徐拥建
- 作品数：18 被引量：116H指数：8
- 供职机构：暨南大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家大学生创新性实验计划更多>>
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- 不同治法方药对脂肪肝大鼠超微结构及Kupffer细胞CD14 mRNA的影响
- 2013年
- 目的:观察疏肝、健脾、活血、祛湿、综合不同治法方药对脂肪肝大鼠超微结构及Kupffer细胞CD14 mRNA表达的影响。方法:利用高脂饮食、白酒灌胃复制大鼠脂肪肝实验动物模型,同时给予疏肝、健脾、活血、祛湿、综合不同方药进行干预,12周后观察各组大鼠超微结构的改变,同时以Ⅳ型胶原酶、蛋白酶E联合灌注消化、梯度离心、选择性贴壁分离不同组别大鼠Kupffer细胞,采用半定量RT-PCR方法检测不同组别大鼠Kupffer细胞CD14 mRNA的表达。结果:各组中药治法对NAFLD细胞超微结构的改变均有不同程度的修复作用,其中尤以健脾组明显。模型组大鼠Kupffer细胞CD14 mRNA蛋白的表达较正常组明显增加(P<0.05),各干预组CD14 mRNA表达较模型组有所降低(P<0.05),其中健脾组最为明显。结论:模型组大鼠超微结构改变与NAFLD超微结构相吻合,NAFLD模型大鼠Kupffer细胞CD14 mRNA表达明显增高,表明Kupffer细胞CD14 mRNA表达明显增高可能为脂肪肝发病原因之一,抑制Kupffer细胞CD14 mRNA表达可能是健脾等治法方药抗实验性大鼠脂肪肝的作用机制之一。
- 龚享文杨钦河温承远邓丰承张玉佩闫海震徐拥建
- 关键词：脂肪肝CD14MRNA
- 疏肝健脾方药对NAFLD大鼠肝细胞SREBP-1c、SCD-1 mRNA及蛋白表达的影响被引量：17
- 2014年
- 目的:观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝细胞SREBP-1c、SCD-1 mRNA及蛋白表达的影响,探讨其防治NAFLD的可能机制。方法:雄性SD大鼠75只随机分为正常对照组、模型组、疏肝组(柴胡疏肝散9.6 g/kg)、健脾组(参苓白术散30 g/kg)、合方组(柴胡疏肝散和参苓白术散合方39.6 g/kg),每组15只。采用高脂饲料喂养复制大鼠NAFLD模型。8 w后每组随机选取9只检测肝功及肝组织TC、TG,观察肝组织病理形态改变;同时每组取6只采用离体循环灌注Ⅳ型胶原酶法提取肝细胞,Q-PCR及Western Blot法检测肝细胞SREBP-1c、SCD-1 mRNA及蛋白表达。结果:与模型组比较,各药物干预组肝细胞SREBP-1c、SCD-1 mRNA及蛋白表达水平均有不同程度的下调(P<0.05或P<0.01),同时肝脂及病理学改变也较模型组有不同程度改善,以疏肝组作用最为显著(P<0.05)。各药物干预组组间比较,疏肝组大鼠肝细胞SREBP-1c、SCD-1 mRNA表达水平显著低于健脾组(P<0.05),而蛋白表达比较无统计学意义。结论:疏肝健脾方药可能通过抑制肝细胞SREBP-1c/SCD-1信号通路的激活,进而下调肝脏TC、TG合成,发挥防治NAFLD的作用。SREBP-1c、SCD-1 mRNA及蛋白可能是疏肝健脾方药抗NAFLD的有效作用靶点。
- 徐拥建杨钦河韩莉张玉佩刘益臻金玲闫海震
- 关键词：疏肝健脾方药固醇调节元件结合蛋白-1C肝细胞
- 疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病大鼠Kupffer细胞SREBP-1c信号通路相关基因及蛋白表达的影响被引量：7
- 2014年
- 目的观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠Kupffer细胞固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)信号通路相关基因及蛋白表达的影响及可能的机制。方法采用高脂饲料喂养复制大鼠NAFLD模型,各药物干预组灌饲相应的疏肝健脾方药,8周后检测血液常规生化指标,观察肝组织病理形态改变;采用离体循环灌注Ⅳ型胶原酶法提取肝脏Kupffer细胞,Q-PCR及Western blot法检测Kupffer细胞SREBP-1c、硬脂酰辅酶A去饱合酶-1(SCD-1)mRNA及蛋白表达水平。结果模型组大鼠肝脏脂肪蓄积;血脂及Kupffer细胞SREBP-1c、SCD-1mRNA及蛋白表达水平较正常组均显著升高(P<0.01);各药物干预组Kupffer细胞SREBP-1c、SCD-1 mRNA及蛋白表达水平均有不同程度的下调,同时血脂及病理学改变也较模型组有不同程度的改善,以疏肝组作用最为显著(P<0.01)。结论疏肝健脾方药可能是通过抑制Kupffer细胞SREBP-1c/SCD-1信号通路激活,下调血清总胆固醇、甘油三酯合成,减少肝脏脂质沉积,发挥抗NAFLD作用。可推测SREBP-1c、SCD-1 mRNA及蛋白可能是疏肝健脾方药抗NAFLD的有效作用靶点。
