于敏
- 作品数:74 被引量:308H指数:12
- 供职机构:北京大学第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项卫生部临床学科重点项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 拉米夫定治疗中乙型肝炎病毒基因序列变异特点及其准种研究被引量:1
- 2011年
- 目的研究拉米夫定治疗中乙型肝炎病毒(HBV)逆转录酶区核苷酸序列变异、特点、含量及其与基因型和病毒载量的关系。方法普通DNA测序法检测拉米夫定治疗的117份慢乙肝患者血清HBV逆转录酶区基因序列及其基因型;其中99份用TaqMan法定量HBVDNA;64份用焦磷酸测序(Pyrosequencing)检测YMDD基序中碱基的频率。结果HBVYMDD变异组中C型43例,B型10例,A/B混合型1例;YMDD不变异组中C型54例,B型8例,D型1例,HBVDNA含量平均对数值在变异组和不变异组分别为:6.5699和6.6165;YMDD变异与其基因型及病毒载量无统计学意义;rtL180M位点变异与rtM204I/V位点变异高度相关;并且HBV野生株与变异株均同时存在。结论结合两种测序方法可以用来研究拉米夫定治疗中HBV基因序列变异情况及对YMDD耐药株进行定量。
- 田国保曾争黄中红陆海英于敏公维波王东斯崇文
- 关键词:种特异性拉米夫定
- 细菌感染患者血清中脂多糖结合蛋白的检测及其意义
- 2001年
- 尹彪于敏曾争于岩岩田庚善
- 关键词:LBP糖蛋白细菌感染血清脂多糖结合蛋白
- 慢乙肝患者骨代谢的一般特征
- 研究目的:分析未接受抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者(Chronic Hepatitis B,CHB)患者骨代谢的基本特征,分析可能参与骨质疏松发生的独立危险因素.研究方法:CHB患者80例及40例年龄、性别匹配的健康对照者...
- 张仁雯曹颖吴赤红张玉张霞霞陈建宏于敏徐小元
- 慢性HBV感染者抗病毒治疗前HBV基本核心启动子及前C区突变的检测及意义被引量:3
- 2011年
- 目的研究慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者抗病毒治疗前HBV基本核心启动子(BCP)突变和前C区(PreC)突变与HBeAg、HBV DNA水平和慢性肝病进展的关系。方法收集283例慢性HBV感染者抗病毒治疗前的血清标本,其中慢性乙型肝炎(CHB)185例,肝硬化(LC)98例。采用PCR后直接测序法检测HBV BCP和PreC区突变,同时确定基因型。结果在HBeAg阴性和HBeAg阳性CHB患者中,前C区A1896变异率分别为44.6%(37/83)和21.6%(22/102)(χ2=11.154,P=0.001),LC患者分别为43.4%(23/53)和17.0%(8/47)(χ2=8.101,P=0.004)。在HBeAg阳性患者中,BCP T1762/A1764双突变率LC组和CHB组分别为89.4%(42/47)和70.6%(72/102)(χ2=6.310,P=0.012)。在单变量分析中,只有年龄(≥45岁)(χ2=27.861,P<0.001)、BCP T1762/A1764双突变(χ2=8.675,P=0.003)和HBV DNA(≥105拷贝/ml)(χ2=20.499,P<0.001)与LC进展有关。多因素Logistic回归分析(匹配年龄和性别)发现,BCP T1762/A1764双突变(OR=3.260,95%CI:1.401~7.586;wald=7.517,P=0.006)和HBV DNA(≥105拷贝/ml)(OR=4.640,95%CI:2.331~9.237;wald=19.089,P<0.001)是LC进展的危险因素。结论前C区A1896突变与HBeAg的消失有关;年龄(≥45岁)、BCP T1762/A1764双突变和HBV DNA高载量(≥105拷贝/ml)与肝硬化进展有关。
- 郑金鑫于敏席宏丽郑颖颖尹胜杰张独佾王芳曾争于岩岩
- 关键词:突变
- 慢乙肝患者骨代谢的一般特征
- 张仁雯曹颖吴赤红张玉张霞霞陈建宏于敏徐小元
- 腺病毒介导的反义RNA下调细胞表面HIV-1辅助受体CCR5的表达
- 高效抗逆转录病毒疗法(HAART)是目前最有效的抗HIV-1治疗手段,可以使大多数感染者的病毒载量降低到可以检测的水平以下,延缓感染者进展到艾滋病期。但由于病毒变异而导致的耐药性的产生以及HAART药物的毒副作用使临床应...
