夏羽佳
- 作品数：11 被引量：28H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CXCL9对单个核细胞的趋化作用及其机制探讨被引量：8
- 2012年
- 目的观察趋化因子CXCL9对人外周血单个核细胞的趋化作用,并探讨其对CXCR3受体后信号通路的影响。方法分离人外周血单个核细胞并进行培养,Transwell小室趋化实验检测不同浓度的趋化因子CXCL9对外周血单个核细胞的趋化作用;Western blot方法检测CXCL9刺激外周血单个核细胞时ERK1/2及PI3K/Akt信号通路的蛋白表达变化,并检测上述通路抑制剂PD98059和Wortmannin处理细胞后,CXCL9对ERK1/2、PI3K/Akt信号通路的影响有无变化。结果与空白对照组相比,不同浓度的CXCL9刺激对人外周血单个核细胞均有明显的趋化作用,并且CXCL9刺激人外周血单个核细胞能激活ERK1/2及PI3K/Akt信号通路,其关键蛋白ERK1/2及Akt磷酸化水平显著增加;通路特异性抑制剂PD98059和Wortmannin的应用能明显抑制CXCL9对这两条信号通路的激活。结论 CXCL9能趋化人外周血单个核细胞发生迁移,ERK1/2及PI3K/Akt信号通路可能在此过程中发挥重要作用。
- 夏羽佳田德安曾丹何嘉怡涂炜邓欢韩平邓玥灵刘梅
- 关键词：趋化因子CXCL9单个核细胞趋化作用信号通路
- TGF-β1诱导的上皮间质转化对肝癌细胞系中边缘群细胞的调控被引量：6
- 2010年
- 目的:观察转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的上皮间质转化(EMT)对SMMC-7721中SP细胞的影响.方法:常规培养人肝癌细胞系SMMC-7721和HepG2,利用流式细胞术分析肝癌细胞系中SP细胞的含量并分选出SP细胞,Western blot检测ABCG2蛋白的表达.TGF-β1诱导肝癌细胞SMMC-7721,动态观察细胞形态学变化,Western blot和免疫荧光检测EMT相关指标钙粘蛋白(E-cadherin)的表达,通过流式细胞仪分析TGF-β1诱导前后SP细胞含量的变化.结果:利用流式细胞术成功建立了肝癌SP细胞分选体系.检测发现,SMMC-7721中SP细胞含量为4.3%,Western blot显示该SP细胞ABCG2蛋白表达明显上调.而HepG2中未能检测出SP细胞.TGF-β1诱导72h后SMMC-7721细胞发生上皮间质转化,Western blot和免疫荧光检测发现E-cadherin蛋白的表达下调,同时SP细胞含量也明显降低.结论:不同肝癌细胞系中SP细胞含量的差别可能与细胞系的遗传背景和性质不同有关.EMT可能抑制了肿瘤干细胞的增殖,促进肿瘤细胞向侵袭和转移的方向发展.
- 王波夏羽佳晏维夏丽敏刘梅田德安
- 关键词：转化生长因子Β1上皮间质转化肿瘤干细胞肝癌
- 肿瘤坏死因子α对人肝癌细胞株SMMC-7721体外侵袭能力的影响被引量：3
- 2011年
- 目的探讨肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)对人肝癌细胞株SMMC-7721体外侵袭能力的影响及其相关机制。方法不同浓度TNF-α作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后,采用Transwell试验检测细胞侵袭能力的改变,采用划痕标记荧光传输试验显示缝隙连接细胞通讯功能的变化,采用Western blot法检测连接蛋白32(Cx32)在细胞膜的表达。结果不同浓度TNF-α作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后,Transwell试验显示细胞侵袭能力较对照组提高,且随TNF-α浓度增加而升高。同时,缝隙连接细胞通讯功能减弱,细胞膜上Cx32的表达减少。结论 TNF-α可能通过影响Cx32在细胞膜的表达及细胞通讯促进人肝癌细胞株SMMC-7721的侵袭能力。
- 朱倩晏维林海华罗敏夏羽佳涂炜周珍珍邓欢田德安
- 关键词：肿瘤坏死因子Α连接蛋白32
- 肝癌细胞系SMMC-7721中边缘群细胞在低氧诱导的上皮间质转化调控下的表达
- 2010年
- 目的:探讨低氧状态下上皮间质转化对SMMC-7721中边缘群细胞的影响.方法:低氧培养SMMC-7721细胞,动态观察细胞形态学变化,Westernblot和免疫荧光检测上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关指标钙粘连蛋白(E-cadherin)的表达,通过流式细胞仪分析诱导前后边缘群(side population,SP)细胞含量的变化.结果:低氧诱导72h后SMMC-7721细胞逐渐由原来的多角形变成类似于成纤维样的长梭形,排列松散,E-cadherin的表达下调,其相对定量值与正常培养相比,差异具有显著意义(0.41±0.23vs2.03±0.43,P<0.01),SP细胞含量也明显降低(4.3%vs0.0%,P<0.01).结论:低氧能够诱导肿瘤细胞SMMC-7721发生EMT,同时SP细胞的含量下降.EMT可能抑制了肿瘤干细胞的增殖,促进肿瘤细胞向侵袭和转移的方向发展.
