周江 作品数:39 被引量:139 H指数:8 供职机构: 军事医学科学院生物工程研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 国家杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 化学工程 更多>>
组织纤溶酶原激活剂突变体(La-tPA)转基因鼠的建立 被引量:3 1999年 用羊β-乳球蛋白基因(BLG)5区5×103b(103b,旧称kb)为调控序列,构建了乳腺表达组织纤溶酶原激活剂突变体(La-tPA)载体.对540枚小鼠受精卵进行显微注射,经PCR和Southernblot检测,获得6只整合有人La-tPA的转基因小鼠,整合率为32%. 卢一凡 邓继先 程萱 周江 黄培堂关键词:转基因鼠 激活剂 突变体 小鼠胚胎干细胞体外定向心肌细胞分化的研究 胚胎干细胞是从早期哺乳动物囊胚的内细胞团发育而来,在体外具有不分化的无限增殖能力和发育的全能性。被注射到小鼠胚泡中的ES细胞能参与发育形成嵌合体小鼠,并具有分化形成小鼠胚胎的各种类型细胞的能力,包括生殖细胞等。在特定培养... 孙彦洵 周江 杨晓文献传递 Expression of Human GCSF in Mammary Gland of Mice by Injection of Plasmid DNA 1997年 The vectors carrying the genes coding for the proteins of interest are of unpredictable efficiency in transgenic animals. The expression vector of mammary gland (pINGG) containing GCSF genomic DNA was injected into mouse mammary gland, and expression was detected in the milk of mice. The result showed that mammary gland injection method could provide a convenient transient system to confirm vector validity. 卢一凡 邓继先 肖成祖 马清钧 马清钧关键词:EXPRESSION INJECTING INTRON 乳清酸蛋白(WAP)基因调控序列的鉴定及在小鼠乳腺细胞表达LacZ基因的研究 被引量:7 1998年 乳清酸蛋白(WAP)是小鼠乳中的主要蛋白质.在亚克隆该基因的基础上,对其进行了酶切鉴定,并对该基因5′区进行克隆和序列分析,在核实序列正确后,构建了以其为调控序列,指导β-半乳糖苷酶基因的真核表达质粒,采用直接注射质粒的方法在小鼠乳腺中表达出β-半乳糖苷酶活性,从而证实基因调控序列的功能正确性,可以用于转基因动物乳腺表达研究,同时证实该方法可以作为一种暂时性表达载体的验证方法. 卢一凡 邓继先 周江 肖成祖 肖成祖关键词:乳清酸蛋白 乳腺表达 Β-半乳糖苷酶 用三步法纯化重组人促红细胞生成素 1997年 在生物反应器中培养中国仓鼠卵巢细胞—促红细胞生成素(CHO-EPO)C2细胞株,培养上清液中重组人促红细胞生成素(rHuEPO)表达水平达2000~3000U/ml。培养上清经过三步纯化:第一步为反相柱色谱,可将样品浓缩约96.7%,其收集液经充分透析后进行第二步的DEAE-离子交换色谱,最后进行分子筛色谱,总回收率为30%以上,经纯化的rHuEPO比活性为1.5×10~8U/g蛋白,SDSPAGE一条带,扫描测试纯度达98%以上。 李琳 邓继先 卢建申 周江关键词:促红细胞生成素 色谱 纯化 基于Cre/LoxP系统的Smad2条件基因剔除小鼠的建立 Smads家族是最新发现的TGF-β信号转导途径中一个重要的新基因家族,它们可以直接将TGF-β信号从细胞膜转移到细胞核内。TGF-β信号分子通过跨膜苏氨酸、丝氨酸激酶受体复合体进行信号转导。SMAD2属于受体激活的SM... 周江 程萱 孙彦洵 吕娅歆 程静 黄培堂 黄翠芬 杨晓文献传递 基于Cre/LoxP系统的Smad2条件基因打靶小鼠的建立 Smads家庭是最新发现的TGF-β信号转导途径中一个重要的新基因家族,它们可以直接将TGF-β信号从细胞膜转移到细胞核内.SMAD2属于受体激活的SMADs.为了进一步研究Smad2在成体各组织器官及肿瘤发生中的可能作... 周江关键词:SMAD2 ES细胞 CRE重组酶 文献传递 角质细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立 被引量:17 2003年 构建了含有角质细胞特异性角质素 5启动子、Cre重组酶基因和人生长激素基因polyA的转基因载体pK5 Cre hGH。以显微注射的方法将 4 2kb的转基因片段K5 Cre hGH引入小鼠基因组 ,共注射 72 0枚受精卵 ,其中 6 95枚移植至 2 9只假孕母鼠的输卵管中发育 ,获得子代小鼠 48只 ,经基因型鉴定有 12只小鼠在其基因组上整合有Cre基因 ,整合率为 2 5 %。将带有Cre重组酶基因的小鼠与基因组上携带loxP位点的Smad4条件基因打靶小鼠杂交以检测Cre重组酶组织特异性表达情况以及介导重组的功能。结果表明 ,K5 Cre转基因小鼠只在皮肤组织中表达Cre重组酶并能在体内成功地介导loxP位点的重组。 毛春明 杨晓 程萱 吕娅歆 周江 黄翠芬关键词:CRE 转基因小鼠 组织特异性 Smad5双等位基因剔除导致小鼠胚胎干细胞体外定向分化的肌细胞凋亡 SMAD是转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)家族细胞质内重要的信号转导分子。Smad5是骨形成蛋白(BMP)亚家族的信号分子之一。越来越多的证据表明TGF-β家族所释... 孙彦洵 周江 吕雅歆 杨晓文献传递 组织纤溶酶原激活剂突变体在转基因小鼠乳腺中的表达 被引量:6 1998年 组织纤溶酶原激活剂(tPA)是一种较理想的溶血栓药物,本研究采用其突变体———长效组织纤溶酶原激活剂(LAtPA)的cDNA作为目的基因,将它插入羊β乳球蛋白(BLG)基因起始密码之前,使LAtPA的转录、翻译受控于BLG基因的5′、3′序列,再将所构建的BLGLAtPA用显微注射方法建立转基因鼠,经点杂交筛选和Southern印迹鉴定,获得2只LAtPA基因整合阳性鼠,并在阳性母鼠乳汁中检测到有溶纤活性的LAtPA表达,表达水平15μg/ml。在这两只转基因鼠的9只F1代子鼠中,有5只是阳性的,tPA表达水平维持在1~2μg/ml,BLGtPA融合基因整合到小鼠基因组,能稳定地遗传给子代。 周江 邓继先 刘红 程萱 卢一凡 卢一凡关键词:TPA 转基因小鼠 乳腺表达