体系内存在低表达和构建表达载体后转录的mRNA翻译活性低的问题。本发明牛干扰素-α多肽基因序列如SEQ ID NO：1所示。本发...
王君伟孙仰峰李勐李文辉
文献传递
基因重组野猪干扰素-α的高效表达和下游工艺的研究
李文辉
关键词：基因克隆活性检测
鹅IFN-α基因的高效表达被引量：7
2009年
通过对鹅IFN-α成熟蛋白基因的分析,利用在线软件,将序列中稀有密码子改为优势密码子,优化了密码子适应性指数,更多地采用了利于表达的密码子对,优化了表达的起始区域和终止区域mRNA的二级结构及自由能。然后,将人工合成的鹅IFN-α基因与表达载体pWL连接后诱导表达。SDS-PAGE分析表明,所表达蛋白的分子质量为18.83 ku,蛋白表达量占菌体总蛋白的35.3%。表达产物以包涵体形式存在。复性、纯化后的鹅IFN-α重组蛋白的纯度达98%,活性达1.28×107U/mL。
王巍孙仰峰魏双施李文辉王君伟
关键词：纯化生物学活性
重组野猪α-干扰素基因的高效表达和下游工艺的研发被引量：8
2008年
利用PCR方法,从东北野猪和长白猪的肌肉基因组DNA中分别扩增出一条501bp的基因片段,与GenBank上登载的猪α-干扰素基因序列相比,核苷酸同源性达到98.4%以上。以其中野猪α-干扰素基因片段为参考模板,经过密码子优化、5′和3′区域的mRNA二级结构优化,全基因合成得到编码野猪α-干扰素基因成熟肽的基因。克隆该基因到原核表达载体pWL之中.随后转化至宿主菌DH-5α。经过SDS-PAGE电泳检测,发酵后的重组野猪IFN-α-干扰素基因的蛋白表达量大于25%。复性纯化后的重组蛋白,经过VSV-WISH系统检测,其生物活性为4.45×106IU/mg。
李文辉刘娣王君伟徐冬梅杨秀琴
关键词：复性纯化
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