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山羊β-酪蛋白基因启动区指导人血清白蛋白在转基因小鼠乳汁中的高效表达被引量：22: 2000年; 构建了包含山羊β-酪蛋白基因启动区5′端上游调控序列和外显子1, 2及内含子1在内的乳腺表达载体, 并与人血清白蛋白(hALB)小基因(含全长cDNA序列及其内含子1)构建成融合基因. 鼠尾静脉注射实验表明, 该融合基因能在小鼠乳腺中特异表达. 应用显微注射方法将该融合基因导入小鼠受精卵, 并将受精卵移植于假孕母鼠, 共获得33只F0代小鼠, 经PCR和Southern印迹杂交证实, 有8只小鼠(5♀, 3 ♂ )基因组中整合有hALB基因, 整合率为24.2%(8/33). Western blot分析表明, 在5只雌性整合小鼠中有3只表达了hALB蛋白, 放射免疫法测定其乳汁中hALB含量分别为3.54, 0.21和3.03 g/L.; 黄英黄缨黄赞颜景斌马湛卢盛敏任兆瑞曾溢滔黄淑帧; 关键词：人血清白蛋白转基因小鼠

山羊β-酪蛋白基因启动子指导的转基因小鼠乳汁高效表达人凝血因子Ⅸ被引量：53: 2002年; 为探讨应用转基因动物乳腺生物反应器高效表达人凝血因子IX(humanclottingfactorIX ,hFIX)的可行性 ,构建了包括山羊 β 酪蛋白基因启动子和外显子 1、内含子 1、外显子 2共约 6 .7kb片段以及hFIX全长cDNA序列和部分经改造的内含子 1的乳腺表达载体 ,通过转基因技术获得 12个原代转基因小鼠 (9♀ ,3♂ ) ,整合率为 11.2 %。经ELISA和Westernblot鉴定 8只转基因母鼠乳汁中有hFIX的表达并拥有很高的凝血活性 ,其中一只的表达量高达5 2 .9mg/L ,其凝血活性亦高达 2 79.2 %。FISH实验表明不同的转基因小鼠外源基因整合于小鼠的不同染色体上。结果证明所构建的山羊 β 酪蛋白基因启动子乳腺表达载体能有效指导hFIX基因在小鼠乳腺中高效表达 ,并能保持hFIX的生物活性。; 黄赞颜景斌黄缨孙琼肖艳萍黄英曾溢滔; 关键词：山羊转基因小鼠

转基因小鼠后代乳汁中外源基因的表达被引量：5: 2001年; 运用传统育种方法 ,用整合有人凝血因子 ( h F )的转基因小鼠进行近交和远交。通过选育 ,在其后代中出现 4只双重杂合子 ( 3♀ ,1 )及 2只纯合子小鼠 ( 2♀ )。收集雌鼠乳汁 ,用 ELISA测定其中 h F 蛋白含量。结果表明 ,相对于单纯杂合子小鼠 ,纯合子小鼠的表达量无增高 ( P>0 .0 5) ,而双重杂合子小鼠的表达量有显著提高 ( P<0 .0 1 )。结果提示 ,选育双重杂合子转基因后代小鼠 ,是一条提高转基因动物外源基因表达水平的有效途径。; 黄缨颜景斌孙琼黄英黄淑帧; 关键词：转基因动物杂交选育

乳腺表达人凝血因子Ⅸ的转基因小鼠的研究被引量：20: 1998年; 通过正压手动显微操作技术 ,将能在离体细胞和活体细胞表达的人凝血因子Ⅸ的表达载体pMCⅨmDNA导入 586枚昆明白种小鼠受精卵 ,随后将显微注射后存活的 4 99枚受精卵移植于假孕受体母鼠 ,获得2 16只F0 代仔鼠 .PCR和Southern印迹杂交分析证实有 6只仔鼠 (2♀ ,4♂ )的基因组中有外源基因阳性整合 ,整合率为 3% (6 / 2 16 ) ;ELISA测定 2只F0 代转基因雌鼠的乳汁中人凝血因子Ⅸ蛋白 (hFⅨ )的含量均已达 10 0ng/mL以上 ,一期法测定其凝血活性分别为 4 4 6 7%和 79 4 3% .; 黄英张克忠黄文英卢大儒黄缨马湛卢任兆瑞邱信芳薛京伦曾溢滔黄淑帧; 关键词：乳腺转基因动物血友病B

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黄缨