- 李文刚于敏田秀兰张政徐小元
- 关键词:细胞表面CCR5基因
- 文献传递
- 慢乙肝患者骨密度、骨转化指标与肝纤维化进展的相关性分析
- 目的 评估慢性乙型肝炎患者骨密度(Bone mineral density,BMD),血清骨转化指标(procollagen I N-terminal peptide,PINP;C-terminal telopeptid...
- 张仁雯曹颖吴赤红张玉陆海英李敏然于敏张霞霞徐小元
- 关键词:骨转化PINP骨密度肝纤维化
- CCR5反义RNA重组表达载体的构建及鉴定
- 目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体以用于抗HIV-1的研究.方法用RT-PCR从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,用基因重组技术将此目的基因以正、反两个方...
- 于敏邢卉春徐小元王勤环邵一鸣
- 关键词:趋化因子受体反义RNA艾滋病
- 文献传递
- HBsAg及其与小鼠白介素-18融合蛋白表达质粒的构建和DNA免疫被引量:13
- 2001年
- 目的 观察乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)基因表达质粒 (pS)及其与鼠白细胞介素 18基因融合表达质粒 (p18S)的构建及其诱导BALB/c鼠免疫应答的能力。 方法 用聚合酶链反应(PCR)法获得的S基因克隆到真核表达质粒 pcDNA3.1+上 ,构建 pS。另用三步PCR法将小鼠白细胞介素 18基因融合到S基因的 5′端 ,再插入到 pcDNA3.1+的EcoRI位点上 ,构建了 p18S。分别免疫 10只和 6只BALB/c小鼠 ,阴性对照用 pcDNA3.1+免疫 4只BALB/c小鼠。用酶联免疫方法检测每份血清的抗 HBs的效价。采用3 H标记法检测脾细胞HBsAg特异性细胞毒反应。 结果 pS质粒免疫BALB/c小鼠多数于 4周时出现抗 HBs,最高可达 5 30mIU/ml,平均为 135mIU/ml。p18S质粒也能诱导低水平的抗 HBs ,平均为 2 0mIU/ml。pS和 p18S诱导的HBsAg特异性的细胞毒活性分别为 37.1%和 34 % ,而 pcDNA3.1+载体质粒免疫小鼠血清未能检出抗 HBs,细胞毒活性为 13.2 %。结论 pS质粒能够有效地诱导BALB/c小鼠的体液和细胞免疫反应 ,白细胞介素 18基因与S基因融合表达质粒免疫似乎不能增强免疫应答 。
- 柯亨宁斯崇文成军于敏刘丹
- 关键词:DNA免疫乙型肝炎表面抗原白细胞介素18小鼠
- 趋化因子受体CCR5反义RNA重组腺病毒载体的构建
- 2004年
- 目的 构建趋化因子受体CCR5反义核糖核酸 (RNA)重组载体并获取重组腺病毒 ,用于抗艾滋病病毒 1型 (HIV 1)基因治疗研究。方法 用逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)法 ,从健康人外周血单核细胞中扩增出趋化因子受体CCR5 5′端翻译起始区 6 36bp的互补脱氧核糖核酸 (cDNA)片段 ,将其克隆至Bluescript载体测序鉴定并确定方向之后 ,反向插入腺病毒载体穿梭载体pAdTrack 巨细胞病毒 (CMV)中 ,再与骨架质粒 pAdEasy 1共转染BJ5 183细菌同源重组 ,卡那霉素抗性培养基筛选阳性克隆 ;同源重组的载体用脂质体转染剂转染 2 93细胞 ,在荧光显微镜下观察细胞中绿色荧光蛋白 (GFP) ,获取的重组腺病毒用PCR法鉴定、氯化铯密度梯度离心法纯化。结果 成功构建了CCR5反义RNA重组腺病毒载体 ,并于 2 93细胞中包装、扩增得到高滴度的重组腺病毒 ,其滴度为 5× 10 11PFU/ml。结论 成功地构建了携带CCR5反义RNA重组腺病毒载体 ,为研究其抗HIV 1的作用打下基础。
- 李文刚邵沂王艳斌于敏卜定方徐小元
- 关键词:趋化因子受体腺病毒载体艾滋病病毒1型