霍秀文 作品数:85 被引量:501 H指数:14 供职机构: 内蒙古农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 内蒙古自治区自然科学基金 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 文化科学 更多>>
光照强度对山药光合特性的影响和Rubisco羧化酶基因的克隆及表达分析 被引量:2 2023年 核糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(Rubisco)是光合作用中参与CO_(2)同化的关键酶,Rubisco酶的活化取决于Rubisco活化酶(rubisco activase,RCA)的活性。为探讨不同光照强度下山药形态结构变化和生理响应特征,本试验以‘大和长芋’山药为材料,研究在全光照及2种不同透光率T1(60%~75%FL)、T2(30%~45%FL)下山药叶片形态结构、光合特性及块茎淀粉积累相关指标,采用RT-PCR技术克隆山药Rubisco羧化酶基因,并分析其表达模式。结果表明:山药在遮光下,叶面积分别增大17.2%和33.43%;对气孔开度的变化显著,叶片厚度显著降低且上表皮厚度也明显减少,栅栏组织细胞彼此融合而变粗,海绵组织细胞排列较稀疏。净光合速率、蒸腾速率和气孔导度随光照强度的降低而减小,胞间CO_(2)浓度没有明显变化;叶绿素含量显著上升以及Rubisco、RCA酶活力下降。遮光影响块茎的膨大,淀粉、蔗糖含量及相关酶活性呈不同程度的降低。山药Rubisco羧化酶基因(DoRbcL)的ORF长度为1752 bp,编码583个氨基酸,与几内亚薯蓣的氨基酸序列相似度较高。DoRbcL基因呈组织特异性表达,在叶中表达量最高且遮光后基因表达量显著降低,且与遮光程度呈正相关。这为解析山药对光照变化的适应性和响应机制提供了理论依据。 陈妍 张艳芳 赵令敏 葛明然 邢丽南 霍秀文关键词:山药 光照强度 光合特性 基因克隆 CDPK20基因表达及其对山药块茎膨大调控作用研究 被引量:6 2021年 为探讨钙依赖性蛋白激酶(CDPK)在山药块茎淀粉及内源激素合成中的作用,该研究以‘毕克齐’和‘大和长芋’山药为试验材料,测定了块茎的淀粉、糖、内源激素含量等指标并进行相关性分析;采用RT-PCR技术克隆了钙依赖性蛋白激酶基因(CDPK20),并进行生物信息学分析,构建CDPK∶GFP融合载体,对CDPK蛋白进行亚细胞定位,实时荧光定量PCR对CDPK20在山药块茎不同发育时期的表达进行分析。结果表明:(1)CDPK20基因开放阅读框长为1047 bp,共编码348个氨基酸。(2)CDPK20蛋白定位于细胞核和细胞膜。(3)CDPK20的表达量在块茎种植后的105~165 d呈现先升后降的趋势。(4)CDPK酶活性与淀粉含量呈极显著正相关,与可溶性总糖含量和还原糖呈显著负相关,与ABA呈极显著负相关,与ZR呈极显著正相关。研究表明,CDPK参与块茎中的淀粉和糖代谢及植物内源激素ABA、ZR的合成。 王金鑫 季祥 高圆丽 张艳芳 邵盈 邢丽南 霍秀文关键词:山药块茎 基因表达分析 山药种质资源SSR分析及初级核心种质库的构建 被引量:4 2022年 【目的】分析山药种质资源的遗传多样性,建立山药初级核心种质库,提高山药育种效率。【方法】利用12对SSR引物对55份山药种质叶片基因组DNA进行PCR扩增,分析其遗传多样性,并采用聚类分析法构建山药初级核心种质库。【结果】12对引物在55份山药种质中扩增出128个位点,多态位点率为98.43%,单个位点平均等位基因数(Na)为1.9844,平均有效等位基因数(Ne)为1.4204,平均Nei′s基因多样性指数(He)为0.2650,单个材料扩增条带平均Shannon-Wiener多样性信息指数(I)为0.4172;聚类分析表明,种质间的遗传相似系数为0.570~0.898;经6次抽样,发现除多态位点率较抽样前明显降低外,其余指标变化较小,抽样比例30%多态位点率为93.75%,代表性较高,确定为山药初级核心种质库。【结论】55份山药材料遗传多样性较丰富;抽样30%构建的初级核心种质库可有效代表原始群体。 杨帆 张艳芳 王锦华 赵圆 赵令敏 张晓蒙 张勇 霍秀文关键词:山药 SSR 核心种质库 种质资源 万寿菊离体快繁体系的建立 2021年 万寿菊是重要的经济花卉之一。本研究以万寿菊为试验材料,采用茎段为外植体,筛选离体快繁体系不同阶段的最适培养基;通过测定内源激素的含量,探讨不同浓度的外源植物生长调节剂对离体快繁的影响。结果表明:MS+0.5 mg/L 6-BA为万寿菊初代培养和继代培养的最适培养基,培养代数的增加导致植株成活率降低;1/2 MS+0.5 mg/L 6-BA为最佳生根培养基,生根率为95%;移栽成活率为75%。内源激素含量可作为培养基添加生长素与细胞分裂素浓度的依据。研究结果为万寿菊组培苗的快速繁殖和产业化生产奠定了理论基础。 