- 韩莉杨钦河张玉佩徐拥建刘益臻杨雪松金玲
- 关键词：疏肝健脾方药非酒精性脂肪性肝病固醇调节元件结合蛋白-1CKUPFFER细胞
- 疏肝健脾方药对LXRα/FAS信号通路介导非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞脂肪沉积的影响被引量：8
- 2014年
- 目的探讨疏肝健脾方药对LXRα/FAS信号通路介导非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝细胞脂肪沉积的影响。方法选用SPF级雄性SD大鼠75只,共分5组,每组15只,分别为:正常组,模型组,疏肝组,健脾组及合方组;除正常组,其余均各组采用高脂饮食复制NAFLD大鼠模型,给药各组分别给予疏肝方(柴胡疏肝散)、健脾方(参苓白术散)、合方(柴胡疏肝散和参苓白术散合方)进行干预,采用全自动生化分析肝脂改变,分离出肝细胞,Typan blue染色和流式细胞术(FCM)对肝细胞的活性及纯度进行鉴定。采用实时定量PCR法检测肝细胞LXRαmRNA、FAS mRNA的表达,采用Western blot法检测LXRα、FAS蛋白在肝细胞中的表达。结果 (1)油红O染色后模型组的NAFLD大鼠病理结构显示肝细胞肿胀,细胞核位于细胞边缘,细胞浆内可见大小不等的小空泡,部分肝细胞小空泡融合成大泡等特征性改变,提示成功建立高脂饮食诱导NAFLD大鼠实验动物模型。各组中药对NAFLD病理结构改变均有不同程度的修复作用,尤以疏肝组明显。(2)与正常组比较,模型组肝细胞LXRα、FAS基因及蛋白的表达水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,健脾方和疏肝方组的表达水平下调明显(P<0.01,P<0.05)。结论 LXRα/FAS通路是介导NAFLD脂质平衡代谢紊乱重要的信号通路,疏肝健脾方药能够调控肝细胞LXRα/FAS通路使NAFLD大鼠肝细胞脂肪沉积趋于恢复,这可能是疏肝健脾方药抗实验性大鼠脂肪肝的作用机制之一。
- 龚享文杨钦河闫海震张玉佩黄进徐拥建张金文林春梅
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病疏肝健脾方药肝细胞
- 失眠大鼠5-HT、5-HIAA、NE的针刺时效研究被引量：10
- 2013年
- 目的:从时效关系角度观察电针对氯苯丙氨酸(PCPA)致失眠大鼠镇静催眠后效应随时间延续的变化规律,并探讨电针镇静催眠后效应的产生机制。方法:以腹腔注射PCPA制备失眠动物模型,在电针治疗后3h、6h、12h和24h观测大鼠下丘脑5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、去甲肾上腺素(NE)的表达。结果:PCPA腹腔注射后大鼠正常的睡眠-觉醒周期消失,下丘脑内5-HT、5-HIAA下降,NE升高,与对照组比较有显著差异(P<0.01)。电针组下丘脑内5-HT、5-HIAA升高、NE下降,针后3h、6h、12h各指标含量与模型组比较具有显著差异(P<0.01)。电针组各时间点与相应对照组比较均有显著差异(P<0.01)。结论:电针对失眠大鼠镇静催眠作用有明显的后效应,电针可升高失眠大鼠下丘脑5-HT、5-HIAA、降低NE,效应持续12h以上;初步提示临床上电针治疗失眠间隔12h效果更佳。
- 兰妮赵仓焕徐拥建
- 关键词：后效应单胺类神经递质
- NLRP6在非酒精性脂肪性肝病发病中的作用及中医药防治策略被引量：6
- 2014年
- 非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）全球发病形势严峻,临床对其防治仍然缺乏有效手段。目前,NAFLD的发病机制尚未完全清楚,普遍认为与胰岛素抵抗（insulin resistance）、脂质代谢紊乱、氧化应激、脂质过氧化、炎症细胞因子等因素密切相关[1]。从中医病机看,肝脾两脏关系密切,肝脾同病在慢性肝病中极为常见。现代研究表明NAFLD的发生发展与肝脾两脏的功能失调有关,肝郁脾虚是NAFLD发病的基本病机[2]。
- 梁荫基杨钦河张玉佩王少娜韩莉刘益臻金玲龚享文闫海震徐拥建
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病中医药防治NAFLD脂质代谢紊乱炎症细胞因子LIVER
- 基于NF-κB通路探讨疏肝健脾含药血清对LPS刺激下大鼠肝细胞、Kupffer细胞炎症损伤保护作用机制研究被引量：8
- 2015年
