何於娟 作品数:75 被引量:459 H指数:14 供职机构: 重庆医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 重庆市教育委员会科学技术研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 电子电信 更多>>
对不同层次学生进行临床生物化学教学的思考 2005年 随着医学检验学科的发展,学生专业层次增多,在教学过程中根据各层次学生培养目标的不同,开展不同侧重点和不同内容的教学,为人才的可持续发展奠定良好的基础。 张彦 涂植光 尹一兵 刘北忠 何於娟 康格非关键词:临床生物化学 教学 生物化学教学 可持续发展 检验学科 教学过程 IL-17A促进中耳上皮细胞凋亡加重组织损伤 被引量:6 2017年 目的建立肺炎链球菌性急性中耳炎小鼠模型,研究白细胞介素17A(interleukin 17A,IL-17A)促进中耳上皮细胞凋亡以及凋亡促进中耳组织损伤的作用。方法鼓膜穿刺术建立C57BL/6小鼠和IL-17A缺陷鼠急性中耳炎模型。收集中耳灌洗液,ELISA检测灌洗液中炎症因子和损伤标志物的表达。中耳组织石蜡切片经TUNEL染色和HE染色,观察小鼠中耳上皮细胞的凋亡和中耳组织损伤程度。采用广谱的凋亡抑制剂Z-VAD-FNK抑制凋亡后,观察中耳组织损伤的变化。结果 IL-17A显著上调白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和髓过氧化物酶(MPO)表达,加重了中耳炎症。IL-17A还促进了上皮细胞的凋亡和黏膜损伤。抑制凋亡后,显著降低了IL-17A介导的炎症反应,减轻了中耳组织损伤。结论 IL-17A可促进上皮细胞凋亡,加重中耳组织损伤。 王子萌 王维 马毓蓉 范芳梅 金春芳 黄益飞 项云 刘佳丽 何於娟关键词:中耳炎 凋亡 弹性蛋白酶加重急性中耳炎的炎症应答和中耳组织损伤 被引量:1 2018年 目的初步探讨中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)在急性中耳炎模型中对细菌清除和组织损伤的作用。方法采用鼓膜穿刺法接种肺炎链球菌6B,构建C57BL/6小鼠急性中耳炎模型,腹腔注射特异性NE抑制剂检测NE在中耳炎中的作用。分别于建模后第1、3、5天处死小鼠,分离中耳组织制备石蜡切片,HE染色观察小鼠中耳上皮组织损伤程度,同时收集中耳灌洗液(MELF)检测NE活性、细菌载量、炎症细胞数量、损伤标志物和炎症因子的变化。结果与PBS对照组比较,肺炎链球菌处理组NE活性明显升高,且在第3天达峰值。与对照组比较,NE抑制剂处理组MELF中总蛋白含量、乳酸脱氢酶活性、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)表达水平明显下调,炎症反应及中耳组织损伤明显减轻,但细菌载量无显著差异。结论在肺炎链球菌中耳炎模型中,NE发挥了促进炎症应答,加重中耳组织损伤的作用,但不参与细菌的清除。 马毓蓉 范芳梅 王子萌 王维 董益麟 何纤 张欣欣 何於娟关键词:急性中耳炎 肺炎链球菌 中性粒细胞 弹性蛋白酶 555例慢性化脓性中耳炎的病原学及药物敏感性分析 被引量:13 2016年 目的了解慢性化脓性中耳炎耳分泌物病原微生物类型及致病菌的药物敏感性,指导临床合理用药。方法收集2013年1月至2015年3月慢性化脓性中耳炎住院患者(纳入患者555例,共计571耳,其中男性272耳,女性299耳)耳分泌物,经细菌培养和药敏试验,进行病原微生物分离率的排序,检测致病菌的药物敏感度。结果 571耳中培养有微生物生长379耳(占66.37%),其中细菌334耳(占88.13%)、真菌47耳(占12.40%)。细菌检出率依次为凝固酶阴性葡萄球菌191耳(占57.19%)、金黄色葡萄球菌58耳(占17.37%)、铜绿假单胞菌31耳(占9.28%)。药物敏感性因菌种而异。结论慢性化脓性中耳炎活动期患者耳分泌物以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌为主。药敏试验对临床用药有指导作用。 刘佳丽 王维 王子萌 金春芳 范芳梅 马毓蓉 何於娟 余林关键词:慢性化脓性中耳炎 细菌培养 药敏试验 肺炎链球菌溶血素减毒突变体免疫小鼠可诱导抗体依赖的保护效应 2010年 目的 优化肺炎链球菌溶血素减毒突变体(△A146 Ply)蛋白小鼠免疫方案,评价其保护效果,并揭示△A146 Ply特异性抗体在保护中的作用.方法 分别使用△A146 Ply免疫小鼠1、2、3次,利用ELISA分析血清内特异性IgG滴度,效价测定1周后,使用肺炎链球菌D39菌株鼻腔攻毒评价3种免疫方式保护效力.通过肺内定植模型和败血症模型分析△A146 Ply对肺炎链球菌感染的保护效果.利用抗体吸附试验和模拟被动保护试验分析Ply特异性抗体的保护作用.结果 随着免疫次数的增加,小鼠血清内的IgG滴度显著升高.相比免疫两次的小鼠,3次免疫后的小鼠其体内的IgG升高超过20倍.在攻毒试验中,免疫3次后的小组接受同等剂量的D39攻毒,存活率最高,保护效率为50%.在定植模型中,△A146 Ply免疫后的小鼠,其肺内肺炎链球菌血清型19F的细菌量减少约50倍,14血清型菌减少超过20倍.在败血症模型中,使用1200 CFU的D39腹腔注射到免疫组及对照组小鼠体内,△A146 Ply免疫组有60%的小鼠能够抵抗这种致命剂量的D39感染,对照组小鼠全部死亡(P=0.0018).