陈永青
- 作品数：33 被引量：136H指数：7
- 供职机构：复旦大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 普通野生稻和疣粒野生稻离体无性系的建立(简报)被引量：4
- 1999年
- 通过对普通野生稻和疣粒野生稻成熟胚愈伤组织的诱导，建立了野生稻的细胞种质库和无性繁殖系库，并获得普通野生稻再生植株，为野生稻种质资源的保护和开发利用奠定了基础。
- 王亦菲黄剑华叶鸣明曲志才陈永青
- 关键词：野生稻无性繁殖系
- 大肠杆菌12KD膜蛋白与526 bp oric DNA的特异性结合
- 1987年
- Jacob,F.等(1)提出的复制子(replicon)假说中,认为细菌染色体是与细胞外膜(cell envelopes)相接触的,这种接触对于子代染色体的分离和染色体复制的控制起重要作用。近年来,有些实验室研究证实,在大肠杆菌中染色体DNA复制起始点(oric)区段是一个重要的接触点。
- 陈永青宋大新
- 关键词：特异性结合大肠杆菌膜蛋白
- 分子伴侣GroESL在大肠杆菌中的克隆、表达及分离纯化被引量：2
- 1997年
- 将含分子伴侣GroESL基因的DNA片段,通过在合适的酶切位点进行酶切,将该基因克隆入高表达载体pKC220,含该表达质粒的工程菌经42℃热诱导后,分子伴侣GroESL基因在大肠杆菌中获得了高效表达,其中,分子伴侣蛋白GroEL的表达量占细菌总蛋白的40％,其辅助蛋白GroES的表达量占细菌总蛋白的15％;同时,建立了较简单的分离纯化路线,通过硫酸铵沉淀、DEAE-52柱层析,Sephadex G-50凝胶过滤等方法得到纯化的分子伴侣蛋白GroEL和GroES。
- 周颖殷长传张青宋大新陈永青
- 关键词：大肠杆菌分子伴侣GROESL纯化克隆
- 枯草芽孢杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因(bglS)在酵母菌中的克隆与表达被引量：5
- 1992年
- 将大肠杆菌质粒 pFG1中含枯草芽胞杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因(bg1S)的2.7kb EcoRI 片段克隆到大肠杆菌/酵母菌穿梭质粒上组建成杂种质粒 YCSH,转化 S.cerevisiae并得到表达。两种不同方向的插入子(YCSH1和 YCSH 5)在酵母菌中表达出的β-1,3-1,4葡聚糖酶活性相差2.3倍。根据酶作用底物专一性测定和酶反应的最适 pH 分析表明:YCSH中 bg1S 基因产物与出发菌株 B.subtilis 1.88的基本酶学特性完全相同,但 YCSH 中 bg1S基因在酶母中的表达水平远比大肠杆菌中低。
- 黄兴奇宋大新郑伟军杨帆陈永青
- 关键词：枯草芽孢杆菌葡聚糖酶酵母菌
- bglS基因的亚克隆及功能分析被引量：1
- 1991年
- 带有枯草杆菌β-1,3-1,4葡聚糖酶基因(bglS)7.1kb的EcoRI片段,经亚克隆,将1.5kb的EcoR I-Pst I酶切片段插入pUC19的polylinker上,转化E.coli JM101后合成出β-1,3-1,4葡聚糖酶,它能专一性地降解大麦β-1,3-1,4葡聚糖和地衣多糖,酶的大部分(>50%)留在胞内,其中25%分泌到胞外。根据酶特性分析,大肠杆菌中合成的β-1,3-1,4葡聚糖酶完全与出发菌株枯草杆菌相同。
- 陈永青宋大新黄兴奇江红敖万远郑伟军
- 关键词：基因亚克隆功能分析
- 结核分枝杆菌入侵诱导的人巨噬细胞全局性基因表达变化被引量：7
- 2003年
