陈志成
- 作品数：10 被引量：4H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2007年
- 本研究制备抗人尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2(UDP-glucose pyrophosphorylase2)的单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定。将正常成人肝组织匀浆离心并分离肝脏胞浆总蛋白,用肝脏胞浆总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,通过间接ELISA法、Western blot及免疫组织化学的方法对单克隆抗体进行特性鉴定,通过Uni-ZAP XR肝脏cDNA表达文库筛选鉴定抗体特异性。结果表明:通过间接ELISA筛选获得1株可稳定分泌抗人UGP2mAb的杂交瘤细胞系BAD062,其分泌的单克隆抗体的Ig亚类(型)为IgG2b(κ),Western blot结果显示该抗体可以特异地识别分子量为56kD的蛋白;应用单克隆抗体BAD062对人肝脏cDNA表达文库(Uni-ZAPXR)进行筛选,阳性噬菌斑测序结果显示2个阳性克隆插入序列均为UGP2。结论:单克隆抗体BAD062特异地识别抗原UGP2,该抗体可用于ELISA检测、Western blot、免疫组织化学实验,为UGP2的研究提供了有力的工具。
- 王婉高媛杨金菊柳晓兰鞠艳芳刘莉陈志成刘蓉迟俊邢维贤高建恩安立国孙启鸿
- 关键词：单克隆抗体CDNA表达文库
- 抗11β-羟类固醇脱氢酶1的单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的:制备抗人11β-羟类固醇脱氢酶1(homo sapi-ens hydroxysteroid 11-beta dehydrogenase 1,HSD11B1)的单克隆抗体(mAb)并初步鉴定其特性。方法:将正常成人肝组织匀浆离心并分离线粒体,用线粒体总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb,并通过间接ELISA法、Westernblot、免疫组化的方法对mAb进行特性鉴定,通过免疫沉淀、Uni-ZAP XR肝脏cDNA表达文库筛选鉴定抗原。结果:通过间接ELISA筛选获得1株可稳定分泌抗人HSD11B1 mAb的杂交瘤细胞系。其分泌的mAb的Ig亚类(型)为IgG1(κ),Western blot结果显示该mAb可以特异地识别相对分子质量(Mr)为35 000的蛋白;应用mAb CBF245对人肝脏cDNA表达文库(Uni-ZAP XR)进行筛选,阳性噬菌斑测序结果显示5个阳性克隆插入序列均为HSD11B1。结论:mAb BAD062特异地识别抗原HSD11B1,该mAb可用于ELISA检测、Westernblot、免疫组化和免疫沉淀实验,为HSD11B1的研究提供了有力的工具。
- 王婉杨金菊刘莉陈志成高媛高建恩安立国孙启鸿
- 关键词：单克隆抗体线粒体
- 应用单克隆抗体鉴定人类肝脏线粒体蛋白质组中的抗原优势蛋白
- 2010年
- 对线粒体蛋白质组的鉴定和分析有助于理解线粒体的功能和相关疾病的发病机制,包括能量代谢、凋亡、自由基产生、产热作用、钙离子信号通路等.本实验旨在鉴定人类肝脏线粒体蛋白质组中的抗原优势蛋白.用线粒体蛋白质作为免疫原,经过细胞融合、筛选和克隆,制备了240多个单克隆抗体杂交瘤细胞系.单克隆抗体识别的线粒体蛋白抗原通过人类肝脏cDNA表达文库筛选方法鉴定,相应的线粒体蛋白质的亚细胞定位通过免疫组化证实.发现了肝脏线粒体中6个抗原优势蛋白,分别被至少两种特异性的单克隆抗体所识别.这6个蛋白分别是乙酰辅酶A酰基转移酶(线粒体3-酮酯酰辅酶A硫解酶)2、醛脱氢酶1家族A1、氨甲酰磷酸合成酶1、二氢硫辛酰胺S乙酰转移酶(丙酮酸脱氢酶复合物的E2组分)、烯酰辅酶A水合酶1和羟基类固醇(11β)脱氢酶1.这些单克隆抗体有望应用于人类肝脏蛋白质组计划的相关研究,如去除优势蛋白、蛋白与蛋白之间相互作用的研究和验证等.
- 鞠艳芳杨金菊刘蓉柳晓兰杜雪梅刘莉陈志成迟俊刘淑娥高媛高建恩贺福初孙启鸿
- 关键词：线粒体单克隆抗体肝脏
- 小鼠和大鼠抗人癌抗原(Human Carcinoma Antigen,HCA)单克隆抗体的制备与鉴定
- 目的:人癌抗原HCA(Human Carcinoma Antigen)是粘液素样细胞表面分子,在前列腺癌切除样本中表达量较高,且前列腺癌病人血清中含量较正常人和良性前列腺增生病人血清中含量高,是一个可用于前列腺癌临床诊断...
- 陈志成吴琼李辉高媛柳晓兰陈勇高建恩孙启鸿
- 关键词：单克隆抗体
- 文献传递
- 抗人CXCR3-B分子N端多肽抗体的制备与初步应用
- 目的:CXCR3-B为新近发现的PF4的受体,在PF4抑制血管增生和肿瘤转移过程中可能发挥重要作用。本研究旨在获得抗人CXCR3-B分子第1—51个氨基酸多肽的特异性抗体,并对单克隆抗体的抗原识别表位进行初步筛选,同时对...