在被动保护试验中,Ply特异性抗体被吸附完全后的抗血清完全不能保护小鼠抵抗致死剂量的D39感染,60%的小鼠在接受抗体特异的抗血清后存活,两组存活率差异有统计学意义.结论 △A146 Ply能有效抵抗肺炎链球菌的感染,证实保护作用与其特异性抗体密切相关. 吴凯峰 张薇薇 史静 杨晓亮 刘鑫 胥文春 何於娟 张雪梅关键词:肺炎链球菌 核苷酸mts90及其在结核病诊断中的用途 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及核苷酸mts90及其片段在结核病诊断中的用途。本发明要解决的技术问题是为人型结核分枝杆菌的鉴定和结核病的诊断提供一种新的选择。本发明的技术方案是核苷酸mts90,其序列如SEQIDN... 胥文春 赵家宁 尹一兵 张雪梅 何於娟 王虹文献传递 肺炎链球菌蛋白在抗肺炎链球菌感染中的应用 本发明提供肺炎链球菌蛋白在抗肺炎链球菌感染中的应用。本发明的肺炎链球菌肽链内切酶O(PepO)为皮下免疫佐剂,与锌金属蛋白酶B(ZmpB)第673位至第863位氨基酸肽段的混合及融合表达,制备的肺炎链球菌蛋白质疫苗对抵抗... 尹一兵 尹一帆 张雪梅 胥文春 王虹 何於娟 肖江明 王婧瑶文献传递 苦参碱诱导K562细胞磷脂酶A_2活性与表达的改变 被引量:12 2002年 目的 研究磷脂酶A2 在苦参碱促K 5 62细胞分化的信号转导中的作用。方法 利用磷脂酶A2 的水解作用 ,以掺入大肠杆菌膜的 [3H ]标记的油酸为酶解底物 ,检测K 5 62细胞内磷脂酶A2 的活性。以半定量的RT -PCR方法检测K5 62细胞内磷脂酶A2 的mRNA水平。结果 0 .1mg ml浓度的苦参碱作用K 5 62细胞后 ,磷脂酶A2 的活性与表达量均增高。结论 磷脂酶A2作为细胞内的重要信号分子 ,通过活性与表达量的改变参与苦参碱促K 5 刘北忠 蒋纪恺 何於娟 张彦 刘小珊关键词:苦参碱 磷脂酶A2 K562细胞 细胞分化 信号转导 小鼠TIM2基因真核表达载体的构建及鉴定 被引量:2 2006年 目的:构建真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并在小鼠肝癌细胞系H22中进行表达。方法:用RT-PCR法扩增得到TIM2基因,构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并进行BamHI及BglⅡ双酶切鉴定和测序。通过脂质体法转染H22细胞,用RT-PCR法检测H22细胞中TIM2mRNA的表达。结果:构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,用脂质体法转染H22细胞后,用荧光显微镜观察和RT-PCR法检测,可见细胞内有EGFP及TIM2mRNA的表达。结论:成功地构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并在小鼠H22细胞中表达,为进一步研究TIM2在肿瘤生物治疗中的应用奠定了基础。 马玲娣 张彦 文世宏 何於娟 刘小珊 康格非 蒋纪恺关键词:增强型绿色荧光蛋白 真核表达载体 小鼠H22肝癌细胞 改良DDRT-PCR研究苦参碱诱导K562细胞分化相关的差异表达基因 被引量:3 2003年 The differentiation of human leukemia K562 cells can be induced by matrine. To investigate the mechanism of the induced cell differentiation, an improved DDRT PCR technique was applied to screen the differentially expressed genes between K562 cells and the matrine treated cells. The sequences of the fragments of the differentially expressed genes were obtained by sequencing following the T A cloned fragments identified by restriction endonuclease, and analyzed with bioinformatics. The results indicated that the multiple gene expression known already changed in the process of induced cell differentiation and an unknown gene fragment was cloned. It suggested that the differentially expressed genes acted as cell differentiation related genes involved in the early phase of the induced cell differentiation. 刘北忠 蒋纪恺 何於娟 张彦 刘小珊关键词:DDRT-PCR 苦参碱 细胞分化 差异表达基因 白血病