- 利用含有12800个基因全长或部分序列的基因芯片研究结核分枝杆菌无毒株入侵导致的人巨噬细胞U937全基因组在转录水平的表达谱变化。结果表明其中473个基因(3.7％)差异表达,表达上调的基因25个(5.3％),上调超过3倍的包括丝氨酸/苏氨酸蛋白质激酶,可溶性结合半乳糖苷的凝集素,蛋白质酪氨酸磷酸酶delta,DDR受体酪氨酸激酶等的编码基因,其余基因(94.7％)表达下调。表达下调的基因中,表达仅为原来1/3以下的25个,其中syndecan结合蛋白的表达下调12.5倍.芯片研究结果与结核分枝杆菌一般抑制宿主细胞免疫应答的趋势相符。这473个基因中的376个基因在GenBank中有记录,另外97个是新基因。生物信息学分析提示差异表达基因编码产物与细胞内信号传导、细胞因子反应、细胞骨架重建、细胞凋亡、铁代谢、电子传递、线粒体功能和离子通道等有关。这些差异表达基因中,有17个是文献报道过的,而且都印证了本文的结果。RT-PCR和Northern杂交实验确证了表达谱芯片研究结果。通过DNA芯片研究全局表达谱变化,揭示了细菌入侵早期导致的巨噬细胞表达变化,为深入研究结核分枝杆菌-宿主相互作用提供了基础数据和探索方向。
- 谢建平李瑶乐军徐永忠黄达蔷梁莉陈永青于善谦王洪海
- 关键词：人巨噬细胞结核分枝杆菌结核病基因芯片
- 枯草杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基本酶学性质研究被引量：4
- 1990年
- β-葡聚糖是大麦淀粉质胚乳细胞壁的主要成份,约占大麦总重量的10％。β-葡聚糖酶（Endo-1,3-1,4-β-Glucanase）能专一性地分解大麦β-葡聚糖,产生可利用的还原糖。因此,是啤酒酿造业,农副产品加工业中一个亟待开发应用的重要工业用酶。本文报道了对枯草杆菌（B.SubtiliS 1.88）中分离制备的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基本酶学性质的研究结果。1
- 黄兴奇郑伟军陈永青宋大新
- 关键词：枯草杆菌酶学性质
- ApiIa抗菌肽基因的化学合成、克隆及其在酵母中的表达被引量：4
- 1998年
- 用固相亚磷酰胺法合成了ＡｐｉＩａ抗菌肽基因，全长为８０个核苷酸．它被分成４个寡 核苷酸片段，分别在ＤＮＡ合成仪上合成．经分离纯化后的寡核苷酸片段经酶促连接，然后被 克隆到分泌型载体质粒ｐＦＤ１０１上．经限制酶酶切、ＰＣＲ模板检测以及双链 ＤＮＡ序列分析 检测，证明合成的ａｐｉＩａ基因和设计的完全一致．将含有ａｐｉＩａ基因的质粒ｐＦＤ１００１经ＢｇｌⅡ 酶切后，转化毕氏酵母．所得转化子经摇瓶发酵，上清液经２５％ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测，有 ＡｐｉＩａ抗 菌肽表达．用抑菌圈试验作定性实验表明，表达的ＡｐｉＩａ有明显的生物活性．
- 韩万江盛泽娟张青宋大新陈永青夏天辉
- 关键词：化学合成无性系抗菌肽
- bglS基因分子的克隆及其产物分析被引量：1
- 1990年
- 采用分子克隆技术,将含有bglS基因的2.7kb EcoR I片段与载体pUC19重新构建成杂种质粒pCSH102与pCSH103,2.7kb片段在两者中的插入方向相反。这两种质粒在大肠杆菌JM101中均表达β-1,3-1,4葡聚糖酶活性,但表达水平相差约3倍。通过对bglS基因产物的酶学特性分析表明,克隆子E.coli JM 101(pCSH 103)携带的bgls基因来自出发菌株Bacillus subtilis1.88,它们所产酶的基本特性相同。
- 陈永青宋大新黄兴奇江红郑伟军
- 关键词：基因表达啤酒
- 超甜蛋白的基因工程及开发研究进展被引量：20
- 1999年
- 甜蛋白是一类高甜度、低热量、多功能的新型超级甜味剂，应用前景广阔。由于它们存在于几种稀有的植物中，产地偏僻，产量低，提取困难，因而不能发挥它们的使用价值。运用基因工程等高新生物技术，将甜蛋白基因克隆到微生物细胞中，构建产生甜蛋白的基因工程菌株。
- 范长胜陈永青李爽雷肇祖
- 关键词：甜蛋白基因工程甜味剂