- 王波夏羽佳晏维夏丽敏田德安
- 关键词：低氧上皮间质转化肿瘤干细胞肝癌
- 过表达连接蛋白32对人肝癌细胞株MHCC-97H体外侵袭能力的影响被引量：3
- 2010年
- 目的探讨过表达连接蛋白32(Cx32)对人肝癌细胞株MHCC-97H体外侵袭能力的影响。方法应用Lipo-fectamine 2000将pcDNA 3.1(-)/Cx32重组质粒转染至MHCC-97H细胞,G418稳定筛选。采用Western blot法检测Cx32蛋白表达,划痕标记荧光传输实验显示细胞通讯功能的变化,Transwell实验检测细胞侵袭能力的改变。结果转染pcDNA 3.1(-)/Cx32重组质粒使得MHCC-97H细胞过表达Cx32蛋白。与正常对照组和转染空质粒组细胞相比,转染pcDNA 3.1(-)/Cx32重组质粒并过表达Cx32的细胞胞间通讯功能增强,细胞侵袭能力减弱。结论 Cx32在人原发性肝癌的侵袭过程中可能起抑制作用。
- 朱倩夏羽佳涂炜罗敏周珍珍晏维林海华邓欢田德安
- 关键词：连接蛋白32肝细胞癌细胞侵袭
- 不同转移潜能肝癌细胞株中CD标志物的表达差异及意义被引量：2
- 2012年
- 目的探讨不同转移潜能的肝癌细胞株中几种CD标记物的表达差异及其意义,为进一步利用CD分子标志物分离多潜能肝癌干细胞奠定基础。方法常规培养三种不同转移潜能的肝癌细胞株HepG2、MHCC-97H、SK-HEP-1,胰酶消化获得单细胞悬液后,经流式抗体染色,通过流式细胞仪分析三种肝癌细胞株中CD133、CD90、CD44、CD34、CD24的表达差异及意义。结果 CD133+细胞在HepG2细胞株仅占0.1%,而在MHCC-97H、SK-HEP-1细胞中表达也较低;CD90+、CD44+、CD90+CD44+表达水平随细胞转移潜能的增加呈递增趋势(P<0.05)。CD44+CD24+在HepG2、MHCC-97H、SK-HEP-1细胞中的阳性表达率分别为0.05%、10.3%和0.3%(P<0.05);三者中均无CD34+和CD133+CD90+细胞表达。结论 CD90和CD44与肝癌细胞的转移潜能有一定的相关性,可能成为潜在的肝癌肿瘤干细胞标记物。
- 夏羽佳余帆晏维刘梅田德安
- 关键词：CD133CD90CD44CD34CD24
- 靶向MTDH的小干扰RNA对人原发性肝癌细胞HepG2骨架重排的影响被引量：3
- 2013年
- 目的构建人MTDH基因的shRNA干扰载体,并观察其对原发性肝癌细胞HepG2骨架重排的影响。方法针对MTDH基因的不同部位设计3对shRNA的寡核苷酸片段,克隆到载体pGCsilencerTM H1/Neo中,RT-PCR、Western blotting及免疫荧光检测转染后MTDH mRNA和蛋白表达变化情况,并筛选最佳抑制效率的shRNA干扰载体,并将其转染人原发性肝癌细胞HepG2,用罗丹明标记的鬼笔环肽显示沉默MTDH基因后对人原发性肝癌细胞HepG2骨架蛋白F_actin的改变。结果靶向MTDH干扰质粒构建成功。与转空载体的阴性对照组及未转染组比较,转染pGCsilencerTM H1/Neo-MTDH-shRNA后,HepG2中MTDH mRNA和蛋白表达明显降低,其中以pGCsilencerTM H1/Neo-MTDH-S1最为明显,达到90%以上;细胞形态及细胞骨架显示转染pGCsilencerTMH1/Neo-MTDH-S1的细胞骨架蛋白F_actin发生重排。结论成功构建并筛选最佳抑制效率的靶向MTDH干扰pGCsilencerTM H1/Neo-MTDH-S1,该载体能有效重排肝癌细胞骨架。