- 目的基于核转录因子kappa B（nuclear transcription factor-kappa B,NF-κB）信号通路探讨脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）刺激大鼠肝细胞及Kupffer细胞炎症损伤以及疏肝健脾含药血清的保护作用。方法通过体外培养以及免疫荧光鉴定SD大鼠肝细胞及Kupffer细胞,利用LPS刺激大鼠肝细胞及Kupffer细胞产生炎症反应,酶联免疫法检测肝细胞及Kupffer细胞培养上清液中白介素-1（interleukin-1,IL-1）、人血清淀粉样蛋白（serum amyloid A,SSA）的表达,Western blot法检测大鼠肝细胞及Kupffer细胞NF-κB通路相关蛋白的表达。结果每只大鼠通过纯化后获得肝细胞数量1.5×108~2.0×108个,Kupffer细胞数量0.5×107~1.0×107个,Typan blue染色测定肝细胞及Kupffer细胞活力均可达到95%以上。LPS组肝细胞及Kupffer细胞较空白血清组IL-1、SSA水平均有显著升高（P〈0.01）。而与LPS组比较,药物干预组可显著降低（P〈0.01）。肝细胞、Kupffer细胞的蛋白表明,与空白血清组比较,LPS组肝细胞及Kupffer细胞NF-κB、IκB及磷酸化IKKβ蛋白表达均有显著升高（P〈0.01）;与LPS组比较,疏肝健脾方药含药血清能显著下调肝细胞IκB及p-IKKβ蛋白的蛋白表达水平（P〈0.01）,但NF-κB蛋白表达水平无显著差异（P〉0.05）,疏肝健脾含药血清能下调Kupffer细胞NF-κB、IκB及p-IKKβ蛋白表达（P〈0.01）。结论疏肝健脾含药血清能够对LPS刺激大鼠肝细胞、Kupffer细胞炎症损伤产生保护作用,其机制可能与NF-κB信号通路相关。
- 韩莉龚享文杨钦河闫海震张玉佩李媛媛徐拥建张金文林春梅
- 关键词：疏肝健脾方药NF-ΚB通路LPS刺激含药血清
- 杨钦河教授诊疗非酒精性脂肪性肝病经验浅述
- 总结杨钦河教授贯穿"病因-病机-分型-治法"的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)独特理论体系。指出了NAFLD是一种先后天多种致病因素共同作用的疾病,肝郁脾虚是NAFLD发生发展的基本病机,痰瘀互结是重要病理环节的理论见解...
- 龚享文杨钦河张玉佩徐拥建闫海震
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病
- 文献传递
- 疏肝健脾方对NASH大鼠肝组织IKKβmRNA和蛋白表达的影响被引量：8
- 2012年
- 目的:探讨疏肝健脾方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织核因子κB(NF-κB)抑制蛋白激酶β(IKKβ)mRNA和蛋白表达的影响。方法:采用高脂饲料喂养建立NASH大鼠实验模型,在施以造模因素的同时各药物干预组大鼠分别灌服疏肝方(柴胡疏肝散)、健脾方(参苓白术散)和综合方(柴胡疏肝散和参苓白术散的合方)的高、低剂量进行干预,16周后各组大鼠腹主动脉采血,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及肝组织TC、TG的含量;ELISA检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)及白细胞介素1(IL-1)的水平;HE染色观察肝组织病理变化;实时荧光定量RT-PCR检测肝组织IKKβmRNA的表达水平;Western blotting检测肝组织IKKβ蛋白磷酸化水平的变化。结果:肝组织病理染色提示大鼠NASH造模成功,与正常组比较,模型组大鼠血清TC、LDL-C、肝组织TC、TG及炎症细胞因子TNF-α、IL-1、IL-6水平均显著升高(P<0.01,P<0.05),肝组织IKKβmRNA及其磷酸化蛋白的表达水平均明显升高(P<0.01)。与模型组相比,肝组织TC、TG含量及血清TNF-α的含量以综合方高、低剂量组、健脾方高剂量组及疏肝方高剂量组下降显著(P<0.01,P<0.05);IL-1和IL-6含量均以综合方高剂量组降低显著(P<0.05),IKKβmRNA的表达水平以综合方高组及健脾方高组下调明显(P<0.05),磷酸化IKKβ蛋白的表达水平以健脾方高剂量组及综合方高、低剂量组下降最为显著(P<0.01,P<0.05)。结论:血清炎症细胞因子TNF-α、IL-1和IL-6水平的显著升高、肝组织IKKβmRNA及其磷酸化蛋白的高表达可能参与NASH的发病。降低相关炎症细胞因子的含量、抑制IKKβmRNA及蛋白磷酸化可能是疏肝健脾方抗NASH的重要机制之一。
- 魏波杨钦河王文晶胡巢凤方梅霞刑会杰张玉佩程少冰王彦平冯高飞何秀敏徐拥建闫海震黄进
- 关键词：疏肝健脾方IΚB激酶
- 杨钦河教授诊疗非酒精性脂肪性肝病经验浅述
- 总结杨钦河教授贯穿"病因-病机-分型-治法"的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)独特理论体系。指出了NAFLD是一种先后天多种致病因素共同作用的疾病，肝郁脾虚是NAFLD发生发展的基本病机，痰瘀互结是重...
- 龚享文杨钦河张玉佩徐拥建闫海震
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病