- 高媛陈志成刘莉杨金菊任飞垚李辉柳晓兰徐菡陈勇高建恩孙启鸿
- 关键词：多肽抗体单克隆抗体
- 文献传递
- 乙醛酸还原酶/羟基丙酮酸还原酶单克隆抗体的制备与鉴定
- 2007年
- 目的:制备鼠抗人乙醛酸还原酶/羟基丙酮酸还原酶单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定。方法:将正常成人肝组织匀浆离心并分离出肝脏胞质总蛋白,用肝脏胞质总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb,并通过间接ELISA法、Western blot及免疫组化的方法对mAb进行特异性鉴定,通过免疫沉淀联合质谱和Uni-ZAP XR表达文库筛选鉴定抗原。结果:通过间接ELISA筛选获得杂交瘤细胞株ADB291,其分泌的mAb Ig亚类(型)为IgG1(κ),Western blot结果显示该mAb识别相对分子质量(Mr)为35 000的蛋白;对免疫沉淀获得的相应抗原回收、酶切、质谱鉴定为GRH-PR。同时应用mAb ADB291对人肝脏cDNA表达文库(Uni-ZAP XR)进行筛选,筛选所获得的阳性噬菌斑测序结果显示2个阳性克隆插入序列均为GRHPR;阳性克隆转化表达后的Western blot结果确认该抗体识别Mr35 000的表达蛋白。结论:mAb ADB291特异识别的抗原为GRHPR,该mAb在GRHPR的功能研究和二型原发性尿草酸盐过多遗传疾病的临床诊断等方面具有应用价值。
- 陈志成杨金菊刘蓉王婉柳晓兰刘莹高建恩孙启鸿
- 关键词：单克隆抗体CDNA表达文库
- 血红蛋白A2单克隆抗体的制备与鉴定
- 2007年
- 本研究目的是制备鼠抗人血红蛋白A2(HBA2)单克隆抗体(McAb)并进行初步鉴定。将正常人胎肝组织匀浆离心并分离出人胎肝核总蛋白,用人胎肝核总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,并通过间接ELISA法、Western blot及免疫组织化学的方法对单克隆抗体进行特异性鉴定,通过免疫沉淀和Uni-ZAPXR表达文库筛选鉴定抗原。结果表明:通过间接ELISA筛选获得分泌AEE091抗体的杂交瘤细胞1株,其分泌的单克隆抗体Ig亚类(型)为IgG1(κ);Western blot结果显示,该抗体识别分子量为15kD的蛋白;Western blot识别AEE091免疫沉淀获得的分子量为15kD的抗原;同时应用单克隆抗体AEE091对人肝脏cDNA表达文库(Uni-ZAPXR)进行筛选,筛选所获得的阳性噬菌斑测序结果显示两个阳性克隆插入序列均为HBA2。结论:经筛选获得了分泌AEE091抗体的杂交瘤细胞株。AEE091抗体能特异识别HBA2抗原,因而其在HBA2的功能研究和珠蛋白生成障碍性贫血筛查等方面具有应用价值。
- 陈志成杨金菊刘蓉曲海霞王婉刘莉柳晓兰陈勇刘莹高建恩孙启鸿
- 关键词：血红蛋白A2单克隆抗体CDNA表达文库地中海贫血
- 抗丙酮酸脱氢酶复合体E2亚基单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的制备抗人丙酮酸脱氢酶复合体E2亚基(pyruvate dehydrogenase complex E2,PDC-E2)的单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定。方法将正常成人肝组织匀浆离心并分离线粒体,用线粒体总蛋白免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb,并通过间接ELISA法、Western blot及免疫组化的方法对mAb进行特性鉴定,通过免疫沉淀联合质谱、Uni-ZAP XR肝脏cDNA表达文库筛选鉴定抗原。结果获得1株可稳定分泌抗人PDC-E2mAb的杂交瘤细胞系。mAb的Ig亚类(型)为IgG1(κ),该mAb可用于ELISA检测、Western blot、免疫组化和免疫沉淀实验。结论成功制备了抗人PDC-E2的mAb,为PDC-E2的研究提供了有力的工具。
- 刘莉鞠艳芳杨金菊柳晓兰高媛王婉刘蓉曲海霞陈志成刘莹高建恩孙启鸿
- 关键词：单克隆抗体线粒体
- 小鼠和大鼠抗人癌抗原(Human Carcinoma Antigen,HCA)单克隆抗体的制备与鉴定
- 目的人癌抗原HCA(Human Carcinoma Antigen)是粘液素样细胞表面分子,在前列腺癌切除样本中表达量较高,且前列腺癌病人血清中含量较正常人和良性前列腺增生病人血清中含量高, 是一个可用于前列腺癌临床诊断...
- 陈志成吴琼李辉高媛柳晓兰陈勇高建恩孙启鸿
- 关键词：单克隆抗体
- 文献传递
- 应用抗体技术发现新的肿瘤标志物
- 人癌抗原Human Carcinoma Antigen(HCA)的鼠类同源物是epiglycanin。Epiglycanin是一类分子量比较大的糖蛋白，只表达在癌细胞上，而且与机体对肿瘤的免疫反应有关。抗epiglyca...
- 陈志成
- 关键词：抗体单克隆抗体肿瘤标志物
- 文献传递