葛明然 张艳芳 邢丽南 邵盈 赵令敏 王金鑫 高圆丽 霍秀文关键词:万寿菊 植物生长调节剂 内源激素 番茄遗传转化体系的建立及LC和GFP标记基因的表达 被引量:11 2007年 本研究以小型番茄(miniature Lycopersicon esculentum Mill.)Micro-Tom为试材,建立其以子叶、下胚轴为外植体的高效、稳定再生体系及遗传转化体系。结果表明,以子叶、下胚轴为外植体时,诱导愈伤组织和芽分化的适宜培养基均为MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.2mg/L,芽分化率均可高达92%。两种外植体适宜的生根培养基均为MS+NAA0.1mg/L。同时,通过根癌农杆菌介导法,建立了Micro-Tom的遗传转化体系。而乙酰丁香酮能大大提高根癌农杆菌转化番茄的效率,当AS=180μm/L时,芽分化率为52.8%;OD600=0.14是转化的最佳菌液浓度;子叶外植体与农杆菌共培养后,经过诱导,根的再生,获得了抗性苗,利用绿色荧光蛋白(GFP)检测和整株表型为紫色(Lc)基因的表达,初步证明外源基因已经整合到Micro-Tom中,为番茄激活标签体系的建立奠定了基础。 苏彩霞 李君明 霍秀文 范维强 刘磊关键词:绿色荧光蛋白 番茄 不同光质对河套蜜瓜器官培养的影响 被引量:27 1999年 以不同光质对河套蜜瓜的不同器官的培养进行了研究。结果表明:(1)不同光质对河套蜜瓜愈伤组织的形成有很大的影响,其中,兰光对子叶和叶片培养的愈伤组织的形成有明显的促进作用,而红兰混合光对茎段培养的愈伤组织的形成有明显的促进作用。(2)不同光质在河套蜜瓜茎尖培养中,以红兰混合光对嫩茎的形成有明显的效果。(3)不同光质对河套蜜瓜根系的生长有明显的影响,其中,红光和红兰混合光对根系有明显的促进作用。 石岭 霍秀文 郝春光关键词:河套蜜瓜 光质 器官培养 蜜瓜 育种 苜蓿花叶病毒复制酶(P_2亚基)基因全长cDNA植物表达载体的构建 2000年 利用含有苜蓿花叶病毒中国分离株 (AIMV - Ch)复制酶 (P2 亚基 )基因编码区 5’端 c DNA (130 6 bp)的重组质粒 p AM5和编区 3’端及其非编码区 (12 34bp的重组质粒 p AM3构建了含有复制 (P2 亚基 )基因全长 c DNA及其 3’端非编码区的重组质粒 p AM35 ,并将其重组于植物表达载体 p GA6 43,构建其正链 RNA的表达载体 p GA35 。 霍秀文 曙光 哈斯阿古拉关键词:苜蓿花叶病毒 复制酶 植物表达载体 薯蓣属28种山药psbA-trnH序列系统学分析 被引量:4 2017年 通过分析山药28个不同样品的psbA-trnH序列,研究山药亲缘关系和系统进化关系。采用分子生物技术方法对不同来源地的28种山药资源进行PCR扩增、测序,通过构建系统发育树分析不同样品psbA-trnH片段的长度、变异位点、G+C含量、系统关系。扩增psbA-trnH长度在382~409 bp,GC含量在36.0%~34.72%之间,利用MEGA6.0计算核苷酸变异位点193个,信息位点183个保守位点226个。通过系统进化树的构建把不同产地山药样品分为2类。实验证明psbA-trnH片段能够处理种间的系统发育关系,对不同产地之间的样品也有一定的区分能力,为今后的山药分类提供分子水平的依据,为下一步研究不同产地山药之间的亲缘关系和解决品种间的混淆问题奠定基础。 张佳佳 霍秀文 王志敏 于文华 邵盈 敖兰吉亚关键词:山药 冰草种间杂种蒙农杂种组织培养再生和遗传转化体系的建立 被引量:16 2004年 以冰草属(AgropyronGaertn.)中的1个优质种间杂种——“蒙农杂种”冰草(A.cristatumA.desertorumcv.‘Mengnong’)为材料,以幼穗为外植体,建立了组织培养再生与遗传转化体系。试验中所用诱导愈伤组织的培养基为改良MS+2,4-D2.0~3.0mg·L-1,愈伤组织诱导率平均为83.4%;分化培养基为MS(无附加成分),分化率达59.6%;在1/2MS培养基上生根后得到完整小植株。在此基础上,以抗除草剂基因bar为目标基因,用基因枪法转化幼穗诱导的愈伤组织,并对再生植株进行PCR和Southern鉴定,以及在含除草剂(0.5mg·L-1的Glufosinate)培养基中可正常生长的结果表明,外源基因已整合到受体基因组DNA中,转化率为1.1%。 霍秀文 魏建华 徐春波 米福贵 云锦凤关键词:牧草 冰草 种间杂种 植株再生 遗传转化体系 幼穗 马铃薯块茎主要成分相关性分析 马铃薯(Solanum tuberosum)块茎中含有丰富的碳水化合物,具有很高的营养价值和药用价值,其中淀粉是马铃薯块茎中的主要贮藏物质,淀粉含量是评价马铃薯品质优劣的重要指标之一。抗性淀粉(Resistance St... 张灵超 霍秀文 尹玉和 苗慧琴 周翼虎 刘向宇关键词:马铃薯 淀粉 抗性淀粉