- 周珍珍邓欢黄焕军夏羽佳涂炜何嘉怡田德安
- 关键词：肝细胞癌MTDH小干扰RNAHEPG2
- 慢性乙型肝炎患者血清MIG的表达及核苷类似物对其的影响被引量：2
- 2012年
- 目的了解慢性乙型肝炎病毒感染患者体内趋化因子MIG(即IFN-γ诱导单核因子,又称CXCL9)的表达情况,并了解MIG水平与核苷类似物治疗的关系。方法通过ELISA方法检测98例慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者及72例健康对照者血清MIG水平,并检测32例CHB患者接受核苷类似物治疗前、治疗后3个月血清MIG水平。结果 CHB患者血清MIG水平明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。CHB患者血清MIG水平与HBV-DNA定量(r=0.309 2,P<0.01)和血清ALT水平(r=0.390 4,P<0.01)呈现正相关,与肝脏结节改变、腹水、癌变相关(P<0.05)。CHB患者核苷类似物治疗3个月后血清MIG水平明显下降(P<0.05),并伴随HBV-DNA及ALT水平下降(P<0.01)。结论慢性HBV感染能诱导患者体内趋化因子MIG表达,其表达水平与病毒含量和肝脏的炎症程度密切相关,MIG可能成为预测慢性乙型病毒性肝炎疾病进展的重要指标之一。核苷类似物通过抑制病毒复制,下调趋化因子MIG表达,从而减轻炎症反应,延缓乙肝患者病情的进展。
- 曾丹夏羽佳何嘉怡唐望先刘梅田德安
- 关键词：慢性乙型肝炎趋化因子核苷类似物
- 急性小肠坏死90例临床分析
- 2014年
- 目的:探讨急性小肠坏死的病因及其临床特征,提高急性小肠坏死的诊治水平。方法:收集2003-01-2012-12收治的急性小肠坏死患者的一般资料、病史、临床表现、并发症、影像学检查、血液学检查、病理检查等相关资料,归纳总结其临床特征。结果:共收集急性小肠坏死病例90例,其中嵌顿疝26例、粘连24例、肠扭转22例、肠系膜上动脉栓塞9例、肠系膜上静脉血栓形成5例、腹部闭合性损伤3例、肠套叠1例。全组治愈81例,病情危重自动放弃4例,死亡5例。结论:急性小肠坏死病因复杂,早期诊断困难,及时行手术切除是一种有效的治愈方法。
- 夏羽佳田德安余帆晏维丁强黄焕军
- 关键词：小肠坏死急性腹痛
- Netrin-1促进肝癌细胞HepG2抗失巢凋亡的作用被引量：1
- 2011年
- 目的初步探讨神经生长因子Netrin-1对人肝癌细胞HepG2抗失巢凋亡的作用及相关机制。方法采用脂质体转染的方法,将Netrin-1的真核表达质粒转染到肝癌细胞HepG2中,Western blot检测Netrin-1的表达;用软琼脂集落试验、悬浮培养模型及流式细胞检测的方法观察肝癌细胞HepG2抗失巢凋亡的特性。结果肝癌细胞HepG2在失巢状态下可以聚集成团生长,并与贴壁生长有相似的凋亡比例。与对照组细胞相比,稳定转染Netrin-1真核质粒的HepG2细胞在软琼脂中形成细胞集落的数量明显增加,在悬浮培养模型中形成细胞团的直径更大,在失粘附状态下的细胞凋亡比例明显降低;磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)通路的抑制剂LY294002能增加转染细胞在失粘附状态下的凋亡比例。结论肝癌细胞HepG2具有抗失巢凋亡的特性,Netrin-1可以增强HepG2细胞抗失巢凋亡的能力,其机制可能与PI3-K通路相关。
- 林海华晏维田德安黄焕军夏羽佳周珍珍涂炜邓欢廖家智
- 关键词：失巢凋亡NETRIN-1肝癌细胞
