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张瑛
作品数:
9
被引量:38
H指数:4
供职机构:
中国科学院生物物理研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
陈燕
中国科学院生物物理研究所
李金照
中国科学院生物物理研究所
邱蓉
中国科学院生物物理研究所
邓巍
中国科学院生物物理研究所
夏另朝
中国科学院生物物理研究所
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机构
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中国科学院
作者
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陈燕
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夏另朝
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6篇
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1篇
段峰海
传媒
5篇
生物化学与生...
2篇
生物物理学报
1篇
中国生物化学...
1篇
生物化学杂志
年份
2篇
1999
1篇
1998
2篇
1997
1篇
1996
1篇
1995
2篇
1994
共
9
条 记 录,以下是 1-9
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相关度排序
被引量排序
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人肾液泡型H~+_-ATPase 58kD亚基基因的表达
被引量:1
1994年
在大肠杆菌中表达了人肾液泡型H ̄+-ATPase58kD亚基的基因,利用聚合酶链式反应(PCR)得到了58kD亚基的编码片段.直接将PCR产物连接到PET载体上表达.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白质印迹分析表明58kD亚基的基因得到高效表达.表达产物可达细菌细胞质蛋白的50%.
张瑛
彭生斌
谢小松
关键词:
腺苷三磷酸酶
氢离子
基因表达
胶质细胞源神经营养因子基因克隆及产物纯化
被引量:1
1996年
用PCR方法从人基因组DNA中扩增出胶质细胞源神经营养因子(GDNF)的编码序列,使它在E.coli中表达并纯化了重组GDNF.
陈燕
张瑛
李金照
邓巍
夏另朝
邱蓉
关键词:
胶质细胞
神经营养因子
基因克隆
提纯
外源基因在蛙神经元中的表达
被引量:1
1997年
含 β 半乳糖苷酶基因的真核表达载体DNA ,直接注射到视神经切断或正常的黑斑蛙的视网膜中 .注射 2周后 ,观察到蛙视网膜神经细胞仍然有转染基因表达 ,这种基因转染对神经元的类型没有选择性 .被转染神经元主要局限于注射点周围 .蛙视神经切断后 。
夏另朝
李金照
陈燕
邱蓉
张瑛
邓巍
关键词:
基因转染
基因表达
外源基因
神经元
GDNF及BDNF对受损运动神经元的长期修复
被引量:4
1999年
为了研究胶质细胞源神经营养因子(GDNF) 及脑源神经营养因子(BDNF) 对切断轴突的新生运动神经元的长期维持存活及促进神经再生的作用, 我们选用出生时单侧切断坐骨神经的雏鸡模型, 用裸DNA 转染方法, 在损伤神经附近的肌肉中转染GDNF cDNA 和BDNF cDNA 的真核表达载体,观察在体表达的神经营养因子对损伤的修复作用。结果显示,在体表达的GDNF 在8 周内能使切断坐骨神经的腰脊髓运动神经元近90 % 维持存活。切断的坐骨神经从断端向远体端再生,最长再生达9 .5m m 。表达两个因子比单独表达GDNF 对运动神经元的存活无显著性差异。而两个因子协同作用对坐骨神经的再生更为有效,坐骨神经再生最长的可达15 .4m m 。
夏另朝
邱蓉
张瑛
邓巍
李金照
陈燕
关键词:
GDNF
BDNF
神经营养因子
运动神经元损伤
牛脑液泡型质子泵70kD和33kD亚基基因的表达
1994年
已分离了编码牛脑液泡型质子泵的70kD亚基的cDNA,利用聚合酶链反应(PCR)扩增了70kD亚基的编码片段,同时直接从牛脑cDNA库中得到了33kD亚基的编码片段.分别将相应片段连接到PET载体上完成70kD和33kD亚基基因在大肠杆菌中的表达.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白质印迹分析表明70kD和33kD亚基基因均得到明显表达.
张瑛
彭生斌
谢小松
关键词:
质子泵
亚基
基因表达
脑源神经营养因子基因转染神经断端促进切断坐骨神经再生
被引量:14
1997年
为了研究体内表达的脑源神经营养因子(Brain-derivedNeurotrphicfactor,BDNF)对脊髓运动神经元存活及切断神经再生的作用,我们将人BDNFcDNA克隆到真核表达载体pCB6中,使BDNF基因在CMV启动子控制下表达。在雏鸡出生后3小时内及第二天直接将pCB-BDNFcDNA·lipofectin混合物注射到坐骨神经预切断位点附近肌肉内。第二天切断坐骨神经,神经切断10天后进行实验检测,观察到,BDNFcDNA转染阻止了切断神经一侧的腰脊髓内(L4-L6)运动神经元的大量死亡。并显著的促进了切断坐骨神经的再生。这些结果表明直接注射含BDNFcDNA的质粒对损伤的神经进行基因治疗,具有良好的前景;lipofectin介导重组质粒进行基因转染是导入外源基因到体内的一个可行方法。
李金照
陈燕
夏另朝
邱蓉
张瑛
邓巍
关键词:
神经营养因子
基因治疗
坐骨神经损伤
人脑源性神经营养因子基因表达
被引量:4
1998年
用聚合酶链式反应(PCR)从人基因组DNA中扩增了人脑源性神经营养因子(hBDNF)cDNA和hBDNF成熟蛋白编码片段,分别克隆到pUC18中.经测序确认两个插入片段序列正确.hBDNFcDNA在CMV启动子控制下在NIH/3T3细胞中表达,用RTPCR检测转染细胞确有BDNFmRNA存在.BDNF成熟蛋白编码序列在T7启动子控制下在E.coli中表达,SDSPAGE表明,BDNF得到表达,以包涵体形式存在.
陈燕
张瑛
李金照
邓巍
夏另朝
邱蓉
关键词:
PCR
基因表达
人胰岛素原基因在大肠杆菌中高效外分泌表达
被引量:10
1995年
将胰岛素原基因融合到金色葡萄球菌蛋白A的基因上,构建成大肠杆菌中基因融合的外分泌表达载体。它能高效表达且有效地分泌表达产物。利用亲和层析能方便地从培养液中分离出融合蛋白。融合蛋白经CNBr裂解后,经反相HPLC分析,分离得到具有天然结构的胰岛素原并进行了鉴定。
陈燕
李金照
夏令朝
张瑛
李强
关键词:
胰岛素
大肠杆菌
胶质细胞源神经营养因子cDNA全序列的克隆及其生物学功能的研究
被引量:3
1999年
为了研究GDNF在神经系统中的生物学功能,通过RT-PCR方法从大鼠睾丸总RNA中扩增出GDNFcDNA全序列,序列分析表明与GenBank中的顺序完全相同.将GDNFcDNA以非融合方式连接在真核表达载体pEGFP-NⅠ的绿色荧光蛋白的上游,在CMV启动子控制下表达.通过绿色荧光蛋白报告基因的表达表明GDNFcDNA能在真核细胞HeLa中很好表达.采用裸DNA转染方法研究GDNF对损伤的坐骨神经的修复作用,在雏鸡出生后3h切断其右侧坐骨神经,将pEGFP-GDNF与Lipofectin的混合物注射到坐骨神经切断位点附近肌肉内,5d后追补一次.20d后进行实验检测,观察到GDNFcDNA的转染阻止了切断神经侧的腰脊髓内[L4-L6]运动神经元的大量死亡,并显著促进了切断坐骨神经的再生.
段峰海
张瑛
夏另朝
邱蓉
邓巍
李金照
陈燕
关键词:
GDNF
坐骨神经
CDNA
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